嘉南藥理科技大學補助專題研究計畫成果報告
不同萃取方法所得茶渣萃取物抗氧化及抗菌活性之比較
計畫編號：CNBT-93-02
執行期間： 民國 93 年 1 月 1 至民國 93 年 12 月 31 日止
主 持 人：葉東柏
(E-mail: [email protected])
執行單位：生物科技系
中 華 民 國 94 年 2 月 28 日
嘉南藥理科技大學補助專題研究計畫成果報告
不同萃取方法所得茶渣萃取物抗氧化及抗菌活性之比較
計畫類別：█個別型計畫 □整合型計畫
計畫編號：CHBT93-02
執行期間：93 年 01 月 01 日至 93 年 12 月 31 日
主 持 人：葉東柏 教授 嘉南藥理科技大學生物科技系 E-mail: [email protected]
中文摘要
關鍵詞：茶渣 兒茶素類 抗氧化能力 抑菌 本 計 畫 乃 針 對 於 國 人 飲 茶 風 氣 盛 行 ， 每 年 茶 飲 料 工 廠 所 產 生 之 茶 渣 量 相 當 可 觀 。 本 研 究 係 探 討 不 同 萃取方式，包括沸水及酒精萃 取自備茶渣，比較萃取物之成份與效果。結果顯 示，自製茶渣經 121℃ 沸水萃取 10 分鐘得到的 總酯化型兒茶素類物質含量（7.80 mg）（以每克 茶葉計）與 47.5% 乙醇水溶液萃取 40 分鐘
（7.90 mg）大致相當。而如單以 EGCG 的萃 取量來看，47.5% 乙醇水溶液萃取 40 分鐘所得 到的量卻顯著地高於 121℃ 沸水所能得到的萃 取量。其主要原因是以 121℃ 沸水萃取時，會導 致部分 EGCG 異構化為 GCG，萃取時間越長越 明顯。另採用 47%食用酒精萃取茶飲工廠之廢 棄茶渣。進而比較上述之茶渣萃取物之抗氧化 能力以及抑菌能力 。結果顯示三種萃取液凍乾 粉末進行的檢測。結果顯示，樣品的抗氧化能力 (清除 DPPH 能力及 TEAC 值)確有不同，茶飲料 工廠的廢棄茶渣用 47.5%乙醇水溶液萃取的抗 氧化能力最好，也具有較高的抑菌能力。可能的 原因包括：兒茶素物質等殘留量較多，47.5% 乙 醇水溶液萃取率較好，EGCG 不會發生異構化現 象，低極性的物質（包括 茶 黃 質- theaflavins 等）溶出量較多等。
二、緣由與目的
茶（Camellia sinensis）是古今中外非常普遍 的天然保健飲料原材，茶葉為我國的重要產業 之一，台灣茶葉年產量在兩萬公噸以上（1）。由於 島內土地面積狹小，且工資昂貴，以致製茶成本 較高。再加上加入世界貿易組織(WTO)後所造 成的衝擊，很明顯的需要進一步掌握有限的 資源，做更充分的利用。1984 年起，台灣省茶 葉改良場開始研發我國茶飲料的產製，並在食品 業界的積極配合下，我國罐裝茶飲料的產製，2001 年其銷售金額約為一百三十億元新台幣以上；估 計每年茶飲料工廠所需茶葉約為四、五千公噸
（2,3）
。
就申請人所知，茶飲料工廠中熱水萃取 後之茶渣多當做廢棄物丟棄。根據申請人的 初步分析，茶渣中仍殘留相當量(20-50%)的兒 茶素類物質，特別是沒食子酸酯類﹙ECG 及 EGCG﹚，（4,5）在另一方面，在發酵茶(烏龍茶 及紅茶等)的製造過程中兒茶素類物質會形成 一系列的氧化與聚合產物(包括
theasinensins，茶黃素，theaflavins 及茶紅素，
thearubigins 等)。此等物質，也有研究顯示具 有相當程度的保健與醫療效果。申請人認為
茶渣可經由不同的有機溶劑或 100-121℃的 熱水進行萃取，分析萃取液中之主要化學組 成，進而再比較各萃取物對於 E.coli 及造成齲齒 的主要形成菌 Streptococcus mutants 的抑制效 果。可藉此瞭解茶渣不同來源、萃取方法所得 到之萃取物的抗氧化及抑菌能力。
三、研究方法
1. 本 研 究 所 用 之 茶 渣 ， 除 部 分 為 自 行 製 備 外，其他則直接來自統一公司新市廠。
自行製備茶渣的程序如下：
秤取 10 g 自茶飲料工廠所取得的原料茶葉，
模擬一般沖泡茶葉的程序，加入 100 ℃的沸水 1 L，以 50 rpm 速度緩慢攪拌二十分鐘進行萃取，
以抽氣過濾方式將茶湯與茶渣分離，收集濾液（茶 湯）並加以定量；茶渣再以相同條件重覆萃取一 次，濕茶渣除直接進行萃取(見第 2 項)。
2.茶渣之萃取
將上述用沸水萃取兩次後的濕茶渣分成三等 分，裝入有蓋之三角瓶中，每組濕茶渣用量相當 於 3.33 g 的乾茶葉，然後分別添加 66 mL 的水
（兩組）或 47.5% 的乙醇水溶液，前者分別在加 熱板上加熱至 100℃ 沸水或在高壓滅菌釜中加 熱至 121℃（高壓沸水），而 47.5% 乙醇水溶液 一組則是在室溫下進行。茶渣以上述三種不同的 萃取方式分別萃取十、二十、及三十分鐘，不過 47.5%乙醇水溶液一組的萃取時間則延長至四十 分鐘。茶渣以熱水萃取者，每次萃取時要注意補 充沸水。各組於十及二十分鐘時各取 0.1 mL 的 萃取液備用，乙醇溶液萃取者另增加一次三十分 萃取的樣品。完成萃取（三十或四十分鐘）後進 行抽氣過濾，量測濾液體積。最後將各組各時段 的萃取液，以孔徑 0.45 µm 的濾頭過濾之，濾 液 再 以 HPLC 分析並換算兒茶素等物質之濃 度。
工廠茶渣在取回後直接進行 47.5% 食用 酒精(酒精購自隆田酒廠)萃取、分離與冷藏備 用。
3.茶渣萃取物之濃縮
分別取上述之茶渣之最後萃取液各 50mL，進行 減壓濃縮至約 5mL，再以冷凍乾燥法作最後乾 燥，並以秤重。
4.標準品及茶葉與茶渣萃取物之成分分析
為了解不同萃取方法所獲兒茶素等物質成分 的差異，乃依據葉等人之方法 (6)，亦即利用 HPLC 將之分離並配合 UV 偵測器以 280nm 吸光值之變化進行檢測與分析。所得層析圖譜進 而與本實驗室已 建 立 的 茶 葉 中 所 含 的 兒 茶 素 類物質及咖啡因標準品的 HPLC 層析圖譜和 相 關 滯 留 時 間 吸 收 光 譜 、 波 峰 面 積 及 相 對 濃 度等資料庫。如圖 1 進行比對與鑑定。分析條件 大致如下：
HPLC 所 使 用 之 管 柱 為 Lichrospher® 100 RP-18e（0.46×250mm），所使用的移動相及分析 條件如下：A 液（100%甲醇）與 B 液（含 10% 甲 醇及 1% 醋酸之水溶液）的混合液由開始的 10：
90 增至 37：63 進行二十分鐘沖提，再以 100% 甲 醇沖提十分鍾。最後再以開始的比例平衡管柱二 十五分鍾，流速為 1 mL/min。將兩次萃取液（茶 湯）以孔徑 0.45 µm 的濾頭過濾，以 HPLC 分析 之。並據以換算出萃取液中酯化型兒茶素物質及 咖啡因之含量變化。
5.抗氧化能力檢測
A. DPPH 自由基清除效應 (7)
測定方法是在微量離心管中先加入 400µL 不同 濃 度 的 Trolox 標 準 品 溶 液 ， 之 後 迅 速 加 入 400µL DPPH 甲醇溶液（0.2mM），使最後體積 成為 800µL。均勻混合後於室溫下避光靜置 90 分鐘，而後以分光光度計檢測 517 nm 處之吸光 值（A517）。另外將各組凍乾粉末樣品取以 1 mg 溶 於 1 mL 的 50% 甲 醇 水 溶 液 中 ， 稀 釋 為 30µg/mL 後，以同樣的方法與 DPPH 試劑反應並 測其 517 nm 之吸光值變化。後每一樣品各進行 三重複並取其平均值。當 DPPH 自由基被清除 愈多時，A517 的值降低的愈多；利用相對於空白 組吸光值下降的百分比，換算出各組樣品清除 50% DPPH 自由基所需的濃度（EC50），可判定 各試驗樣品清除 DPPH 自由基能力之強弱。
B. TEAC的測定 (8)
首先配製 7 mM 的 ABTS
（2,2’-azinobis[3-ethylbenzothiazoline-6- sulfonic acid] diammonium salt）溶液，再加入過硫酸鉀
（potassium persulfate, 最終濃度為 2.45 mM），
混合均勻，在常溫避光下進行反應十六小時，使 其產生穩定之藍綠色 ABTS‧+ 自由基水溶液，
最後將水溶液稀釋成 734 nm 處吸光值（A734） 約為 0.7 的濃度下備用。測定時，取上述試劑之 稀釋液 1 mL，加入 10µL 不同的樣品溶液，震 盪混合以進行反應，一分鐘後測其 734 nm 波長 下之吸光值，觀察藍綠色脫色程度。本論文係以 不同濃度之 Trolox 做為對照組，同時進行清除 ABTS‧+ 自由基能力的測定，做出 ABTS‧+ 清 除能力之標準曲線，再與試驗樣品之清除 ABTS‧+ 能力作比較。
本研究中各樣品 TEAC 值的測定程序，是 先以不同濃度之 Trolox 測試所得檢測值繪製成 TEAC 之 標 準 曲 線 ； 接 著 再 秤 取 各 組 樣 品 1 mg，溶於 2 mL 50% 之甲醇水溶液中，使成為濃 度為 500µg /mL 的溶液，再以相同的條件測定各 樣品存在時 A734 的變化，並據以換算出各組樣 品相當於多少濃度 (mM) 的 Trolox 所能提供 的抗氧化能力。本實驗係採一分鐘之短反應期間 進行測試，每一樣品各進行三重複並取其平均值。
6.抑菌試驗
以 paper disc diffusion 方法檢測茶渣萃取物之 抑菌能力。(9)使用兩種測試菌(E. coli,
BCRC10314 及 S. mutans, BCRC15255)依一般 的程序進行。(10)配製茶渣之萃取物之水溶液 (500 ppm)，經無菌處理後，取 25µL 注入於 6 mm 之 paper disc 上，於 37℃培養 48 及 72 小時後分 別量測抑菌圈的大小。每一樣品做三重複，取 其平均值，再由抑菌圈的大小換算出抑菌能 力。
四、結果與討論 1.標準曲線製備
標準品經 HPLC 分析的結果如下圖。
圖 1. 標準品之 HPLC 分析結果
標準品: a, gallic acid; b, EGC; c, caffeine; d, EGCG; e, EC; f, GCG; g, ECG; h, CG。
2.茶渣萃取方法之比較分析
A.茶葉萃取次數與酯型兒茶素含量
研究中先將茶葉連續二次經過 100 ℃ 的沸 水以緩慢速度攪拌二十分鐘進行萃取，所得之茶 渣再分別使用不同萃取條件（包括 100 ℃沸水、
121 ℃高壓沸水及 47.5%乙醇水溶液）分別進行 十、二十、及三十分鐘的萃取來比較酯化型兒茶 素類物質及咖啡因之溶出量的變化。茶葉經過 100 ℃的熱水連續萃取二次，由 HPLC 的結果 可看出在第二次的萃取液中，酯化型兒茶素類物 質及咖啡因會明顯的降低許多。而在表 5.1（88 頁）可顯示出總酯化型兒茶素的溶出量由 29.67 mg/g 減為 6.1 mg/g ; 而咖啡因溶出量也由 38.39 mg/g 減為 3.87 mg/g，顯示酯化型兒茶素 類物質及咖啡因均易溶於 100 ℃的熱水。
表1 茶葉與茶渣樣品於不同條件下的萃取液之成 分變化
Total Esterified
catechins (mg/g)
GA (mg/g)
Caffeine (mg/g) 工廠茶葉第一次
100℃沸水、20' 29.67 1.87 38.39 工廠茶葉第二次
100℃沸水、20' 6.10 0.29 3.87 茶渣A-100℃、10' 5.27 0.10 0.88 茶渣A-100℃、20' 5.82 0.13 0.59 茶渣A-100℃、30' 5.53 0.15 0.62 茶渣B-120℃、10' 7.80 0.34 1.21 茶渣B-120℃、20' 7.76 0.41 0.74 茶渣B-120℃、30' 7.39 0.55 0.85
茶渣C-酒精、10' 3.49 - 0.64
萃取 物質 萃 取
條 件
茶渣C-酒精、20' 6.40 - 0.86 茶渣C-酒精、30' 7.35 - 1.02 茶渣C-酒精、40' 7.90 - 0.92 B.不同萃取條件和時間對總酯化型兒茶素及咖啡 因溶出的影響
不同萃取條件與時間對茶渣抽出液的影響 中，通常高溫和長時間的萃取，可溶性物質的萃 取效率高。因此，萃取溫度越高和時間越長即萃 取液中所得到的可溶性物質含量就越多，最後萃 取曲線即呈平穩狀甚或下降，表示時間再延長，
則萃取效果不一定增加 (11) 。表 1 和圖 2 及 3 顯 示出此項結果。
圖2.不同萃取條件和時間對總酯化型兒茶素萃取 量的影響
圖 3 不同的萃取條件和時間對咖啡因萃取量的影響 茶葉經第二次萃取後，再以 47.5% 乙醇及 121 ℃ 方式萃取出總兒茶素的最高量比茶葉經 第 二 次 萃 取 所 得 到 量 分 別 多 了 2.11mg/g 和 2.07mg/g，而咖啡因和第二次萃取相比，則分別 少了 2.95 mg/g 和 3.13mg/g。另外，在茶渣 100
℃的任何萃取時間下，總兒茶素及咖啡因萃取量
皆小於第二次沖泡的萃取量。
C.不同萃取條件和時間對個別酯化型兒茶素及 GA變化之探討
由圖 4 和 5 可看出，不同萃取條件下對茶渣 中兒茶 素 類物質 的 變化與 萃 取 會 有不 同的影 響。使用 47.5% 乙醇水溶液萃取時，隨萃取時 間的增加，其 EGCG、ECG 及 CG 所溶出的量 也越高。另外，GA 含量因過低而偵測不到。利 用 100 ℃ 沸水條件下萃取時，則隨時間增加至 二十分鐘，其 EGCG 所溶出量達到最高，但隨 時間增加到三十分鐘，其 EGCG 含量則些微降 低；GA 和 CG 則隨時間延後而增加，而 GCG 及 ECG 的溶出量則無太大變化。另外，於 121
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4
0 5 10 15 20 25 30
時間(min)
濃度(mg/g)
GA EGCG GCG ECG CG
圖4. 高壓沸水萃取液中兒茶素類物質的變化圖
0 1 2 3 4 5 6
0 5 10 15 20 25 30 35 40 時間(min)
濃度(mg/g)
GA EGCG GCG ECG CG
圖5 乙醇萃取液中兒茶素類物質的變化圖
℃ 高壓沸水條件下的萃取測試中發現，萃取十分 鐘所測得的 EGCG 和 ECG 含量比 100 ℃ 沸
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
0 5 10 15 20 25 30 時間(min)
濃度(mg/g)
47.5EtOH萃 100℃萃 121℃萃
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4
0 5 10 15 20 25 30 時間(Time)
濃度(mg/g)
47.5EtOH萃 100℃萃 121℃萃
水萃取十分鐘的溶出量要低，且隨時間增加而有 逐漸減少的趨勢；但其 GA、GCG 及 CG 的溶出 量卻高於 100 ℃沸水及 47.5% 乙醇水溶液萃取 十分鐘的量如圖 4 及 5。其可能原因是，如果萃 取的溫度高於 100 ℃ 時，除了會有部分裂解外
（產生 GA），也會造成 EGCG 以及 ECG 的異 構化效應(12)，此乃導致以高壓沸水萃取時 GA、
GCG 及 CG 溶出量增多的結果。
3.茶飲料工廠的茶渣萃取
由 茶 飲 料 工 廠 所 取 得 的 茶 渣 進 行 47.5%
乙 醇 水 溶 液 萃 取 四 十 分 鐘 ， 接 著 將 茶 渣 進 行 初步過濾，分離茶渣及濾液，取部分濾液以孔 徑 0.45 µm 的濾頭過濾之，接著以 HPLC 分析 其 中 兒茶素類及咖啡因物質含量， 其 分 析 結 果 如圖6與表2所示。
圖 6 茶飲料工廠廢棄茶渣之乙醇萃取液之層析圖譜 表2 茶飲料工廠茶渣之乙醇萃取液中兒茶素 類及咖啡因含量(mg/g乾茶葉)
萃取
物質 EGCG GCG ECG CG Total GA Caffeine 萃取
量 11.47 - 4.23 - 15.7 - 2.01 根據分析數據所得顯示，以 47.5% 乙醇 萃 取 茶 飲 料 工 廠 茶 渣 四 十 分 鐘 ， 可 得 到 相 當 量的酯化型兒茶素及咖啡因物質。推測其主要原 因，得知，除了使用 47.5% 的乙醇水溶液具有 較高的萃取效率，特別是酯型兒茶素；另外更重 要的是茶飲料工 廠 先 前 的 萃 取 程 序 的 較 不 完
全，因而造成有較多酯化型兒茶素及咖啡因殘 留所致 (6)
4.茶葉與茶渣萃取物之凍乾物組成
分別記錄茶葉與茶渣萃取物經凍乾後的樣品 重量，並做比較。結果顯示自茶葉的凍乾粉末為 256.2mg （ 換 算 成 每 克 原 料 茶 葉 時 則 為 509.7 mg ）， 飲 料 工 廠 之 廢 棄 茶 渣 的 凍 乾 粉 末 為 831.8mg （ 換 算 成 每 克 原 料 茶 葉 時 則 為 93.1 mg），茶渣經 121℃（高壓沸水）萃取的凍乾粉 末 為 288.5mg （ 換 算 成 每 克 原 料 茶 葉 時 則 為 57.7mg），而在實驗室自製的茶渣經 47.5% 乙醇 水溶液萃取的凍乾粉末為 250.5 mg （換算成每 克原料茶葉時則為 50.1 mg）。將上述粉末各取 1 mg 溶於 1 mL 50%的甲醇水溶液中，取其中 100 µL，以孔徑 0.45 µM 的濾頭過濾之，濾液再利 用 HPLC 進行分離並配合 UV 偵測器以 280 nm 吸光值之變化進行檢測與分析茶渣萃取液結果
（見表 3）所示，實驗室自製的茶渣中總酯型兒 茶素的殘留量明顯較來自茶飲工廠少，顯示在沖 泡時較為完全。而 121℃沸水與 47% 乙醇水溶液 萃取時，在酯型兒茶素的組成上有顯著差異，結 果與前面的論述相似。
表 3 茶葉及茶渣萃取物之凍乾粉末中兒茶素類及 咖啡因物質含量(以每克茶葉及所得的茶渣計)
EGCG (mg/g)
GCG (mg/g)
ECG (mg/
g) CG (mg/
g)
Total Esterified catechins
(mg/g) GA (mg/
g)
Caffeine (mg/g)
茶葉 47.09 7.33 12.54 - 66.96 4.6 58.33
茶渣 1 5.92 - 1.40 - 7.32 - -
茶渣 2 4.12 2.01 0.74 0.69 7.56 1.21 1.29 工廠
茶渣 11.19 - 3.09 - 14.28 - 1.81
5. DPPH 自由基清除效應(7)
由表 5.4得知在茶葉萃取物之凍乾粉末配製 成濃度為 33.481 µg/mL 的 50% 甲醇溶液時，
可達到50%清除 DPPH 自由基的能力。而再同樣 的條件下，茶渣 1（利用 47.5% 乙醇水溶液以 20倍的體積萃取四十分鐘）以與茶渣 2（利用121
℃高壓沸水以20倍的體積萃取十分鐘）和工廠茶
萃 取
物 萃 質
取 條
件
渣（茶飲料工廠所產生的廢棄茶渣以 20 倍體 積的 47.5% 乙醇水溶液萃取四十分鐘）萃取物 之凍乾粉末所配製的 50% 甲醇溶液，在濃度分 別為 52.755、85.254 及 27.730 µg/mL 時，也可 達到清除 50% DPPH 自由基的能力；而當作對 照組的 Trolox 清除 50% DPPH 自由基所需的 濃度（EC50）則為 19.079 µg/mL。由上述數據顯 示，茶葉及工廠茶渣萃取物之凍乾粉末具有較佳 清除 DPPH 自由基的能力，亦即具有較強提供 氫原子的能力。
由表4發現工廠茶渣之萃取物具有相當好的 抗氧化效果，單位重量的抗氧化能力甚至有優 於 茶 葉 萃 取組的現象。吾人探討其原因發現，
可能是一般茶 飲 料 工 廠 用 熱水進 行 茶葉萃取時 所使用的溫度通常較低，導致萃取較不完全，因 此在沖泡後會有較多的酯型兒茶素物質等殘留在 茶渣中未被萃取出，如前述當利用 47.5% 乙醇 水溶液萃取時能夠得到較多的 EGCG （如表1及 圖 5.10 和 5.11），且 EGCG 不會發生異構化 成 GCG (12)，所以導致其具有較佳清除 DPPH 的能力。另外一種可 能 是 因 為 使 用 47.5% 乙 醇水溶液萃取時，除了可以萃取出酯型兒茶素 物質外，也會將茶渣或茶葉中極性較低的物質
（特別是茶黃質- theaflavins 等，滯留時間在 20~30分鐘間）萃取出來(4)。
由茶渣 1 及茶渣 2 所得萃取物之凍乾粉末 的總量相仿，而且對於 DPPH 自由基亦有清 除的能力，不過效果較茶渣 3 的萃取物差。
由結果如表 5.4 顯示，以 47.5% 乙醇水溶液的 萃取液清除 DPPH 自由基的能力優於 121
℃ 高壓沸水的萃取液。原因應與前述者相 同。所以就抗氧化能力而言，利用 47.5% 的 乙醇水溶液進行萃取，較以沸水及 121℃高壓 沸水萃取要來的好。
5.總抗氧化力（TEAC）的比較(8)
表4是茶葉及茶渣萃取物凍乾粉末個別的 TEAC 值。因為 TEAC 值與對 DPPH 的清除效 應同樣屬於檢測自由基清除能力，因此，預期各 樣品的 TEAC 值會和清除 DPPH 的能力有相 同的趨勢。
表 4 茶葉及茶渣萃取物凍乾粉末抗氧化能力之比 較 (n=3)
Sample 總重* (mg)
酯化型兒 茶素*
(mg)
DPPH EC50
(µg/mL)
TEAC**
(mM) Trolox -**** - 19.08(±0.03) - 茶葉*** 509.7 66.96 33.48(±0.04) 1.35(±0.01) 茶渣 1*** 50.1 7.32 52.76(±0.03) 1.17(±0.02) 茶渣 2*** 57.7 7.56 85.25(±0.04) 1.08(±0.02) 茶渣 3*** 93.1 14.53 27.73(±0.03) 1.46(±0.03)
* 以 1 克乾原料茶葉計
** 各樣品濃度為 0.5mg/mL
*** 茶葉及茶渣之萃取條件如表 5.4
**** " - "表無法測出
結果表4顯示茶葉萃取物凍乾粉末之 TEAC 值為 1.351 mM，而茶渣 1、2 和工廠茶渣三種 樣品萃取物之凍乾粉末的 TEAC 值分別為 1.170、1.082 及 1.463 mM。經過比較後，四組 樣品之 TEAC 值確實與 DPPH 的清除能力有 相同的趨勢。在比較四組樣品之總抗氧化能力 後，利用 47.5% 乙醇水溶液萃取的工廠茶渣所 表現的總抗氧化能力仍然是優於使用 100℃
沸水沖泡的茶葉樣品；同樣的情況也發生在茶渣 1 及茶渣 2 的總抗氧化能力的表現上。造成四種 樣品間總抗氧化能力的表現上不同的可能原因與 上一節所敘述的理由應該是相同的。
由上述的實驗結果可以證明，茶渣利用 47%
乙醇水溶液浸泡所到的萃取物，不論就 DPPH 自 由基的清除能力或 TEAC 值(總抗氧化能力)，均 較 121℃沸水的萃取物高。
6.抑菌能力
根據 paper disc diffusion 方法檢測茶渣萃 取物之抑菌能力。由圖 7 顯示不同方法得到的 茶渣萃取物之抑菌兩種測試菌(E. coli 及 S.
mutans)能力有明顯的差異。有趣的是，就固 定濃度(500 ppm)的茶渣萃取物之水溶液而言，
直接得自工廠的茶渣之 47.5%酒精萃取物，其單 位重量之抑菌能力幾乎與茶葉之水萃取物相 當，其原因應與它們的組成有關。雖然由表 3 與 4 顯示，總酯型兒茶素物質前者較少，但工廠茶 渣利用 47.5%酒精當做溶劑所得到的萃取物中，
卻含有一些茶葉之水萃取物所沒有的成分，而這
些東西除了具有上述的抗氧化能力之外，顯然也 具有相當的抑菌能力。
0 2 4 6 8 10 12 14 16
48 72 48 72
Incubation Tim e (hr)
Diameter of Lysis Zone (mm)
茶 葉 茶 渣 1
茶 渣 2 工 廠 茶 渣 1
綜合以上的結果，工廠茶渣之萃取物具有 明顯的抗氧化與抑菌能力，值得進一步的加以 利用，但是否能夠應用於商品，包括潔牙劑、
食品之抗氧化暨防腐劑等，有待進一步的探 討。雖然酒精的使用與消耗是一項負擔，但茶渣 畢竟是廢棄物，幾乎是不要錢的。
七、參考文獻
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E.coli S.mutans
