第四章 實驗結果
第三節 動物實驗結果
(一)口服單一劑量毒性試驗(Single dosage oral toxic)
藉由口服濃度10 g/kg的臺灣天仙果水萃液,觀察有無不良反應或 死亡。也可用同樣方法試驗(即某一劑量注入小白鼠內,若5隻中只 有1隻死亡,則減劑量再試直至試出5隻小白鼠均不死亡的最大劑 量)。求出某藥物的安全係數。
計算公式:
安全係數=小白鼠最大耐受量×成人體重(g)/成人用量×小白 鼠體重(g)。
表十五、臺灣天仙果果實之毒性試驗結果
mice
百分率LD
50存活隻數
10 100%
>10g/kg死亡之數
0 0% 0
毒性試驗中,在 10 隻老鼠給予高劑量 10 g/kg 的臺灣天仙果果實 的48 小時,並無發生異樣和死亡的現象,所以推估臺灣天仙果果實 並無毒性。
(二)、葡萄糖口服耐受性實驗(Oral Glucose Tolerance Test)
本實驗於管餵臺灣天仙果果實(低劑量0.1 g/kg、中劑量0.5 g/kg、
高劑量1 g/kg)後,以腹腔方式給予實驗鼠葡萄糖(2 g/kg BW),分別在
給予葡萄糖前及後的30、90、120 分鐘,利用尾巴採血方式取得血液,
b Values represented mean ± S.D. of three parallel measurements.
圖二十七、OGTT 實驗下給予臺灣天仙果果實在低、中、高劑量之血 糖濃度時間點變化
可知給予臺灣天仙果高劑量下,抑制效果分別為,高劑量(1 g/kg)
>中劑量(0.5 g/kg)>低劑量(0.1 g/kg),表針對口服耐受性實驗中,臺 灣天仙果對血糖升高有調降作用。
(三)、 STZ 誘發糖尿病動物模式之建立:
正常小白鼠及STZ 誘發小白鼠於實驗前先測量並紀錄小白鼠體
重之變化,在STZ 注射後第七天,測量小白鼠的體重及血糖,當血 糖高於130 mg/dL 時判斷已誘發成功,並開始進行實驗,隨機分為五 組,分別為:
①正常老鼠(control組)
②糖尿病鼠(diabetes組)
③糖尿病鼠加臺灣天仙果高劑量FH(diabetes+臺灣天仙果 1g/kg day)
④糖尿病鼠加臺灣天仙果中劑量FM(diabetes+臺灣天仙果 0.5g/kg day)
⑤糖尿病鼠加臺灣天仙果FL 低劑量(diabetes+臺灣天仙果 0.1g/kg day)
(四)、糖尿病鼠給予臺灣天仙果藥物之血糖週期變化
禁食大白鼠血漿葡萄糖濃度,如圖二十五所示。經過注射 streptozotocin 誘導成高血糖後,再每天給與臺灣天仙果低、中、高
劑量(FL 0.1 g/kg、FM 0.5 g/kg、FH 1 g/kg dose),每週固定一次尾巴
響血糖指標,醣化血色素為較具穩定性且可供代表糖尿病表現之良好 指標。於每週採血進行醣化血色素分析實驗,結果如下圖,其中給予 誘發成高血糖的組別在四週中其醣化血色值在臺灣天仙果與高血糖 組均呈顯著性下降(p<0.05)與高血糖組為6.56 ± 0.63%、5.99 ± 0.29
%、6.37 ± 0.35%、6.98 ± 0.33%、6.66 ± 0.36%;而臺灣天仙果組5.71
週平均體重均有些微下降的趨勢,但無統計上差異。
圖三十、大白鼠投與臺灣天仙果果實與STZ 之糖尿病模式體重週期 變化
(七) 糖尿病鼠給予臺灣天仙果藥物之Triglyeride週期變化
試驗於第0、1、2、3、4週進行三酸甘油酯濃度分析。結果如下 圖所示,在試驗第1週三酸甘油酯高達125 ± 0.2mg/dL,與空白對照組
0 1 2 3 week
weight g
270 280 290 300 310 320 330 340
control DM FL FM FH
相較呈顯著性上升,在第5週仍維持高水平。試驗於加入臺灣天仙果
異(p<0.05)。
圖三十二、大白鼠投與臺灣天仙果果實與STZ 之糖尿病模式 Cholesterol 週期變化(p<0.05)
(九)糖尿病鼠給予臺灣天仙果藥物之HDL週期變化
此實驗針對脂質運輸的脂蛋白含量進行分析,結果如下圖,試驗 於第5、6、7、8、9週進行高密度脂蛋白濃度分析,其中HDL濃度於
0 1 2 3 4 week
cholesterol mg/dL
40 60 80 100 120 140 160
control DM FL FM FH
**
各試驗組在給予臺灣天仙果組別有上升的趨勢,與高血糖組相較有顯
著差異。
的功能是分泌胰液並經由管線排出,以協助油脂的消化;而內分泌腺 體主要由無管腺導狀的胰島組織所構成,胰島中具分泌 insulin 作用 的細胞為 β-cell,為此實驗主藥之標的細胞。背景藍色部分為負責外 分泌的細胞。染上紅棕色的組織細胞極為負責內分泌的胰島細胞。而 結果顯示在各試驗組中β-cell 並未消失,顯示仍具分泌 insulin 的能力。
藉由換算胰島細胞占全部細胞的百分比,來推估胰島細胞所占百 分比,百分比愈高表示胰島被破壞的愈少。
表十六、老鼠胰臟 β-細胞 IHC 試驗
N=20 control DM FL FM FH 修復胰
臟率
100% 0.081% 0.18% 0.38% 0.43%
圖三十五、正常鼠胰臟 β 細胞 IHC 試驗
Sprague-Dawley 品系老鼠對照組於第九週犧牲,取胰臟切片及 IHC 試驗。
胰臟分為外分泌及負責內分泌的胰島兩部分。染色結果,背景藍色部分為負責外
分泌的細胞,染上黃褐色的組織細胞為負責內分泌的胰島β 細胞。
圖三十六、糖尿病鼠投與胰臟β 細胞 IHC 試驗
Sprague-Dawley 品系老鼠對照組於第九週犧牲,取胰臟切片及 IHC 試驗。
胰臟分為外分泌及負責內分泌的胰島兩部分。染色結果,背景藍色部分為負責外
分泌的細胞,染上黃褐色的組織細胞為負責內分泌的胰島β 細胞。
40X 200X
40X 200X
圖三十七、糖尿病鼠投與臺灣天仙果低劑量胰臟β 細胞 IHC 試驗 Sprague-Dawley 品系老鼠對照組於第九週犧牲,取胰臟切片及 IHC 試驗。
胰臟分為外分泌及負責內分泌的胰島兩部分。染色結果,背景藍色部分為負責外
分泌的細胞,染上黃褐色的組織細胞為負責內分泌的胰島β 細胞。
圖三十八、糖尿病鼠投與臺灣天仙果中劑量胰臟β 細胞 IHC 試驗 Sprague-Dawley 品系老鼠對照組於第九週犧牲,取胰臟切片及 IHC 試驗。
胰臟分為外分泌及負責內分泌的胰島兩部分。染色結果,背景藍色部分為負責外
分泌的細胞,染上黃褐色的組織細胞為負責內分泌的胰島β 細胞。
圖三十九、糖尿病鼠投與臺灣天仙果高劑量胰臟β 細胞 IHC 試驗 Sprague-Dawley 品系老鼠對照組於第九週犧牲,取胰臟切片及 IHC 試驗。
胰臟分為外分泌及負責內分泌的胰島兩部分。染色結果,背景藍色部分為負責外
分泌的細胞,染上黃褐色的組織細胞為負責內分泌的胰島β 細胞。