臺灣天仙果各部位之抗氧化活性研究

臺灣天仙果莖總重約 495g，葉子約 312g，根重 456g，果實重 479g，而四種不同部位之水萃取率結果如表十

表十、臺灣天仙果四種不同部位植物之水萃取率

Species Water extract yield (% ,w/w)

^a 臺灣天仙果莖(FS) 27.11 % 臺灣天仙果葉子(FL) 11.09 % 臺灣天仙果根(FR) 23.24 % 臺灣天仙果果實(FF) 29.85 %

a Dried weight basis.

水萃取率由高而低依序為臺灣天仙果果實(29.85 %)、臺灣天仙果 莖(27.11 %)、臺灣天仙果根(23.24 %)、臺灣天仙果葉子(11.09 %)。

第二節 臺灣天仙果各部位之抗氧化活性研究

一、抗氧化活性之研究

(一)Trolox 當量的總抗氧化能力測定(TEAC)：

此實驗主要是藉由清除一相當安定的陽離子自由基 ABTS⁺‧，

來探討抗氧化物之抗氧化能力。自由基 ABTS⁺‧呈藍綠色，可在734 nm 波長下被吸收，所以，可以儀器檢測 734 nm 波長下吸光值的降 低，來評估自由基 ABTS⁺‧被清除的程度。吸光值越低表示樣品清 除 ABTS⁺‧自由基能力越強。而 trolox 為一水溶性的維生素 E 類似 物，已知具有強效抗氧化力¹⁸⁶，本實驗藉由 trolox 的檢量線，可將樣 品 之 吸 光 值 換 算 成 相 當 trolox 濃 度 (mM) 的 抗 氧 化 能 力 ， 即 以 TEAC(Trolox equivalent antioxidant capacity)值表示，而 TEAC 值愈高 表示清除ABTS⁺‧自由基能力越強。TEAC 值被定義為 1000 ppm 的 樣品相當trolox 標準溶液抗氧化力之濃度值(μM)。結果如圖二十。

FF FL FS FR 灣天仙果根) (Each value represented mean ± S.E.，n=3)

全部 TEAC 值水萃取物之 TEAC 值由高而低依序為臺灣天仙果 果實(1728 ± 1.37)＞臺灣天仙果葉子(1699.5 ± 3.02)＞臺灣天仙果莖 (159.29 ± 2.01)＞臺灣天仙果根(133.3 ± 0.01)。由上可知，最強的總抗 氧化能力出現在臺灣天仙果果實。

本沾點有樣品液的地方會呈現不同密度的白點，文獻也指出 ¹⁸⁷ 白點 的密度大小正比於該樣品對DPPH 自由基的清除能力。所以，此實驗 應該是一種快速的DPPH 自由基清除之定性試驗，能協助實驗者於最 短的時間內立即了解樣品之抗氧化潛力。

實驗結果顯示水萃取物(果實)的白點密度普遍大於其他部位萃 取物。而水萃取物在 125 μg/mL 的稀釋濃度時，臺灣天仙果果實(FF)、

臺灣天仙果葉(FF)仍可見濃密度白點，而白點密度相當於同濃度的 GSH。

圖二十四、臺灣天仙果四個部分之水萃取物之DPPH 自由基 TLC 板 清除作用。濃度為2000、1000、500、250、125 及 62.5 μg/mL。(Each value represented mean ± S.E.,n=3)

(三)DPPH 自由基清除效應：

DPPH 為一種相當穩定的自由基，其為紫藍色，在 517 nm 波長 下有強的吸收光，當DPPH 與具有供氫能力之抗氧化劑反應時，其顏 色會消失，因此，在517 nm 的吸光值就會降低，而吸光值降的越低，

表示抗氧化劑(AH)的供氫能力越強，也就是指該抗氧化劑清除自由基 的能力越強。其反應式如下：

DPPH˙(violet) + AH → DPPH：H(decolorized) + A˙

實驗結果如圖二十五，橫軸代表樣品之濃度，縱軸則為樣品清除 DPPH 自由基的清除率，圖中可清楚看到不同植物之水或乙醇之萃取 物，皆顯示隨樣品的濃度增加，其對DPPH 自由基的清除率也逐漸上 升。而由其數據計算出樣品對DPPH 自由基清除率達 50%時的樣品濃 度(即所謂的 IC50值)，製成表十一，IC50值越小表示清除 DPPH 自由 基能力越強。

圖二十五、臺灣天仙果四種不同部分之水萃取物之DPPH 自由基清除 作用。濃度為2000、1000、500、250、125 及 62.5μg/mL，W 表示水 萃取物。(Each value represented mean ± S.E., n=3)(p < 0.05)

表十一、臺灣產臺灣天仙果植物4 種部位之水萃取物對 DPPH 自由基 清除作用之IC50(μg/mL)值比較^a

Ficus formosana plant

a Each values represented mean ± S.D. of three parallel measurements.

0 62.5 125 250 500 1000 2000 concentration(ug/mL)

Scavenging activity of DPPH radicals(%)

0

而由上表可知，在樣品的水萃取物方面，正對照組 GSH 的 IC50

值為 93.75μg/mL，沒有任何樣品的水萃取物之 IC50值小於 GSH，但 以 臺 灣 天 仙 果 的 果 實 的 IC50 值 最 小(104.16 μg/mL) 以 十 分 接 近 GSH。。另外，水萃取物中臺灣天仙果的根的 IC50值最大。

(四)還原力測定：

此實驗主要以測定普魯士藍(prussian blue，K4[Fe(CN)6]3)的產生 量為指標，是利用赤血鹽(potassium ferricanide，PFC，K3Fe(CN)6)提 供Fe³⁺，當樣品與Fe³⁺反應，即將其還原成 Fe²⁺黃血鹽(K4Fe(CN)6)，

黃血鹽再與 FeCl3所提供的 Fe³⁺反應形成亞鐵氰化鐵，即普魯士藍，

此物質可在 700 nm 波長下測其吸光值，吸光值越高代表還原力越 強。相關反應式如下：

K3Fe(CN)6 + sample → K4Fe(CN)6 + sample-oxide K4Fe(CN)6 + Fe³⁺ → K4[Fe(CN)6]3

實驗結果顯示於圖二十六，橫軸代表樣品之濃度，縱軸則為樣品 於700 nm 下的吸光值，圖中可清楚看到不同部位之水萃取物皆顯示 隨樣品的濃度增加，其還原力也逐漸上升。而以濃度1000 μg/mL 來 觀察，水萃取物之還原力由高而低依序為臺灣天仙果(果實)(1.93±0.01)

＞臺灣天仙果葉(0.75 ± 0.01)＞臺灣天仙果根(0.23 ± 0.01)＞臺灣天仙 果莖(0.23 ± 0.01)，而 GSH 的吸光值為 1.58 ± 0.02，其還原力皆小於 GSH。

圖二十六、臺灣天仙果植物 4 種部位之水萃取物之還原力試驗。濃度 為1000、500、250、125、62.5 及 31.25 μg/mL。(Each value represented mean ± S.D.，n=3)(p < 0.05)

臺灣天仙果植物4 種不同部位之水萃取物，其所含總多酚類、總 類黃酮及總黃酮醇之含量分析，結果如表九所示。

表十二、臺灣產臺灣天仙果 4 種部位植物之總多酚類、總類黃酮及總 黃酮醇之含量比較^a

Ficus formosana plant

a Values represented mean ± S.D. of three parallel measurements.

bTotal phenolic and flavonol contents are expressed as mg catechin/ gm sample.

cTotal flavonoid concentration was expressed as mg rutin/gm sample.

(一)總多酚類(polyphenols)含量測定：

總多酚類含量以mg (+)-catechin equivalent/g dry weight 表示，在 4 種部位植物材料中。水萃取物中以臺灣天仙果果實(FF)所含總多酚 類最多，臺灣天仙果莖(FS)最少。

(二)總類黃酮(flavonoids)含量測定：

總類黃酮含量以mg rutin equivalent/g dry weight 表示，在 4 種部 位植物材料中，水萃取物中以臺灣天仙果果實(FF)所含總類黃酮最 多，臺灣天仙果根(FR)最少。

(三)總黃酮醇(flavonols)含量測定：

總黃酮醇含量以mg (+)-catechin equivalent/g dry weight 表示，在 4 種部位植物材料中，水萃取物中仍以臺灣天仙果果實(FFW)所含總 黃酮醇最多。

三、抑制α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)

我們以此部份實驗作為治療糖尿病藥用植物之水萃取物體外降 血糖活性評估，而α-glucosidase (EC 3.2.1.20；α-D-glucoside

glucohydrolase)的來源是取自Baker´s yeast(麵包酵素)，受質為

4-nitrophenyl α-D-glucopyranoside，其原理為受質本身雖無顏色，但 在α-glucosidase 對其進行水解後，所得產物具有黃色的顯色，於400 nm 下測其吸光值，吸光值越高表示水解產物越多，即酵素活性越 大，藥物對該酵素的抑制能力越差。而其數據計算出樣品對

α-glucosidase的抑制率達50％的樣品濃度，製成表十三，IC50值愈小 表示抑制α-glucosidase愈強。

表十三、臺灣天仙果治療糖尿病藥用植物之水萃取物 α-glucosidase 抑制作用之IC50(μg/mL)值比較^a

Ficus formosana plant IC

₅₀

(μg/mL)

stem

>2000

fruit

2.84±0.03

root

>2000

leave

>2000

catechin 451.73 ± 0.87

a Values represented mean ± S.E. of three parallel measurements.

由上表可知，在樣品的水萃取物方面，除了臺灣天仙果果實IC₅₀ 為 2.84μg/mL之外在其他部位的IC₅₀ 值皆大於所使用的最大濃度

2000 μg/mL，有很明顯的差異性。

四、醛糖還原酶抑制劑(aldose reductase)

糖尿病慢性併發症與糖代謝多元醇通路啟動有關。醛糖還原酶是 此聚醇代謝通路中的限速酶。醛糖還原酶抑制劑能有效抑制此通路，

減少體內山梨醇的蓄積，減慢或改善糖尿病併發症，實驗設計主要針 對反應需要耗掉NADPH，所以利用偵測NADPH的消耗量來推估

aldose reductase inhibitor IC50，製成表十四，IC50值愈小表示抑制 α-glucosidase愈強。

表十四、臺灣天仙果治療糖尿病藥用植物之水萃取物 aldose reductase 抑制作用之IC50(μg/mL)值比較^a

Ficus formosana plant IC

₅₀

(μg/mL)

stem

132.41±2.13

fruit

89.13 ±1.40

root

198.23±4.52

leave

227.41± 3.12

Genistein 51.62± 3.18

a Values represented mean ± S.E. of three parallel measurements.

在文檔中 臺灣天仙果之抗氧化活性及其對STZ誘導糖尿病大白鼠之影響;Antioxidative activities and the effect on glucose metabolism in STZ-induced diabetic rats of Ficus formosana (頁 106-117)