誘發第二型糖尿病動物模式，用以測試於體外試驗中對於調節糖 尿病具潛在功效物質，是本實驗重點。
在Phillips 等人於2004 年曾提出氧化壓力對於糖尿病發生及其 併發症的產生，佔有重要的地位188。這意味著糖尿病與氧化壓力間的 關係，也表示抗氧化劑可能可應用於糖尿病及其併發症的預防及治 療，許多不同研究都顯示糖尿病與體內自由基形成增加或抗氧化力降 低有關，這可能涉及到細胞的蛋白質、脂質及核酸等遭受了自由基的 氧化損傷189。人體的血糖主要是受到 β 細胞所釋出的胰島素控制，
但當人體長期暴露於活性氧(ROS)環境時，β 細胞的功能會受損，而 影響胰島素的正常分泌，容易導致血糖有不穩定的現象，所以，本論 文藉由體外天然物的抗氧化行為，做粗步篩選，在進一步做其降血糖 作用。
抗氧化劑為一種能有效阻止或延緩自動氧化的物質。依Halliwell 定義為：在相對可氧化物質(醣類、蛋白質、脂質或核酸等)最低的濃 度下，能有效地延緩或阻止其發生氧化反應的物質，稱為抗氧化劑
190 。抗氧化劑有化學合成的， 如羥基茴香醚(butylated
Hydroxyanisole，BHA)、羥基苯(butylated hydroxytoluene，BHT)等，
但它們可能具有潛在的毒性及致癌作用，而為人所排斥191。因此，尋 找天然、高效、低毒性的天然抗氧化劑，是當前醫藥研究者所努力的 目標之一。
而天然物的抗氧化力評估方法很多，大致可分為抗脂質過氧化能 力、清除自由基能力、還原力及螯合力等四類，其中常被用於代表總 抗氧化能力者，以清除 ABTS 自由基的 TEAC法最被接受。
在降血糖活性部分，研究者多以糖尿病動物實驗模式進行，而其 應用主要有四種方法：(1)胰腺切除法；(2)化學物質誘發法(利用 alloxan、streptozotocin、vacor 等)；(3)自發性模型；(4)轉殖基因模型。
其中以streptozotocin(STZ)誘發為最常用模型，STZ 為nitrosurea經由
Streptomycetes archromogenes 合成的，半衰期十幾分鐘，可藉由直接
毒害胰臟β細胞(與STZ 引發氧化壓力有關)，造成胰島素分泌不足而 致糖尿病，誘發後病程穩定，且對其他器官損害很輕。文獻指出使用 50~60 mg/kg 的STZ 注入鼠體內，會使得其體內胰島素降至正常 10~30%，形成高血糖( 20~30 mmol/L)、多喝、多吃、多尿及體重減 輕等糖尿病症狀192。STZ 誘發模型也是行政院衛生署於民國89年7月 31 日所公告衛署食字第0890003826 號文中，認可的健康食品調節血 糖功能評估之實驗動物模式193。
動物實驗模式雖然有其必要，但其耗時、費用高、變異性大，且
基於尊重動物生命之考量，若能在進入動物實驗之前，先通過
簡易的體外試驗篩選樣品，將能更準確掌握樣品在動物實驗的成功機 率，而α-glucosidase 抑制和aldose reductase 抑制活性之篩選，便是一 種能代表降低飯後血糖的簡便、快速體外評估方法。糖尿病是一種機 體糖代謝紊亂的疾病，隨著科學家對糖尿病認識的加深，及對糖尿病 和其相關酵素的進一步研究，酵素在糖尿病發病機制中的作用將日益 受重視，以酵素為作用點的新開發藥物，也將不斷的進入臨床，而成 為糖尿病的防治藥物之一。而與糖尿病相關的酵素主要有：(1)α-葡萄 糖苷酶(α-glucosidase)：其抑制劑能抑制小腸上段α-葡萄糖苷酶的活 性，阻斷碳水化合物分解成葡萄糖，從而達到降低飯後血糖過高的目 的。(2)醛糖還原酶(aldose reductase，AR)：多元醇代謝途徑在高血糖 條件下的啟動是糖尿病併發症發生與發展的重要因子，該途徑的關鍵 限速酶為AR。AR 在高血糖時被啟動，會催化葡萄糖大量轉化成不 能通過細胞膜的山梨醇(sorbitol)，致使山梨醇在一些組織中大量蓄 積，而引起高滲透傷害，導致白內障、視網膜病變、神經病變、腎功 能不全及腎小球基底膜增厚等糖尿病慢性併發症。目前上市的醛糖還 原酶抑制劑(ARI)有tolrestat、epalrestat 等。(3)一氧化氮合成酶(nitric oxide synthetase，NOS)：NOS 為一氧化氮合成的關鍵催化酶，目前 已發現的NOS 亞型有4 種(189)，即內皮型(endothelial NOS，eNOS)、
神經型(neuronal NOS，nNOS)、誘導型(inducible NOS，iNOS)及粒線 體型(mitochondrial NOS，mtNOS)。近年來已有研究發現，iNOS 的 過度表現，會過度生成NO，對糖尿病患者胰島 β 細胞造成損害。因 此，抑制iNOS 的活性，有利於糖尿病的治療。目前，已有pimagedine 在美國已進入第3 期臨床研究，它能選擇性地抑制iNOS。(4)血管縮 收素轉化酶(angiotensin converting enzyme，ACE)：ACE 主要作用是 將血管縮收素Ⅰ轉換成血管縮收素Ⅱ，使血管收縮。ACE 抑制劑在 臨床上一直被作爲降血壓藥物，但近年研究結果顯示ACE 抑制劑有 明顯改善機體的胰島素敏感性，減輕胰島素抗性，降低血糖及改善糖 耐量的作用。(5)蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)：高血糖環境下，
糖尿病患者的視網膜、主動脈、心臟、腎小球、肝臟和骨骼肌中DAG 含量會增高，使PKC 被啟動。PKC 的啟動會造成糖尿病患者血液動 力學異常、血管通透性改變、血管基底膜增厚、心肌功能紊亂、神經 病變、引發多種糖尿病慢性併發症。PKC 家族中至少包括11 種異型 體，研究顯示在糖尿病患者的視網膜、腎臟及心血管組織中，PKCβ 異型體啟動佔優勢，因此，近年來研究較多的是PKCβ 異型體選擇性 的抑制劑，如LY333531 可競爭性地抑制PKC β1 和PKC β2 異型 體，其作用呈劑量反應關係194。
除了上述5種酵素外，還有許多酵素是與糖尿病的發生及併發症
有關的，但是，在這些酵素中，α-glucosidase與飲食直接相關的酵素，
而aldose reductase 是控制糖尿病病情惡化主要酵素，糖尿病血糖控制 的三大目標，即飲食控制、運動控制及藥物控制等，α-glucosidase 抑 制劑直接阻斷了飲食中碳水化合物的吸收，控制了飯後血糖的突升，
同時，這類藥物也能改善糖化血色素(HbA1c)值，目前， α-glucosidase 抑制劑已是臨床常見五大類口服降血糖藥物之一，像 acarbose、
miglitol 等，它們對於糖尿病前期、第1型或第2型的糖尿病病人皆適 用。但卻有研究指出這些合成的α-glucosidase抑制劑可能會增加腎臟 腫瘤、嚴重肝損傷及急性肝炎的發生率144-159。所以，找尋強效、安全 的天然α-glucosidase 抑制劑也是當前醫藥學者努力的目標之一。
而aldose reductase 為糖尿病病變的關鍵決定酵素，目前有很多研 究指出aldose reductase 抑制劑有效阻止和延緩糖尿病併發症如：糖尿 病腎病、血管病變、視網膜病變、外周神經病變方面顯示了良好的應 用前景。加上用中草藥作為天然產物，較無明顯不良反應且來源廣 泛，以中草藥為來源的醛糖還原酶抑制劑其不良反應遠低於化學合成 及微生物來源的醛糖還原酶抑制劑，在一些研究中有利用中草藥活性 成分黃酮類化合物及其衍生物，如：槲皮素、水飛薊素、葛根素、黃 芩苷、黃連素等和一些中藥複方製劑，如：參丹健胰丸、筋脈通、六 味地黃丸等來抑制醛糖還原酶的活性、降低山梨醇含量，剛好與本實
驗利用黃酮類來抑制aldose reductase的理念不謀而合。
而本論文即利用α-glucosidase、aldose reductase 的體外抑制實驗 來代表降血糖活性評估方法，對於所選臺灣天仙果各部位之水萃物進 行降血糖活性及其所含多酚結構成分關係之評估，我們發現在水萃取 物方面，體外實驗下，臺灣天仙果果實有明顯效果，所以利用臺灣天 仙果果實更進一步的動物實驗。
口服耐受性試驗(Oral glucose tolerance test)先餵管給予臺灣天仙 果水萃物再利用腹腔注射高劑量葡萄糖，而後分別於第0, 30 , 60 , 120, 180時間點重複在老鼠身上採血，實驗組相對糖尿病組可看出有明顯 下降(p＜0.01)。
囓齒類如老鼠與人類第二型糖尿病的致病機轉非常類似，而人類 糖尿病為多因子而成，所以利用SD品系以腹腔注射投與 STZ和 nicotiamide，藉由nicotiamide保護β細胞和 STZ特異性破壞β細胞DNA 機制，來製造成高血糖的狀態模擬現代人飲食習慣改變等後天危險因 子。
在體重方面糖尿病組相對控制組有明顯下降的趨勢，可推測原因 可能是體內有胰島素阻抗作用，血糖無法利用導致有消瘦的情形。
糖化血色素(HbA1c)指標為血液經常時間處於高血糖狀況下葡萄 糖與血紅素結合之表現。常做為糖尿病患微血管及大動脈血管治療效
果非常重要指標，本研究中，給藥組與對照組中，其糖化血色素呈下 降趨勢。
在禁食大白鼠血漿葡萄糖濃度方面，經過腹腔注射streptozotocin 誘導糖尿病後，糖尿病大白鼠之禁食血清葡萄糖濃度顯著大於正常大 白鼠之禁食血漿葡萄糖濃度(P＜0.001)。四週實驗期後，給予臺灣天 仙果果實組禁食血漿葡萄糖濃度顯著低於 STZ 組(P＜0.001)，改善 血糖效果為高劑量臺灣天仙果(1g/kg)＞中劑量臺灣天仙果(0.5g/kg)
＞低劑量臺灣天仙果(0.1g/kg)。
在禁食大白鼠血漿三酸甘油酯(TG)、膽固醇(cholesterol)、低低密 度脂蛋白(LDL)濃度方面，經過注射 STZ 誘導糖尿病後，糖尿病大 白鼠之禁食血漿 TG, cholesterol ,LDL 濃度顯著大於正常大白鼠之禁 食血漿三酸甘油酯濃度(p＜0.05)。四週實驗後，給予臺灣天仙果果實 在TG濃度方面，高劑量臺灣天仙果組在降低 TG 濃度方面與 STZ 組有明顯統計上差異(p＜0.01)；而 cholesterol、HDL濃度，臺灣天仙 果組與STZ組統計上差異值(p＜0.01)；在 LDL 方面臺灣天仙果組與 STZ組並無統計上差異，推估因為老鼠本身 LDL 值比較低，加上抽 血是空腹，所以在 LDL 值方面偏差會比較大。綜合上述，和與 HbA1c 數值有符合表徵。
胰臟中，負責內分泌的胰島是以球體的形狀分布於胰臟內，而在
做處之切片時，可能會因切的位置不同，使胰臟顯露的部分範圍不一 致。所以本實驗隨機(n=20)來換算胰島內分泌細胞占所有胰島細胞的 百分比，推估胰島內分泌細胞受損程度。
由本論文整體的研究成果顯示臺灣天仙果果實之總抗氧化能力 是與其降血糖活性呈正相關性的，而它們的正相關性基礎可能與其所 含總多酚類成分多寡相關。近來，Kwon3 等人對於不同品種的蔬菜 茄子進行研究，也發現茄子間所含總多酚類成分多寡，是與它們的抗
由本論文整體的研究成果顯示臺灣天仙果果實之總抗氧化能力 是與其降血糖活性呈正相關性的，而它們的正相關性基礎可能與其所 含總多酚類成分多寡相關。近來，Kwon3 等人對於不同品種的蔬菜 茄子進行研究，也發現茄子間所含總多酚類成分多寡，是與它們的抗