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其中一位病患在使用phenylephrine 及 epinephrine 後血液動力資料迅速恢復,但 對另一位病患則無作用,因此緊急使用體外循環機繼續完成冠狀動脈繞道手術。

表六、進行冠狀動脈繞道手術患者之臨床資料統計(n=403)

Sex (M:F) 279:124

Age (y) 65.5±10.9

Body weight (kg) 64.8±11.3 Body height (cm) 160.5±8.3 Preoperative IABP use 49(12.2%)

Types of operation

Elective off-pump CABG 292(72.5%)

Emergency off-pump CABG 42(10.4%)

CABG+valve 53(13.2%)

CABG with partial CPB 6(1.5%)

圖六、經食道超音波觀察之二氧化碳氣泡(少量)

圖七、經食道超音波觀察之二氧化碳氣泡(中量)

圖八、經食道超音波觀察之二氧化碳氣泡(大量)

表八、進行冠狀動脈繞道手術患者之二氧化碳栓塞的發生率及 嚴重性

Status of CO

2

embolism

Incidence of CO2 embolism 69(17.1%)

Severity of CO2 embolism

Nil 334(82.9%)

Minimal 53(13.1%)

Moderate 14(3.5%)

Massive 2(0.5%)

比較下腔靜脈沒有栓塞、少量栓塞、中量至多量栓塞的病人,其術中呼吸末 二氧化碳濃度並無差異,分別為 31.4±2.4 mmHg、31.6±2.4 mmHg 及 32.4±2.2 mmHg,但下腔靜脈中二氧化碳氣泡的出現與大隱靜脈分枝的切除有關者,分別 佔少量栓塞者及中量或大量栓塞者的57%及 93%,但經由回歸統計分析的結果,

所有的危險因子(包括摘取靜脈時間、大隱靜脈曲張、糖尿病、腦溢血等)均與 使用內視鏡摘取大隱靜脈時中量及大量二氧化碳栓塞的發生無關。

(二) 二氧化碳栓塞與充氣壓力之關連

表九為病人的臨床資料統計,兩組間的任何參數均無顯著差異,其中兩組各 有1 及 2 名病患因技術困難更改摘取大隱靜脈的方式而排除於本研究。

共有49 名病患(佔全部的 9.9%)在下腔靜脈發現二氧化碳氣泡,而高壓組 二氧化碳氣泡的出現率(13.3%)明顯高於低壓組(6.5%,p<0.05),二組病患 均沒有發生大量二氧化碳栓塞及血行動力明顯變化的情形(表十),且肺動脈壓、

呼吸末二氧化碳、氧飽和度、血壓、及其他血行動力參數在二組間並未有明顯差 異。但在試驗期間,曾有二名高壓組的病患在下腔靜脈出現一堆二氧化碳氣泡而 緊急停止充氣,其僅出現血壓輕微下降及混合靜脈氧飽和度的情形,並沒有其他 血行動力明顯變化,經過詳細檢查後發現,兩人在大隱靜脈的分枝上都有小開 口,算是一個試驗中的小插曲。

表九、進行冠狀動脈繞道手術患者之臨床資料

Patients characteristics N=247 N=248

Sex (M:F) 179:66 168:80

Age (year) 66.1±10.5 65.4±11.2 Body weight (kg) 65±11.6 64.5±11.6 Body height (cm) 160.7±8.2 160.4±8.3 Preoperative IABP use 29 (11.7%) 33 (13.4%) Operation time (min) 238.5±22.1 222.3±35.3 Length of vein graft (cm) 34.2±2.1 32.3±1.9 Harvest time (min) 27.6±6.9 27.9±7.3 Number of bypass grafts 3.5±0.7 3.4±0.6

IABP = intraaortic balloon counterpulsation

The values are shown as mean ± standard deviation

表十、進行冠狀動脈繞道手術患者之二氧化碳栓塞發生率

High Group Low Group Without CO2 embolism 215 (86.7%) 231 (93.5%)*

CO2 bubble found 33 (13.3%) 16 (6.5%)*

Massive CO2 embolism 0 0

*P<0.05

第二節 內視鏡大隱靜脈摘取手術對內皮細胞的影響

(一) 以CD31 進行血管內皮形態的研究

總共有20 對大隱靜脈的標本進行了這一項評估,結果顯示 CD31 在傳統大 隱靜脈摘取手術的這一個族群有顯著的減少(如圖九、圖十),根據我們所提出 的評分標準,傳統開放性傷口的這一組,CD31 呈現陽性染色的部分,得分為 1.45

±1.13。而內視鏡摘取的這一組,CD31 呈現陽性染色的部分,得分為 4.33±0.72。

兩者達到統計學上的意義(表十一)。

圖九、以傳統方式摘取之大隱靜脈,以免疫組織化學染 色法分析,大部分區域沒有表現咖啡色,表示CD31分 佈極少

圖十、以內視鏡摘取之大隱靜脈,以免疫組織化學染色 法分析CD31(箭頭所指棕色區域為CD31分佈區域)

CD31

表十一、經由免疫組織化學染色之大隱靜脈內皮細胞CD31表現量 傳統大隱靜脈摘取 內視鏡大隱靜脈摘取

P value

2 CD31陽性 1.45±1.131 4.33±0.72 <0.05 1Data are shown as mean ±SEM.

2p value was evaluated by distal end and of proximal end.

(二) 以血管內皮中endothelial nitric oxide synthase(eNOS)、endothelin-1

(ET-1)、和 cyclooxygenase-2(COX-2)進行血管內皮功能的研究 I. 蛋白質分析

總共有22 對大隱靜脈的標本進行蛋白質定量。傳統手術組所獲得的組織為 32.54±1.19 mg,而內視鏡組所獲得的組織為 31.48±3.67 mg。傳統手術組的平均 蛋白質濃度是 3515.82±623.63 μg/mL 而內視鏡組的平均蛋白質濃度是 3545.75±

847.42 μg/mL(表十二)。傳統手術組與內視鏡組在三種不同蛋白質相對於蛋白 質總量之表現量如表十三。一開始我們選用西方墨點分析法,歷經多次嘗試錯誤 與修正的過程,發現以此種方式無法呈現出我們的目標蛋白,因此改用可直接定 量、較為靈敏的定量酵素免疫分析。研究結果顯示,我們所選擇的三種分子蛋白 質的含量在不同手術方式所摘取的大隱靜脈並沒有明顯的差別。這個結果給了我 們一個很重要的反省,雖然血管內皮可能因為不同手術的方式所造成的機械力量 產生破壞,這一點可以從我們的一部份的研究中看出差別,但一個處置誘導基因 的表現和產生蛋白質,是需要時間的。不管是內視鏡摘取大隱靜脈,或是經由開 放性的傷口摘取大隱靜脈,我們一般的手術時間都不會超過三十分鐘。也就是 說,期望在很短的時間之內,因為我們不同的手術方式,希望看到在蛋白質層面 上的差別,有實質上的困難。因此我們改弦更張,希望看到更上游的表現,也就 是說希望看到RNA 的差別,於是乎我們進行的第三部分的研究。

表十二、使用不同方式摘取之組織重量與總蛋白質濃度(n=22)

傳統大隱靜脈摘取 內視鏡大隱靜脈摘取 摘取組織重量(mg) 32.54±1.2 31.48±3.7

蛋白質濃度(μg/mL) 3515.82±623.6 3545.75±847.4

表十三、eNOS、ET-1、COX-2 於不同摘取方式之蛋白質表現量

傳統大隱靜脈摘取 內視鏡大隱靜脈摘取

P value

3

eNOS (pg/mg protein)1 302.87±128.82 286.94±111.0 0.59 ET-1 (pg/mg protein) 1.84±0.1 4.48±0.3 0.17 COX-2 (ng/mg protein) 0.59±0.0 0.30±0.0 0.56 1Relative levels were divided by total protein concentration

2Data are shown as mean ±SEM.

3 p value was evaluated by distal end and of proximal end.

圖十一、不同摘取方式之內皮細胞eNOS mRNA 表現量

(OVH:傳統摘取大隱靜脈;EVH:內視鏡摘取大隱靜脈)

II. RNA 分析

總共有26 對大隱靜脈的標本進行 eNOS、ET-1、COX-2 RNA 的定量,結果 顯示 eNOS 和 COX-2 的 RNA 在兩種不同手術所得到的大隱靜脈的標本的表現 量並沒有差異 (圖十一和圖十二),然而 ET-1 RNA 在傳統手術方式的表現量卻 高於內視鏡手術的表現量(16.4±6.7;8.8±4.1),並且達到統計學上顯著的意義

(p=0.00035;圖十三)。

0 5 10 15 20 25

OVH EVH

eNOS mRNA relative expression (arbitrary units, n=17)

圖十三、不同摘取方式之內皮細胞ET-1 mRNA 表現量

(OVH:傳統摘取大隱靜脈;EVH:內視鏡摘取大隱靜脈)

圖十二、不同摘取方式之內皮細胞COX-2 mRNA 表現量

(OVH:傳統摘取大隱靜脈;EVH:內視鏡摘取大隱靜脈)

0 5 10 15 20 25 30 35 40

OVH EVH

COX-2 mRNA relative expression (arbitrary units, n=17)

0 5 10 15 20 25

OVH EVH

ET-1 mRNA relative expression (arbitary units, n=16)

P<0.01