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第一節 化學成分部分及藥理活性

此研究針對泰葛 Pueraria Mirifica 的成分單離,共獲得了四個化合 物,為一個泰葛特有成分,目前在植物界中發現最強的植物雌激素:葛雌 素(Miroestrol);三個異黃酮類化合物,葛根素(Puerarin)、大豆 A元(Daidzein) 及金雀異黃酮素(Genistein)。

藉著 HL-60 細胞株,利用 MTT assay 抗增殖活性和 NBT assay 分化 活性篩選步驟,測出泰葛所含有之成分活性大小為:

Genistein (IC50=0.02μM ) > Genistin (IC50=0.023μM ) >

Daidzin (IC50=0.06μM) > Daidzein (IC50=0.08μM) >

Miroestrol(IC50=0.11μM) > Puerarin

配合分離出大豆 A元、金雀異黃酮素,都有頗強的抗增殖效果及些許

的分化效果,這和某些文獻指出的這兩者有抗增殖及分化效果相符合

(22-23)(27)

,證明了我們要藥理數據的準確性;同樣地,葛雌素對 HL-60 細 胞株也呈現有不低的抗增殖活性,IC50 = 0.11

µ

M,這也是 1940 年以來(53), 葛雌素首次針對白血病的細胞株做研究。加上本實驗室原本之前分離的染 料木素(Genistin)及標準品的大豆素(Daidzin)對 HL-60 細胞株的測試結 果,發現其實和不接糖基的大豆 元(Daidzein)和金雀異黃酮素A

(Genistein),抗增殖活性和分化的活性相似。

基本上,植物雌激素一般指雜環多酚類化合物 ,是一种具有弱雌激素 作用的植物成分,它與 1 7β-雌二醇結構相似 ,可以与雌二醇競爭性結合 雌激素受体,表現出雌激素拮抗作用 ,對激素相關性疾病具有保護作用。就 考察所得資料,泰葛的成分一樣也是以異黃酮居多,而且對於成分的瞭解 並不十分完全,仍有很大的研究空間,故本實驗以白血病藥物研發為前 提,目前完成了初步的研究工作,還需要進行持續地研究。

第二節 各種不同產地葛屬植物及泰葛愈創組織的定量:

泰葛、川葛及台葛三地不同產地七種不同來源的葛屬植物的乾燥根,

含指標成分葛根素、大豆素、染料木 A、大豆 元及金雀異黃酮素等五種A 成分的量經由同一分析系統中被定量出來。

◎ 葛根素(Puerarin)含量:

泰葛原植物(PM)含量最高,台灣葛根(PP)、(PT)次之。

◎大豆素(Daidzin)、染料木 A(Genistin)及大豆 元(Daidzein)含量:以A 台灣葛根(PP)最高,台灣野葛(PT)次之。

◎ 金雀異黃酮(Genistein) 含量:

泰葛市場品切片(PM1)最高,台灣葛根(PP)及(PT)次之。

基於以上這些資料,可知泰葛原植物(PM)由於葛根素的作用,降壓效 果可能會比其他的強,擴張冠狀動脈及有關葛根素藥理的作用也較強;至

於台灣葛根(PP)及台灣野葛(PT)的葛根素、大豆素、染料木 及大豆A 元A 等含量都非常高,所以,可能鎮痛消炎的效果應該不錯。這些指標成分的 量,可以提供中藥製藥產業、天然物研究學者,乃至中醫師臨床用藥(現 在已有不少中醫師葛根用藥取用台灣品種),一個藥材原料選用的新思考。

泰葛植物一年生的根和多年生的樣品,比較五種標準指標成分,成分 皆低於多年生樣品原植物,所以,多年生的泰葛乾燥根的二次代謝物可能 才比較多。一年生的根、莖和葉的指標成分含量比,在葛根素、大豆素、

染料木 、大豆A 元及金雀異黃酮皆為根>莖>葉,證明根的活性成份量A 的確較高。

在愈傷組織生產二次代謝產物方面,在生產在大豆 元 (Ⅲ)含量A 上,以種子之愈傷組織含量最高。在染料木黃酮 (Ⅳ) 含量上,以根之愈 傷組織含量最高。即染料木黃酮和大豆 元的含量上,愈傷組織含量是大A 於同為一年生的原植物。所以,在植物細胞培養二次代謝產物的角度上,

許多成功培養二次代謝產物的成功例子(1-3),意謂著泰葛的活性成分物 質,理論上也可以藉著植物細胞工廠,來生產大量的有用物質,其經濟效 益及效果也許會比想像中大。

葛根是一種多年生的木本植物,內含成分複雜(6),而葛雌素是泰葛特 有之成分,一直以來,無人發表任何有關定量的方法去定量它,也由於它 的含量稀少,在定量它時,有極大的困難存在。本研究從單相溶媒系統到 三相溶媒系統,改變 UV,改變流速,換管柱,終於將其從泰葛植物中定 量出來,並經由光二極陣列偵測器,確定其他的葛根屬植物並無此化合 物。在泰葛三種樣品中,都有發現葛雌素的存在。在一年生的莖、根也存 在微量的葛雌素,令人驚喜的是在根愈傷組織中也有發現葛雌素,奠定了 日後可以大量培養愈傷組織已生產葛雌素的基礎;葛雌素由於少量,一直 以來,藥理的相關文獻一直停留在 1960 年代時期,它的強效雌激素樣作 用,也許嘗試用來代替動物性來源的荷爾蒙,成為荷爾蒙替代療法之用 藥,治療女性的更年期;亦或者在天然保健食品意識抬頭同時,可以嘗試

用泰葛內植物雌激素(異黃酮及葛雌素)的特性,取代目前當紅的大豆異黃 酮,成為高齡婦女的一種保健食品,故葛雌素可作為雌激素天然藥物開發 的前驅物。

總黃酮以台灣野葛(PT)的含量最多,泰葛原植物(PM)及市場品(PM1) 的含量次之。泰葛一年生原植物與癒傷組織(callus)而言,我們實驗所 培養出來的癒傷組織其所含總黃酮的含量平均都比一年生原植物來的 高,高低差可達 6 倍以上,而與四年生原植物比較,愈傷組織之含量一 般都比較低,故我們希望未來繼續往癒傷組織之二次代謝產物這方面探 討,以期在產業應用上,此可以成為一個開發的重點。