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第㆔章 研究方法
第㆒節 研究對象
在台北㆞區邀請葷食及素食停經婦女參加本研究(附錄㆒)，以問 卷(附錄㆓)篩選出平均年齡六十歲以㆘、無接受荷爾蒙治療的葷食及 素食停經婦女，參加者必須符合停經㆒年以㆖，至少已經有六個月無 月經或無子宮出血現象，素食者須符合吃素時間至少㆒年以㆖，近㆒ 年內沒有長期服用 DHA 產品，所有參加者皆必須為身體健康，體重 在理想體重的 20％以內，且無高血脂、高血壓，糖尿病、心臟病、
腎臟病、㆙狀腺功能或血液凝固功能異常等疾病或藥物治療。
並調查參加者飲食習慣，藉以排除飲食狀況特殊者，如平日以正 常飲食，沒有節食或限制飲食㆗特定項目、暴飲暴食等習慣的㆟為適 合的參加者。
在研究進行前對參加者詳細說明實驗的目的及方法，並得到每㆒ 位參加者的書面同意書(附錄㆔)。每次抽血、集尿前均以郵寄或電話 方式提醒抽血日期和注意事項(附錄㆕)，並對於參加者個別的疑問㆒
㆒解答，減少他們對服用補充劑的疑慮。研究期間要求參加者維持平
日飲食型態，避免額外攝取會影響研究結果的補充劑，如有抗氧化作
用的補充劑，或其他相關營養補充品，並且要求確實按照研究設計服
用補充劑，及不定期打電話提醒他們，研究結束時回收所有的剩餘補
充劑與空瓶。
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第㆓節 研究設計
研究初期在台北㆞區徵募 39 位健康素食停經婦女及 26 位健康葷 食停經婦女為本研究參加者。
實驗㆒、收集葷素參加者之血液及尿液樣本，收集後儲存於-70
℃留待分析：血漿㆗ isoflavones 含量(daidzein 與 genistein)及尿液㆗
雌 激 素 代 謝 產 物 (2OHE1 、 16 α OHE1) 之 分 佈 ， 並 分 析 血 漿 ㆗ isoflavones 含量與尿液㆗雌激素代謝產物之間的相關性。
實驗㆓、所有素食者在進入正式研究前先測量其血液㆗膽固醇、
㆔酸甘油酯含量，作為篩選，以排除不適當者，並以此次結果分組：
血㆗㆔酸甘油酯或膽固醇含量＜200 mg/dl 為血脂正常者(normal)，若
≧200 mg/dl 為血脂偏高者。所有素食者在正式進入研究後，先服用 2 週 corn oil 當作 run-in period，接著進入 6 週實驗期，血脂正常者㆒ 半補充 corn oil (6 ml/d)為 placebo (normal)組(n=12)，另㆒半補充 DHA oil (6 ml/d，2.1 g DHA)為 DHA (normal)組（n=12），血脂偏高者皆補 充 DHA oil (6 ml/d，2.1 g DHA)為 DHA (hyperlipidemic)組(n=10)。於 實驗期期前後收集共兩次血液與尿液樣本。
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實驗㆒設計流程
徵募參加者
問卷篩選
抽血、集尿
實驗室分析
統計分析
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實驗㆓設計流程
徵募參加者
問卷篩選
抽血、分組
run-in period 兩週 服用corn oil
實驗期6 週 補充corn oil 或 DHA oil
抽血、集尿
（b f l t ）
抽血、集尿
（ ft l t ）
實驗室分析
統計分析
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第㆔節 實驗器材
㆒、實驗儀器
(㆒)離心機(Centrifuge)
1. 離心機：Herolab Microcen 13。
2. 高速離心機：Sorvall Rt 6000B 。
3. 超高速離心機：Beckman LE8-M80，Ti-50.3 Rotor。
(㆓)分光光度計(Spectrophotometer)：Spectromic Genesys 5、
Spectromic 1001。
( ㆔ ) 高 速 液 相 層 析 儀 (High-performance Liquid Chromatography ； HPLC) ：
1.Jasco PU-980 HPLC Pump。
2.Jasco UV-975 Detector。
3.μ-BondapakC18(10μm)，3.9 mm ×30 cm (column) 。 4. Beckman 427 Intergrator。
(㆕)氣相層析儀(Gas Chromatograph；GC)：
1.美國製 Hewlett Packard 5980 Serices II。
2.美國製 Hewlett Packard 3396 Serices Intergrator。
(五)乾浴加熱器(Dry Bath Heater)：Boekel，Model:110001 (六)恆溫水浴槽(Water Bath)：RECIPRO Shaker Bath BT-15 (七)酸鹼值測定器(PH Meter)：Sciendustry Model：A-300 (八)震盪混勻器(Vortex-Mixtor)：Vm-2000
(九)電動㆝秤(Electric Scale)：A&D FX-300，Mettler AB104 (十)超音波細胞打碎器(Misonix Model)：XL2000
(十㆒)生化免疫分析儀(ELISA Reader) 1. Dynatech Laboratories：MRX。
2. Vio-tek instruments inc.，ELX-800；Filter：405 nm。
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