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第四章 實驗結果

第三節 探討水分潛勢對 ganoderic acid Me 產量影響

由靈芝三萜產量分析結果顯示,菌株BCRC 36111 ,36674 培養四星 期後固態培養基對ganoderic acid Me 產量是遠高於液態培養技術。

因此要探討水份對ganoderic acid Me 產量是否有影響。將菌株 BCRC 36674 首先在固態培養基 PDA 培養 7 天後菌絲再轉植到含有 Sorbitol 或NaCl 之液態培養基 PDB 靜置培養 5 天,以高效能液相層析儀(HPLC) 來進行分析測靈芝ganoderic acid Me 產量,觀察 NaCl 及 Sorbitol 對 ganoderic acid Me 產量的影響,結果如 Fig. 4-10 , 4-11 所示。

由HPLC 分析發現與 control PDB 之 ganoderic acid Me 產量為 5.61 mg/100mg 菌絲, 1M 及 2M NaCl 處理之 ganoderic acid Me 產量分別為 7.3 mg/100mg 菌絲及 9.08 mg/100mg 菌絲,其 ganoderic acid Me 產量有 上升趨勢。0.5M、4M NaCl 之處理會降低 ganoderic acid Me 產量,產量 分別為4.32mg/100mg 菌絲及 4.0 mg/100mg 菌絲(Fig. 4-10)。

Sorbitol 1M、2M、4M 處理,ganoderic acid Me 產量分別為(4.14 mg/100mg 菌絲,3.90 mg/100mg 菌絲,2.76 mg/100mg 菌絲),相較於 control PDB ( 5.73 mg/100mg 菌絲)有下降趨勢(Fig. 4-11)。由實驗結果發 現添加Sorbitol 會降低 ganoderic acid Me 產量。

Control 0.5MNACL 1MNACL 2M NACL 4M NACL

mg/100mg mycelia

0 2 4 6 8 10 12

Fig.4-10 BCRC 36674 於含不同濃度 NaCl 培養基進行培養之三萜產量.

BCRC 36674 首先在固態培養基 PDA 培養 7 天後菌絲再轉植到含有 NaCl 之液態培養基 PDB 靜置培養 5 天,結果發現 1M 及 2M NaCl 之 ganoderic acid Me 產量上升趨勢。

Control PDB 1M SORB 2M SORB 4M SORB

mg/100mg mycelia

0 1 2 3 4 5 6 7

Fig.4-11 BCRC 36674 於含不同濃度 Sorbitol 培養基進行培養之三萜產量.

BCRC 36674 首先在固態培養基 PDA 培養 7 天後菌絲再轉植到含有 Sorbitol 之液態培養基 PDB 靜置培養 5 天,結果發現添加 Sorbitol 會降低 ganoderic acid Me 產量。

第四節總靈芝酸產量的分析

一、固態及液態培養基對靈芝酸產量之影響

菌株BCRC 36111 以固態培養基(PDA) 及液態培養基(PDB) 靜置或 振盪培養,於PDA 培養二星期後可達最高靈芝酸產量(36.61mg/g 菌絲);

PDB 靜置培養二星期後達最高產量 35.84mg/g 菌絲; PDB 振盪培養一 星期後靈芝酸產量達最大量31.04mg/g 菌絲,培養三至四星期後靈芝酸 產量稍有下跌之趨勢如Fig.4-12 所示。此外由研究結果發現固態培養基 PDA 的靈芝酸產量與液態培養基 PDB 產量差異不大(Fig.4-12)。

菌株BCRC 36674 以固態培養基(PDA)及液態培養基(PDB) 靜置或振 盪培養培養二星期後,於PDA 上可獲得最高靈芝酸產量 29.74mg/g 菌 絲,PDB 振盪培養二星期後可達 24.32 mg/g 菌絲,PDB 靜置培養一星 期後即達最高靈芝酸產量27.91mg/g 菌絲(如 Fig.4-13 所示)。培養三星 期後其靈芝酸產量較培養一至二星期為低(Fig.4-13),實驗結果亦發現靈 芝酸產量以固態或液態靜置培養方式產量對靈芝酸產量差異不大

(Fig.4-13)。

二、不同菌株對靈芝酸產量比較

比較BCRC 36111 及 BCRC 36674 總靈芝酸產量之差異,BCRC 36111 於PDA 或 PDB 上培養一至四星期後,BCRC 36111 均可獲得較高總靈 芝酸產量(Fig.4-12,Fig.4-13)。而且兩菌株培養三星期後總靈芝酸均有 下降趨勢(Fig.4-12,Fig.4-13)。結果顯示 BCRC 36111 這菌株適合大規 模栽培量產靈芝酸。

week

1 2 3 4

Ganderic acid (mg/g)

0 10 20 30 40 50

PDA PDB(S) PDB(N,S)

Fig. 4-12 BCRC 36111 於不同培養基總靈芝酸.

BCRC 36111 以固態培養基 PDA 及液態培養基靜置(PDB,NS)或振盪培 養(PDB,S,120 rpm),培養一到四星期總靈芝酸產量。研究結果發現第二 星期時固態培養基PDA 的總靈芝酸產量與液態培養基 PDB 產量差異不 大。

1 2 3 4

week

Ganderic acid (mg/g)

0 5 10 15 20 25 30

35 PDA

PDB(S) PDB(N,S)

Fig. 4-13 BCRC 36674 於不同培養基總靈芝酸.

BCRC 36674 以固態培養基 PDA 及液態培養基靜置(PDB,NS)或振盪培 養(PDB,S,120 rpm),培養一到四星期總靈芝酸產量。研究結果發現第二 星期時固態培養基PDA 的總靈芝酸產量最高。

第五節靈芝胞內多醣產量的分析

一、固態及液態培養基對靈芝胞內多醣產量之影響

菌株BCRC 36111 以固態培養基(PDA)及液態培養基(PDB)靜置或振 盪培養,培養一星期後固態培養基PDA 產量可達 106.88 mg/g 菌絲隨培 養時間增加有下降趨勢。於PDB 振盪培養,亦於培養一星期後達到最 高產量126.44 mg/g 菌絲。於 PDB 靜置培養則在四星期後胞內多醣產量 達最高(120.37 mg/g 菌絲)如 Fig. 4-14 所示。

菌株BCRC 36674 以固態培養基(PDA)及液態培養基(PDB)靜置或振 盪培養,培養二星期後固態培養基PDA 可達最高產量 272.53mg/g 菌絲。

PDB 振盪培養一星期後可達最高產量 261.07 mg/g 菌絲。PDB 靜置培養 四星期後胞內多醣產量196.99mg/g 菌絲達最高如 Fig. 4-15 所示。由研 究結果發現固態培養基PDA 比液態培養基 PDB 的胞內多醣產量高且胞 內多醣形成時間在培養一到二星期內產量最高。

二、不同菌株對胞內多醣產量比較

由實驗結果亦發現菌株BCRC 36111 以液態 PDB 培養一星期後獲得最 高胞內多醣產量126.44 mg/g 菌絲。菌株 36674 以固態 PDA 培養二星期 後胞內多醣產量可達272.53mg/g 菌絲。胞內多醣產量以菌株 BCRC 36674 產量較高,顯示 BCRC36674 這菌株適合大規模栽培量產胞內多 醣。

1 2 3 4 week

Polysaccharide(mg/g)

0 20 40 60 80 100 120 140

160 PDA

PDB(S) PDB(N,S)

Fig. 4-14 BCRC 36111 於不同培養基胞內多醣量.

BCRC 36111 以固態培養基 PDA 及液態培養基靜置(PDB,NS)或振盪培 養(PDB,S,120 rpm),培養一到四星期胞內多醣產量。培養一星期後固態 培養基PDA 及 PDB 振盪產量最高。

1 2 3 4

week

Polysaccharide(mg/g)

0 50 100 150 200 250

300 PDA

PDB(S) PDB(N,S)

Fig. 4-15 BCRC 36674 於不同培養基胞內多醣量.

BCRC 36674 以固態培養基 PDA 及液態培養基靜置(PDB,NS)或振盪培 養(PDB,S,120 rpm),培養一到四星期胞內多醣產量。培養二星期後固態 培養基PDA 產量最高。