靈芝三萜成分(ganoderic acid Me)產量分析

一、 三萜成分ganoderic acid Me 之 HPLC 圖譜及結構式

本實驗靈芝的成份指標準品是由Chyr and Shiao 等所提供，分離出 HPLC 圖譜及結構式如 Fig.4-4，4-5 所示。本實驗三萜主要看 35 min peak ,OD (243 nm) 吸光值下的面積如 Fig.4-4 所示。此 peak 結構式已 被分離出(Chyr and Shiao 1991)，化學名 ganoderic acid Me(Nishitoba, Sato et al. 1988)及結構式如 Fig.4-6 所示。

Fig. 4-4 靈芝標準品ganoderic acid Me在35分鐘的HPLC圖譜

Peak 28 min structure ：R1 =α-OAc, R2= OH , R3= H2 , R4= H2 Peak 31 min structure ：R1 =β-OAc, R2 = OH , R3= H2 , R4= H2 Peak 35 min structure ：R1 =α-OAc, R2 = OAc, R3= H2 , R4= H2 Peak 39 min structure ：R1 =β-OAc, R2 = OAc, R3= H2, R4= H2

Fig. 4-5 靈芝標準品 HPLC 圖譜 4 個波峰結構式 (Chyr and Shiao1991)

二、固態培養基及液態培養基對ganoderic acid Me 產量之影響 菌株BCRC 36111 以固態 PDA 培養基培養一星期後，ganoderic acid Me 產量為 0.33mg/100mg 菌絲且 ganoderic acid Me 產量會隨培養天 數增加，當培養四星期後PDA 產量 ganoderic acid Me 1.55 mg/100mg 菌絲可達到最高產量。PDB 靜置培養一星期後 ganoderic acid Me 產 0.23mg/100mg 菌絲，需培養三星期後 ganoderic acid Me 產量

0.26mg/100mg 菌絲才達到最高產量。PDB 振盪培養一星期後

ganoderic acid Me 產量 0.29mg/100mg 菌絲，當培養四星期後 ganoderic acid Me 產量 0.48mg/100mg 菌絲達到最高產量如 Fig.4-7 所示。由研 究結果發現，固態PDA 培養所產生的 ganoderic acid Me 量較液態 PDB 培養基高，四星期後產量高達8 倍(Fig.4-7)。

BCRC 36111 以固態及液態培養基 SGCM 振盪或靜置培養進行培 養，以HPLC 分析產生 ganoderic acid Me 含量，因三萜量過低以致 於HPLC 圖譜無法指出明確 peak。

菌株BCRC 36674 以固態培養基(PDA) 及液態培養基(PDB) 振盪 或靜置培養。以固態PDA 培養基培養一星期後 PDA 產量 ganoderic acid Me 為 2.48mg/100mg 菌絲且 ganoderic acid Me 產量會隨培養天 數增加，當培養四星期ganoderic acid Me 達最高量 11.28 mg/100mg 菌絲。液態PDB 靜置培養四星期後 ganoderic acid Me 達最高產量 3.50

mg/100mg 菌絲。液態 PDB 振盪培養二星期後 ganoderic acid Me 達最 高產量5.38mg/100mg 菌絲達(如 Fig.4-8 所示)。由研究結果發現 BCRC 36674 培養四星期後固態 PDA 之 ganoderic acid Me 產量為液態 PDB 之3 倍。

三、不同培養配方對ganoderic acid Me 產量之影響

菌株 BCRC 36111 以固態 PDA 或液態培養基 PDB 進行培養，其 ganoderic acid Me 之產量(Fig.4-7)均比 SGCM 培養基高。

四、 不同菌株對ganoderic acid Me 產量比較

比較BCRC 36111 及 BCRC 36674 菌株產生 ganoderic acid Me 之產 量，BCRC 36674 在固態 PDA ，液態 PDB 振盪及液態 PDB 靜置培 養所產生ganoderic acid Me 分別為(11.28 mg/100mg 菌絲，3.20 mg/100mg 菌絲及 3.50 mg/100mg 菌絲) 。而菌株 BCRC 36111 以固態 培養基PDA，液態 PDB 振盪及液態 PDB 靜置培養所產生 ganoderic acid Me 分別為(1.55/100mg 菌絲，0.48 mg/100mg 菌絲，0.20 mg/100mg 菌絲) (Fig.4-9)。由研究結果發現靈芝其 ganoderic acid Me 產量方面以 BCRC36674 這菌株固態培養技術產量較 BCRC 36111 固態培養技術 高7. 3 倍，由培養一至三星期的結果亦發現 BCRC 36674 之 ganoderic acid Me 產量較 BCRC 36111 高，顯示 BCRC 36674 這菌株適合大規

week

BCRC 36111 以固態培養基 PDA 及液態培養基靜置(PDB,NS)或振盪 培養(PDB,S,120 rpm)，培養一到四星期 ganoderic acid Me 產量。結果 發現PDA 培養四星期 ganoderic acid Me 產量最高。

1 2 3 4

week

mg/100mg mycelia

0 2 4 6 8 10 12 14

PDA PDB(S) PDB(N,S)

Fig.4-8 BCRC 36674 於不同培養基三萜量.

BCRC 36674 以固態培養基 PDA 及液態培養基靜置(PDB,NS)或振盪 培養(PDB,S,120 rpm)，培養一到四星期 ganoderic acid Me 產量。結果 發現PDA 培養四星期 ganoderic acid Me 產量最高。

1 week 2 week 3 week 4 week

Fig.4-9 BCRC 36111、36674 於不同培養基三萜量.

BCRC 36111 及 36674 以固態培養基 PDA 及液態培養基靜置(PDB,NS) 或振盪培養(PDB,S,120 rpm)，培養一到四星期 ganoderic acid Me 產 量。結果發現BCRC 36674 PDA 培養四星期 ganoderic acid Me 產量最 高。