第四章 研究方法
第四節 研究工具
研究評估方法有問卷資料、每日飲食及運動紀錄、人體測量(體
重、身高、腰圍、身體質量指數、體脂肪百分比)、血壓、基礎
代謝率及抽血檢查(包括空腹血糖、空腹胰島素、三酸甘油酯、總膽 固醇、高密度脂蛋白膽固醇)等。詳述如下:
(一)問卷資料
本研究問卷採結構式的封閉性問題為主,內容包括個人基本資
料及個人減重行為。
(1)個人基本資料:性別、年齡及教育程度(包括國小以下、國中、
高中(職)、專科(含二、三、五專)、大學、研究所以上)等。
(2)減重行為:將由問卷分析研究對象過去減重經驗、減重過程中 困難的部份及減重的原因,以評估其減重行為。
(二)每日飲食紀錄
實驗前即由同一位營養師教導受試者進行每日飲食紀錄填寫方 法,解說時配合中國醫藥大學所編制之「食物份量代換指引手冊」
及食物模型(包括:散裝式食物模型、整塊食物模型、量杯、量匙 等輔助教材)教導受試者紀錄一天飲食的方法,內容有食物名稱、
材料、烹調方式、份量及用餐地點等,並提醒受試者勿改變飲食習 慣。每次課程結束後發予每人「每日飲食紀錄表」七張(一週之份 量),並要求於下次上課時繳回,收集之飲食資料,除了用以分析遵 醫囑行為外,並以御廚皇專業營養分析軟體分析熱量及相關營養素 攝取狀況。
(三)每日運動紀錄
課程開始第一天即由同一位專業人員對研究對象進行每日運動
紀錄填寫方法之解說,每日運動紀錄內容包括:運動項目、運動所 花費的時間。每次課程結束後發予每人「每日飲食紀錄表」,頁尾皆 有每日運動紀錄欄位,需每日詳實填寫,並要求於下次上課時繳回。
收集之每日運動記錄,一天中單次運動時間需達三十分鐘,歸為「有 運動」。
(四)人體體位測量
(1)體重:採用站立型身高體重測量器,受試者測量時不著鞋,
並移除厚重衣物及飾物,輕鬆自然,雙腳平行站立於磅秤 台之中央,數據以公斤為單位,記錄至 0.1 公斤。
(2)身高:以標準身高計測量,受試者測量時不著鞋,眼睛平
視,頭後腦、背部、臀部、腳跟需緊靠身高計之測量桿輕 鬆 站 直 , 拉 下 測 量 板 輕 觸 頭 頂 , 並 與 身 高 計 測 量 桿 呈 直 角,測量值以公分為單位,紀錄至 0.1 公分。
(3)腰圍:以直立的方式,雙手自然下垂,雙腳打開與肩同寬,使
用無彈性之卷尺測量腸骨脊前上緣與及肋骨最下緣之中點之腰 圍長度,卷尺須水平經過腰點測量腰圍。上述測量項目以公分 為單位,記錄至0.1 公分。
(4)身體質量指數(Body Mass Index, BMI):體重(公斤)除
以身高(公尺)的平方,即「公斤/公尺 2」。
(5)體脂肪百分比:
利用生物電阻阻抗法(Bioelectrical impedance analysis, BIA)分 析身體內脂肪組織及瘦體組織含量。原理是當無害的微弱電流
(約 800Ma、50kHz)通過身體時,水份較少的非導電組織,
如:脂肪組織,會產生電阻,而非脂肪組織因含水份較多,其 中之電解質導電性佳,藉由這種導電與不導電之間交互對抗稱 為阻抗(Impedance)。因此可依每位受試者體組成不同(脂肪 組織及瘦體組織),電流傳導產生不同電阻和阻抗性,計算出身 體體脂肪比例。實驗以 TANITA 生物電阻阻抗分析儀測量,測 量時移除受試者身上會導電之物品,並脫去鞋、襪,雙手握緊 電極握把並且站立於電極板上測得體脂肪百分比。
(五)基礎代謝率(Basic Metabolic Rate, BMR)
利 用 TANITA 體組成分析儀測量,利用生物電阻阻抗 法
(Bioelectrical impedance analysis, BIA)分析身體內脂肪組織及瘦體 組織含量,將所測得的體內脂肪組織量代入分析儀預設之公式計算 而得,測量結果以大卡(kcal)為單位。
(六)血壓
受測者於休息狀態下以水銀血壓計測量之。
(七)抽血檢驗
本研究收集且納入分析的基本血液檢查資料包括空腹血糖、胰 島素、三酸甘油酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇及低密度脂蛋 白 膽 固 醇 , 其 中 低 密 度 脂 蛋 白 膽 固 醇 以 Friedewald 公 式 計 算
(Friedewald et al., 1972)。接受血液檢體檢查者需空腹八小時以上 並於簽署人體試驗同意書後,於活動會場由專業護理人員以針筒抽 取受試者 10ml 血液;真空採血管經離心(3,000rpm,4℃,10 分鐘), 由上清液取得血清。血清分離的過程在抽血後 1 小時內完成,檢體 皆置於-80℃保存。
血液分析材料:
1.空腹血糖市售 kit 套組,購自 Randox, United Kingdom。
2.胰島素市售 kit 套組,購自 Mercodia AB, Sweden。
3.三酸甘油酯市售 kit 套組,購自 Diasys, Germany。
4.總膽固醇市售 kit 套組,購自 Diasys, Germany。
5.高密度脂蛋白膽固醇沉澱試劑,購自 Human, Germany。
血液分析方法與原理:
1.空腹血糖
利用葡萄糖氧化酵素(glucose oxidase;GOD)將葡萄糖氧化 後,產生葡萄糖酸(gluconic acid)及過氧化氫(hydrogen peroxide); 過氧化氫再與4-aminophenazone 及酚(phenol)經 peroxidase(POD)
作用,形成紫紅色的 quinoneimine 指標物,於波長 500nm 測其吸 光值。空腹血糖濃度以「樣品吸光度」及「標準品吸光度」換算 出血糖值。
Glucose+O2+H2O gluconic acid+H2O2
2H2O2+4-aminophenazone+phenol quinoneimine+4H2O
2.空腹胰島素
使用酵素連結免疫吸附法(enzyme linked immunoabsorbent assay, ELISA)測定血清胰島素濃度,利用抗原與抗體結合的專一 性,加上酵素呈色反應,測得胰島素濃度。
3.三酸甘油酯
利用脂解酶(lipase)將三酸甘油酯水解成甘油及脂肪酸。經 GOD
POD
peroxidase(POD)催化,反應產生 quinoneimine 指標物,於波長 500nm 測其吸光值。三酸甘油酯以「樣品吸光度」及「標準品吸 光度」換算之。
Triglycerides Glycerol+fatty acid
Glycerol Glycerol-3-phosphate+ADP
Glycerol-3-phosphate+O2
Dihydroxyaceton phosphate+H2O2
2H2O2+4-aminoantipyrine+4-chlorophenol quinoneimine+HCL+4H2O
4.總膽固醇
利用膽固醇酯解酶(cholesterol esterase;CHE)將膽固醇水解 成游離膽固醇。再利用膽固醇氧化酶(cholesterol oxidase;CHO)
產生過氧化氫,最後以 4-aminoantipyrine、酚(phenol)及過氧化 氫利用peroxidase(POD)催化,反應產生 quinoneimine 指標物,
於波長500nm 測其吸光值。血清總膽固醇以「樣品吸光度」及「標 準品吸光度」換算之。
Cholesterol ester+H O Cholesterol+fatty acid lipase
glycerol kinase
Glycerol-3-phosphate oxidase
POD
CHE
Cholesterol+O2 Cholesterol-3-one+H2O2
2H2O2+4-aminoantipyrine+phenol quinoneimine+4H2O
5.高密度脂蛋白
高密度脂蛋白分析分為兩個步驟進行,步驟一:取定量血清 加入沈澱劑充分作用後,使乳糜微粒、極低密度脂蛋白及低密度 脂蛋白沈澱;步驟二:緊接著將其離心,取定量上清液並加入市 售試劑,最後以 593nm 波長測定吸光值,經換算後得高密度脂蛋 白膽固醇(HDL-C)濃度。
步驟一:
Chylomicron、VLDL、LDL cholestenone+H2O2
2H2O2 2H2O+O2
步驟二:
HDL-C cholestenone+H2O2
H2O2+chromogen quinone pigment CHO
specific conditions POD
CHE+CHO
POD Catalase
CHE+CHO specific surfactants
6.低密度脂蛋白膽固醇
以Friedewald formula(Friedewald et al., 1972)換算得低密度 脂蛋白膽固醇(LDL-C)濃度。
(三酸甘油酯濃度超過400 mg/dL 時不適用此公式)
低密度脂蛋白膽固醇=
總膽固醇-高密度脂蛋白膽固醇-三酸甘油酯/5