4.6.1 CaENG1 各突變株之生長曲線 (growth curve)
將 CaENG1 各突變株與對照組野生株 SC5314、JKC19 (cph1/cph1)、
HLC52 (efg1/efg1) 及 HLC54 (cph1/cph1 efg1/efg1) 比較其生長曲線之差 異。圖十二為比較各菌株於YPD 培養液中轉養 0～24 小時之生長曲線 圖，圖十二<A>為各菌株之生長曲線，其中突變株 HLC54 (cph1/cph1
efg1/efg1) 及 HLC52 (efg1/efg1) 之生長較野生株 SC5314 緩慢，而結果顯
示
CaENG1 各突變株與野生株 SC5314 之生長成同趨勢，但 EKG7 和
EKP2 於培養 16 小時後細胞數和野生株 SC5314 及 cph1 突變株 JKC19 相 比有較少的現象 (OD600為0.55、0.532、0.603、0.627 )，不過於培養 18 小時後，Caeng1 突變株 EKG7 細胞數趨向野生株 SC5314，而 Caeng1 突 變株EKP2 至培養 24 小時後細胞數仍少於野生株 SC5314 (OD600為 0.628、0.68 )，但是彼此間的差異性不大。圖十二<B>為取各菌株 OD600 吸光值之對數而成的生長曲線，各菌株於生長八小時後開始趨緩，而長 時間培養後也可達到相似之對數值。以培養4 小時至 6 小時之吸光值計 算對照組與CaENG1 各突變株的細胞倍增時間 (doubling time)：野生株
SC5314 的倍增時間為 1.98 小時，突變株 HLC54 的倍增時間為 2.32 小時，而
CaENG1 heterozygous knock-out 突變株 EHK1 的倍增時間為 2.37 小
時，Caeng1 homozygous knock-out 突變株 EKG7 和 EKP2 的倍增時間各 為1.98 小時和 2.24 小時，CaENG1 rescued 突變株 EGR 之倍增時間為 2.18 小時，各菌株之倍增時間差異皆小於0.4 小時。4.6.2 芽管試驗之結果 (germ tube assay)
以野生株 SC5314、JKC19 (cph1/cph1)、HLC52 (efg1/efg1) 和 HLC54 (cph1/cph1 efg1/efg1) 作為正負對照組，比較 CaENG1 各突變株於 YPD 培養液加10％山羊血清、37 ℃培養五小時下芽管生成之情形。以倒立式 顯微鏡放大四百倍觀察，如圖十三，野生株SC5314 於誘發培養條件下，
有芽管生成之情形，cph1 突變株 JKC19 與 SC5314 一樣有芽管生成，而
efg1 突變株 HLC52 和雙突變株 HLC54 (cph1/cph1 efg1/efg1) 則無芽管生
成；結果顯示CaENG1 各突變株 EHK1 (CaENG1/Caeng1::FRT)、EKG7
(Caeng1::FRT/Caeng1::FRT)、EKP2 (Caeng1::FRT/Caeng1::FRT) 和 EGR (Caeng1::FRT/CaENG1::FRT) 有生成芽管之能力，由此可知剔除 CaENG1 並不影響白色念珠菌芽管生成之能力。4.6.3 菌落型態變化之結果 圖十四，野生株SC5314、JKC19 (cph1/cph1)、HLC52 (efg1/efg1) 和 HLC54 (cph1/cph1 efg1/efg1) 作為正負對照組，以血清和 37 ℃培養誘發菌絲的生 長，在營養缺乏之Bacto agar 培養下，SC5314 和 JKC19 有菌絲生長的情 形，菌絲呈不規則放射狀；而HLC52 和雙突變株 HLC54 則無菌絲生長，
呈酵母菌型態。而
CaENG1 各突變株 EHK1 (CaENG1/Caeng1::FRT)、
EKG7 (Caeng1::FRT/Caeng1::FRT)、EKP2 (Caeng1::FRT/Caeng1::FRT) 和 EGR (Caeng1::FRT/CaENG1::FRT) 也觀察到菌絲生長的情形，型態變化 和對照組野生株SC5314 和 JKC19 相似。
4.6.3.2 含 4％山羊血清之 YPD 培養基上之生長
將單一菌落培養至含 4％山羊血清之 YPD 培養基、37 ℃培養三天後觀 察菌落型態的變化。如圖十五所示，野生株SC5314、JKC19 (cph1/cph1)、
HLC52 (efg1/efg1) 和 HLC54 (cph1/cph1 efg1/efg1) 作為正負對照組，以 血清和37 ℃培養誘發菌絲的生長，在營養充足之 YPD 培養下，野生株 SC5314 單一菌落表面呈現不規則皺摺，菌落外圍亦不平整，而 cph1 突 變株JKC19 也有菌落表面皺摺之情形；而 efg1 突變株 HLC52 和雙突變 株HLC54 之菌落表面則無皺摺，呈現光滑的酵母菌型態。而 CaENG1 各 突變株EHK1 (CaENG1/Caeng1::FRT)、EKG7 (Caeng1::FRT/
Caeng1::FRT)、EKP2 (Caeng1::FRT/Caeng1::FRT) 和 EGR (Caeng1::FRT/
CaENG1::FRT) 單一菌落之型態和野生株 SC5314 相似，皆為菌落表面有
明顯不規則皺摺之情形。
4.6.4 侵犯力試驗之結果 (invasion assay)
將單一菌落培養至 solid Spider 培養基、37 ℃培養七天，誘發菌絲之生 長，進而增加菌落於培養基的附著力，再以固定水流沖洗培養基，觀察 菌落殘留之情形。如圖十六，野生株SC5314、JKC19 (cph1/cph1)、HLC52 (efg1/efg1) 和 HLC54 (cph1/cph1 efg1/efg1) 為對照組，以無菌絲生長能力 之雙突變株HLC54 (cph1/cph1 efg1/efg1) 被固定水流完全沖洗掉之時間 作為基準，野生株SC5314 於固定水流、固定時間下並無沖洗掉之情形；