【19】中華民國 【12】專利公報 （B）
【11】證書號數：I482781
【45】公告日： 中華民國 104 (2015) 年 05 月 01 日
【51】Int. Cl.： C07K14/78 (2006.01) A61K38/39 (2006.01)
發明 全 4 頁
【54】名 稱：多孔狀膠原蛋白基質製備方法
METHOD FOR PREPARING POROUS COLLAGEN MATRICES
【21】申請案號：098125216 【22】申請日： 中華民國 98 (2009) 年 07 月 27 日
【11】公開編號：201103947 【43】公開日期： 中華民國 100 (2011) 年 02 月 01 日
【72】發 明 人： 黃玲惠 (TW) HUANG, LYNN
【71】申 請 人： 國立成功大學 NATIONAL CHENG KUNG UNIVERSITY
臺南市東區大學路 1 號
【74】代 理 人： 桂齊恆；林景郁
【56】參考文獻：
TW I284665
US 2006/0235205A1
JP 2007/211183A
Chang-you Gao et al, "Fabrication of porous collagen/chitosan scaffolds with controlling microstructure for dermal
equivalent.", Polymers for Advanced Technologies, Vol.14(6),p.
373–379, June 2003.
審查人員：莊智惠
[57]申請專利範圍
1. 一種自結締組織製備多孔狀膠原蛋白基質的方法，該方法依序包含：提供一結締組織，
其表面積為 20 平方公釐至 2 平方公尺；一膨脹步驟：以一酸液使該結締組織之體積至少 膨脹百分之五十而形成一膨脹結締組織，其中該酸液之酸鹼值(pH 值)介於 1 至 6 且該酸 液實質上不包含鹽類；以及一清洗步驟：清洗該膨脹結締組織以除去非膠原蛋白物質藉 此形成一多孔狀膠原蛋白基質。
2. 如請求項 1 所述之方法，其中該結締組織的尺寸為 25 平方公釐至 900 平方公分。
3. 如請求項 1 所述之方法，其中該酸液為弱酸。
4. 如請求項 3 所述之方法，其中該弱酸液包含由甲酸、羧酸、草酸、醋酸、檸檬酸、乳 酸、蘋果酸、硼酸、磷酸及其混合物所組成之群組中選擇的一種酸。
5. 如請求項 3 所述之方法，其中該酸液之酸鹼值(pH 值)介於 2 至 4。
6. 如請求項 5 所述之方法，其中該酸液包含濃度 0.1~6M 的醋酸。
7. 如請求項 1 所述之方法，其中在該膨脹步驟中，該結締組織膨脹後體積為 100%~1000%。
8. 如請求項 1 所述之方法，其中該膨脹步驟包含將該結締組織浸泡於該酸液，且同時將一 液體噴射至該結締組織。
9. 如請求項 1 所述之方法，其中該清洗步驟包含將該膨脹結締組織浸泡於一清洗液，該清 洗液包含一清潔劑、一蛋白酶或其混合物。
10. 如請求項 9 所述之方法，其中該清洗步驟包含將該膨脹結締組織浸泡於該清洗液中，且 同時將一液體噴射至該膨脹結締組織中。
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11. 如請求項 1 所述之方法，其中該膨脹步驟包含將該結締組織浸泡於該酸液中，且同時以 超音波處理該結締組織。
12. 如請求項 9 所述之方法，其中該清洗步驟包含將該膨脹結締組織浸泡於該清洗液中，且 同時以超音波處理該結締組織。
13. 如請求項 1 所述之方法，更包含在膨脹步驟之前，以一溶劑處理該結締組織，該溶劑包 含一有機溶劑以及可選擇性的包含水，其中該有機溶劑係選自由醇、酮、丙酮、乙腈、
己烷、氯仿、N,N-二甲基甲醯胺、二甲亞碸及其混合物所組成之群組。
14. 如請求項 13 所述之方法，其中該溶劑包含有機溶劑以及水且有機溶劑與水之間的體積比 為 1：4 至 9：1。
15. 如請求項 1 所述之方法，其中該結締組織包含複數根毛髮或毛根，且該方法更包含，在 該膨脹步驟之前，以微鹼溶液或蛋白水解酶處理該結締組織以鬆弛(loosen)或去除該些毛 髮或毛根。
16. 如請求項 15 所述之方法，其中該蛋白水解酶係選自中性蛋白酶(dispase)、胰蛋白酶 (trypsin)、木瓜蛋白酶(papain)、胃蛋白酶(pepsin)、胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin)、鳳梨蛋 白酶(bromelain)、無花果蛋白酶(ficin)及其混合物所組成之群組。
17. 如請求項 1 所述之方法，其中該結締組織係源自於真皮組織或筋腱。
18. 如請求項 1 所述之方法，更包含在該清洗步驟之後，乾燥該多孔狀膠原蛋白基質。
19. 如請求項 1 所述之方法，其中該清洗步驟包含以一第一清洗液以及一第二清洗液處理該 膨脹結締組織，該第一清洗液包含一清潔劑、一螯合劑或其混合物，而該第二清洗液包 含一蛋白酶。
圖式簡單說明
為讓本發明之上述和其他目的、特徵、優點與實施例能更明顯易懂，所附圖式之說明如 下：
第 1 圖是根據實施例 1 所描述之方法製備的多孔狀膠原蛋白基質的掃描式電子顯微圖(放 大倍率：100)。
第 2 圖是根據實施例 1 所描述之方法製備的多孔狀膠原蛋白基質的掃描式電子顯微圖(放 大倍率：400)。
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