與離子作用的關係

文獻指出人類呼吸道上皮細胞會隨著鋅離子濃度增加以及作用時間 增長，使得減少PTEN蛋白質。而在鋅離子作用下，會活化Akt，而減少 PTEN磷酸化(Wu et al., 2003)。分別以PBS(10 μl/ml)、Zn (10^-7 M、10^-6 M、

10^-5 M)處理紅體細胞 12 小時和三天，結果顯示在Zn作用下，明顯增加 PTEN long和PTEN short表現量，但會隨著Zn的劑量增加，而使得其表現 量減少(圖 34A、B；C、D)。在 12 小時，對於PTEN long免疫反應的強度 (圖 35B、F、J、N、Q)和PTEN short免疫反應的強度 (圖 35D、H、L、P、

R) ，沒有太大差異。在三天，會抑制PTEN long免疫反應的強度(圖 36B、

F、J、N、Q)，但對於PTEN short免疫反應的強度 (圖 36D、H、L、P、

R) ，沒有太大差異。我們推測Zn作用在紅體細胞，在長時間會抑制PTEN

long蛋白質，這與人類呼吸道上皮細胞會隨著鋅離子作用時間增長，使得 減少PTEN蛋白質的結果一致。

文獻指出在出生後的血管新生中，VEGF扮演重要的角色。而利用

CoCl₂處理視網膜上皮細胞會增加缺氧誘導因子-1(HIF-1)表現，而CoCl₂ 經由HIF-1 訊號路徑進而調控VEGF表現(Slomiany et al., 2006)，但目前研 究中未有相關報告指出CoCl₂與PTEN以及EDF-1 的相關性。分別以 PBS(10 μl/ml)、CoCl₂ (10^-7 M、10^-6 M、10^-5 M)處理紅體細胞 12 小時和三 天，結果顯示在CoCl₂作用12 小時，對於PTEN long和PTEN short表現量，

沒有太大差異(圖 37A、C)。但在CoCl₂作用三天，會增加PTEN long和PTEN short表現量，但隨著CoCl2的劑量增加，卻使得其表現量減少(圖 37B、

D)。而對於作用 12 小時以及三天的PTEN long免疫反應的強度(圖 38B、

F、J、N、Q；圖 39B、F、J、N、Q)和作用 12 小時以及三天的PTEN short 免疫反應的強度 (圖 38D、H、L、P、R；圖 39D、H、L、P、R) ，沒有 太大差異。CoCl₂在短時間(12 小時)作用下，不會影響PTEN mRNA表現 量，但是在長時間(3 天)作用下，會刺激PTEN mRNA表現量增加，而且 以CoCl₂劑量為10^-7/ml時效果最好。我們推測，當短時間CoCl₂的作用下，

不會影響PTEN作用，但是長時間CoCl₂的作用下，會刺激PTEN表現。

由目前研究報告的之Cu²⁺會刺激血管新生，而對於PTEN的相關性還 尚未清楚。分別以PBS(10 μl/ml)、Cu²⁺ (10^-7 M、10^-6 M、10^-5 M)處理紅體 細胞12 小時和三天，結果顯示在Cu²⁺作用12 小時，有減少PTEN long和 PTEN short表現量的趨勢(圖 40A、C)。但在Cu²⁺作用三天，會隨著Cu²⁺的 劑量增加而增加PTEN long和PTEN short表現量 (圖 40B、D)。而在Cu²⁺作

用12 小時，會增加PTEN long免疫反應的強度(圖 41B、F、J、N、Q)，

但對於PTEN short免疫反應的強度沒有太大差異(圖 41D、H、L、P、R)。

在Cu²⁺作用三天，會抑制PTEN long螢光表現(圖 42B、F、J、N、Q)，但 有增加PTEN short免疫反應強度的趨勢(圖 42D、H、L、P、R)。我們觀 察到Cu²⁺作用短時間下，會抑制PTEN表現量，但會增加PTEN long免疫 反應的強度。長時間作用下，會增加PTEN表現量以及PTEN short免疫反 應強度，但會抑制PTEN long免疫反應的強度。

鐵結合鐵乳蛋白(lactoferrin；Lf)會調控細胞週期前進。而Lf可能如同 Cdk antagonist抑制者，經由Akt訊號途徑，E2F能促進細胞週期前進於S 期(Lee et al., 2009)。分別以PBS(10 μl/ml)、Fe (10^-8 M、10^-7 M、10^-6 M) 處理紅體細胞三天，結果顯示在Fe作用下，對於PTEN long和PTEN short 表現量沒有太大差異 (圖 43A、B、C)。分別以PBS(10 μl/ml)、Fe (10^-8 M、

10^-7 M、10^-6 M)處理紅體細胞三天，結果顯示在Fe作用下，對於PTEN long 免疫反應的強度(圖 44B、F、J、N、Q)和PTEN short免疫反應的強度(圖 44D、H、L、P、R)沒有太大差異。我們推測鐵離子作用下，對於調控PTEN 無相關性。

分別以PBS(10 μl/ml)、Zn (10^-7 M、10^-6 M、10^-5 M)處理紅體細胞 12 小時和三天，結果顯示在Zn作用下，明顯增加EDF-1 表現量，但會隨著 Zn 的劑量增加，而使得其表現量減少(圖 34E、F)。分別以PBS(10 μl/ml)、

CoCl₂ (10^-7 M、10^-6 M、10^-5 M)處理紅體細胞 12 小時和三天，結果顯示 在CoCl₂作用12 小時，對於EDF-1 表現量，沒有太大差異(圖 37E)。但在 CoCl₂作用三天，會增加EDF-1 表現量，但隨著CoCl₂的劑量增加，卻使

得其表現量減少(圖 37F)。分別以PBS(10 μl/ml)、Cu²⁺ (10^-7 M、10^-6 M、

10^-5 M)處理紅體細胞 12 小時和三天，結果顯示在Cu²⁺作用12 小時，有 減少EDF-1 表現量的趨勢(圖 40E)。但在Cu²⁺作用三天，會隨著Cu²⁺的劑 量增加而增加EDF-1 表現量 (圖 40F)。分別以PBS(10 μl/ml)、Fe (10^-8 M、

10^-7 M、10^-6 M)處理紅體細胞三天，結果顯示在Fe作用下，對於EDF-1 表現量沒有太大差異 (圖 43C)。我們推測在鋅離子作用下(長時間和短時 間)，會經由活化PI3k路徑進而增加細胞分化、生長，進而增加EDF-1 mRA 表現量；而鈷離子長時間作用下，會抑制細胞分化，進而抑制EDF-1 mRA 表現量；而銅離子長時間作用下，會增加血管新生，進而增加細胞分化，

使得增加EDF-1 mRA表現量；鐵離子作用下對於EDF-1 mRA表現量無相 關性。