第三章 結果
3.5 雌鰻以外源激素進行催熟過程中與 PTEN 和 EDF-1 基因的關係
進行本實驗需購得約 60 尾日本鰻,且實驗前馴養在由淡水鹽化成全 海水約一星期,且不餵食,並每週施打外源激素,共施打九針。
第一次實驗分為四組,分別為未施打外源激素(0 針)以及施打鯰魚腦 下垂體萃取液第3、6、9 針後 72 小時採樣,稱為 0 針組、3 針組、6 針 組、9 針組,並以 RT-PCR 分析紅體和卵巢組織之 PTEN 和 EDF-1 表現 量。
第二次實驗分為五組,分別為未施打外源激素(0 針)、施打鯰魚腦下 垂體萃取液第3、6、9 針以及施打鯰魚腦下垂體萃取液和睪固酮之混合 液第9 針後 72 小時採樣,稱為 0 針組、3 針組、6 針組、9 針組和 9 針 +T 組,並以 RT-PCR 分析紅體和卵巢組織之 PTEN 和 EDF-1 表現量。
3.5.1 分析雌鰻以鯰魚腦下垂體進行催熟過程中的紅體組織與
PTEN 和 EDF-1 基因的關係
兩次實驗結果顯示在催熟過程中,會隨著施打鯰魚腦下垂體萃取液 的針數增加,而增加其紅體組織(RMI値)發育(圖 9A、B)。隨之,觀察其 PTEN和EDF-1 表現量與RMI值的關係;兩次實驗結果顯示其RMI值增加 則會使PTEN long(r2=0.1828;r2=0.0908) (圖 9C、D、E、F)、PTEN
short(r2=0.303;r2=0.0759) (圖 9G、H、I、J)和EDF-1(r2=0.0327;r2=0.2359) (圖 9K、L、M、N)表現量都有增加的趨勢。
3.5.2 分析雌鰻以鯰魚腦下垂體進行催熟過程中的卵巢組織與
PTEN 和 EDF-1 基因的關係
兩次實驗結果顯示在催熟過程中,會隨著施打鯰魚腦下垂體萃取液 的針數增加,而增加其卵巢組織(GSI値)發育 (圖 10A、B)。隨之,觀察
其PTEN和EDF-1 表現量;第一次實驗結果顯示在 6 針組會增加其PTEN long(比 0 針組增加 1.364 倍)(圖 10C)和PTEN short(比 0 針組增加 1.135 倍) (圖 10G)表現量,但在 9 針組時則抑制PTEN long(比 0 針組減少 0.827 倍) 和PTEN short(比 0 針組減少 0.589 倍)表現量,但是隨著卵巢組織(GSI値) 發育增加,會抑制PTEN long(r2=0.0311)和PTEN short表現量(r2=0.0693)
(圖 10D、H)。而在第二次實驗結果顯示施打萃取液會抑制其PTEN long 表現量(3 針比 0 針組減少 0.64 倍,6 針比 0 針組減少 0.48 倍,9 針比 0 針組減少0.93 倍)(圖 10E),而在 3 針組、6 針組,會抑制PTEN short表現 量(3 針比 0 針組減少 0.67 倍,6 針比 0 針組減少 0. 8 倍),但在 9 針組時 會增加其PTEN short表現量(比 0 針組增加 1.75 倍) (圖 10I),但是隨著卵 巢組織(GSI値)發育增加,會抑制PTEN long表現量(r2=0.0628)(圖 10F),
而刺激PTEN short表現量(r2=0.1041)(圖 10J)。在兩次實驗結果顯示催 熟過程中會抑制其EDF-1 表現量(3 針比 0 針組減少 0.66 倍,6 針比 0 針 組減少0.45 倍,9 針比 0 針組減少 0.88 倍) (圖 10K),但但是隨著卵巢組 織(GSI値)發育增加,會抑制EDF-1 表現量(r2=0.0665)(圖 10L)。
3.5.3 分析雌鰻以鯰魚腦下垂體萃取液和鯰魚腦下垂體+睪固酮
之混合液進行催熟過程中的紅體組織與 PTEN 和 EDF-1 基因的 關係
結果顯示在催熟過程中,在施打添加睪固酮之混合液與未添加的紅 體(RMI 値分別為 0.5465±0.14U、0.5696±0.0611U)發育並沒有明顯差異(圖 11A)。隨之,觀察其 PTEN 和 EDF-1 表現量;結果顯示在施打添加睪固 酮之混合液比未添加的紅體,其明顯抑制 PTEN long、PTEN short 和
EDF-1 表現量(圖 11C、D、E),且 9 針+T 組比 9 針組的 PTEN long 表現 量減少約0.47 倍(圖 11C),9 針+T 組比 9 針組的 PTEN short 表現量減少 約0.28 倍(圖 11D),9 針+T 組比 9 針組的 EDF-1 表現量減少約 0.45 倍(圖 11E)。
3.5.4 分析雌鰻以鯰魚腦下垂體萃取液和鯰魚腦下垂體+睪固酮
之混合液進行催熟過程中的卵巢組織與 PTEN 和 EDF-1 基因的 關係
結果顯示在催熟過程中,在施打添加睪固酮之混合液比未添加的卵 巢(GSI 値)發育更為明顯,且 9 針+T 組比 9 針組的卵巢發育(GSI 値)約增 加1.67 倍(圖 11B)。隨之,觀察其 PTEN 和 EDF-1 表現量;結果顯示在 施打添加睪固酮之混合液比未添加的卵巢,其明顯抑制 PTEN long、PTEN short 和 EDF-1 表現量(圖 11F、G、H),而 9 針+T 組比 9 針組的 PTEN long 表現量減少約0.26 倍(圖 11F),9 針+T 組比 9 針組的 PTEN short 表現量 減少約0.28 倍(圖 11G),9 針+T 組比 9 針組的 EDF-1 表現量減少約 0.4 倍(圖 11H)。
3.6 雌鰻以外源激素進行催熟過程中的卵巢和紅體組織之切片