人體及環境中金黃色葡萄球菌對抗生素抗藥性之研究

人體及最境中金黃色葡萄球菌

對抗生素抗藥性之研究

房樹生洪梅芳鍊瞋島跳{風蠶江欣髒

矗南縣黏立港明高中

摘要 我們發現 LSM 讓擇，連培養基分離金主義 f急需筍球蓋的效果最好，而讓自菌落特徵即可 100% 正確判斷是 葡萄球灑 c 從人體分離金黨組葡主主球葡以陷喉分離率最高 的9學，其次為口餘黏膜 42.5% ﹒鸚控 35% '皮膚則是 0% 至於水 i覽中的分離率為 0% ð 抗 藥性比例的農藥性依序為學校水溝<正常人體<臨床病人 e f5葡萄球藹的增生 G 瞬鍵訶彙:金黃色葡窮球菌、抗生紫感受性試驗 抖抖 一、I'l IJ 話 ?是報章報誌中經常看到有麗細聽說藥性的 報導，甚至在英閻還曾出現提萬古轍

( Vancomycin

)的f餾韻，問原本思翠覺到控 制的自市結核捍藹，新的病害IJ也過是來越多， 和細菌闊的戰爭做乎仍方興未艾，設有漸顯居 於當勢的躍勢(譯詩甫詩美嘿 1995

' Prescott

1993

'劉鳳炫等 1996

)

細菌的抗藥性是 4轍生理性灑應，和組觀 在環境中接觴聽抗生素的機率有關，國Ilt抗生 素濫用越嚴葷的地蔥，說說藥性的問閥 t拉越明 (劉鳳炫等 1996 '謝素鏡等 1995

)

自龍在醫院中金黃龍葡萄球館(

Staphylo-ωccus

aureus )的說藥性?分普攝及巖聾，我

們便想看發一輯:正常人及環境中的金黃色葡毒草 球菌拭藥姓的比倒是否和醫院中一樣嚴壤，或 者主義比較報數 3 國 lr七首先品須挑撥一-種有效的話題擇性培養 尋8 ，可i、長連且準確站分離金黃龍葡苦苦球藺

( Prescott LM 等 1993

' Merlino J 等 1996 )。

其次我們想知道金黃色葡萄球菌在正常人體 的不同哥拉位(口腔黏臉、 E雷帽、 膚)及環境中(學校水溝)出現的比俱為惘， 並做抗生素感受，能試驗，將其說藥性比僥幸自 成大臀嘿院病理都懿蘭室的臨床病人數據作 比較，讀者結果是否如向我們所想像的: 說病人身上的金黃 f吾爾萄球蘭說藥性比較巖 重。最後，我們想探討抗生素報用和金黃色 葡萄球爾產生說藥性之題的關聯哇。 二、研究設備器材 (一)培養暴:

I.Mannitol Salt Agar

(MS)( 木醇培鍵基) :

每公升水禽

Pancreatic Digest of Casei

n-"…

...5.0g

Peptic Digest of Animal Tissue...5.0g

Beef Extract.... ... ... ... ... ...1.0g

人雖是犧沒命舍'*色體總Jt麓，守抗:t*找耨怯之研究

Sodium Chloride.

,.

...75.0g

D.Mannitol...l0.0g

Phenol Red..."...

,

..."..0.02Sg

Agar...;..."15.0g

2.Blood Agar Plate (BAP)

(血誰培養基)

:

TSAII with

S%

Shecp Blood

3.Lipovitellin.Salt~Mannitol

agar (LSM)

(木

當醇讓黃培養基) :配方興 MS ·另外加

20mg/ml 蛋黃

4.Miller Luria Be如ní Broth(l品) :每公升水會

Casín Enzymic

Hydrolysate' 鬥 .."...10.0g

Yeast

Extract... 看 ...5.0g

Sodium Chloride... ...1 O.Og

Agar..."15.0g

5.Mueller

Hi

nton II Agar

(MH) 每公升水含

Beef Extract...2.0g

Acid Hydrolysate of Casein...'...17.Sg

Starch...

,

...t.Sg

Agar...

,

...17.0g

6.Trypticase 50y Broth

(TSB) 每位升水會

Pancreatic Digest of Casein...."...17 .Og

Papaic Dlge!\t of Soybean Meal...3.0g

Sodium Chloride...

,....,...,

..S.Og

Dipota泌ium

Phosphate...2.5g

De xto峙，...，..，.*，...﹒'，..，."..，'，...，...， .2." (以上增龔器之藥材皆講島 BBL' 除 BAP 直接購實現嫂靖饗華外，其餘皆自行配數後 竊聽蟻菌}

(

..:.)就生素鈍鍍:

Erythromycin(

E15) 、 PenicilUn

( P 10)

‘

Vancomycin( V

A30) 、 Gentamicin( GM lO)、

Oxaci

Ili

n (OXl

)、 Sulbactam

wlth Ampicllin

(SAM20 )

、 Sulfamethox 轟薯。 le

with

Trimcthoprim ( SXT

) ‘

Clindamycin ( CC2

)‘

Tetracycline (

T聽30) 、 Cephalothin

( CF30

)。 (數遍廠輯:

BECTON DICKINSON 'BBL;

鸝內代理商:蠹鸝噹話: 080711 “的 (五)藥品: 車轍鑽結晶紫、草鵬氏碘續、的%及 70 克乙醉、砂費 (Safranin) 、 3% 變氧水、稀 釋 5 飽之集血漿﹒ 0.95 %食鹽水、運賢、 BaS氓、黨蔚水、 Ampicillit豆、 Agar c

(四〉器材: 培摸盟、燒杯、試智、聶纜、講智、磁 片巷戰樺著等曹先彈、體糟糟，接種環、試 管藥、無鋪里fj廳、無簡棉花糖、撤盤滴智、 打火機、試瞥薰‘麥克鱷‘底片、游樣尺。 (注)設備: 青草聽雜費曉瀰聾鎮、無轎撮f字畫‘盤油培養 豬、缺箱、捧箱、續式擴徹儷﹒總數照相蟻。

5 、研究芳禱:

會發色襯著綠當運轉怯繪4忠義之是過 4位 1.以無繭撫花樺攝取 0.95% 無蘭食輔之l哇， 2. 需品情濕棉花轉能向一人的鼻聽中擴散樓 體。 3. 在無醋據作聾肉，將棉花樺租車潑地濃重歡在擺 攤性培寶庫華 (MS

' BAP

,

LSM

'對熙輯 LB) 上，接著雄蟬的。後鑼密濃聾，轉盤 轉的。離嚮塗鐘，總辭典鹽聾三次。 唔，並以賽完黨將取標之部恆、的纜、時間、 對象，紀轉租培艷血鹿獨上。 5. 將增費阻截髓，放入窗禮培養轍，

,1:).

35.C

繪聲。 6. 三支後敢出，從萬讓擇權繪聲蕩中各撓 一 49 一

科學教育丹刊 第 240 湖 中華民國九十年六月 選 50 個顯現出金黃色毒害韶球菌特議的舉 (其中 MS 挽選蘭落顏態為黃隘的單一

,

BAP 攘還真話等臨特蝕的單一頓落， l， SM 接選闊港為黨色立摺落周圖書本還聽 ，而非選擇性培養鑫 LB 則隨 機接選) ，以革黨氏染色法、驢車幫器試法

(catalase test)

(附註…)、礙閩闢旗試法

(coagu1asetest)

(咐註五)加以確認醋種 是否為金黃葡醫球宮。 不同部位之樣品採集、培養與鑑定 I.l其無菌棉花棒;在瑕。 .95 %無盟主主鹽水。 2. 再志講棉花棒分別提 40 個人(港明高中 )的不同音立(口經黏腰、蝠 B霞、鼻腔、皮膚 E 選擇無傷口的上臂酹近]) 採取檢聽?另外從環壞中(學校廁所及農揖 酹水溝)以無聽試管臨機操持。餾水溝水 檢髓。 3. 有實聖賢議操作嘉內，將棉花捧籲密地塗蓋在 主選擇注培養基 LSM 上，接替旋轉的。後緻 奮進畫，拜旋轉 ω 。激奮塗轍，總計共塗 畫三次。 4. 並以麥克筆將取擇之音ß{立、日期、持聽、 '紀錄在培養血臨頭上。 S. 將培養血儲量，放入恆溫培獲籍，以 350 C 6'. 三天後取出，依照其菌落持續加以計數。 將確定為金黃色葡吾吾球菌關落， 1其無聞 LSM 上，並蚓以編號，以作 為抗生素感受住試驗之用。

7. '由於環境中金黃色篤聲球蘭的數最較少，

為順利踩得金黃色餾葛球藹，另外以無黨 試管聞機操水潛水檢糖，以教量吸管吸取 。.5ml Y};: 1轉水撿轍，加入會1O%NaC1 悔了SB 培養按中做增殖'在 35 培養箱 天後，以棉花棒沾敢當輩在 LS話培養基的 ，再以接種環鑫草工臨及第三噩， 以得到單一菌器的金蠶色毒害動球菌，每(盤 磁體瑕 3 個單一囂落(按抗生素感覺j生試驗。 對拉生奈之說簾性測試 1.將人體不同懿位及水溝中分離至3 ，各體聽誰還 30 _，分 別接鐘聲 T紹培黨液中。(其中成大臨床聽 人樣樣期間搗 89 年 1 月直至 89 年。丹， 採 1732 j隅金質色聽聽錄菌韻蓓，此數據 是成大醫院病理酪細菌支援提供)

2.35

Cc 下培養，使言書液直 至2 或超 i晶

Barium Sulfate Standard [McFarland No. 5

Standard寸的濃度(此標準溶接串 0.048M

BaCI

₂

0.5ml 加 O.36N

H

₂

S0

₄

99.5ml J5fr配懿

成即成，濃度約和1.5

x

10

8 CFU/ml 相當)

3 ‘用無獨生理食鹽水讀整簡報濃度使之與

Barium Sulfate Standard 的濃度一樣。

4. 以無菌棉花捧沾敢懸浮之菌城(題上拉多轄的 水分)在 MH 培養搭上繳獲、地塗讚(接轉船。 ，共三三次J C 5. 靜置于 5 分，使其乾澡，但勿超蟬的分。 6. 將 5 種不問種額的抗生棄紙懿豔貼在 MH (豆豆綻問 ~ê

24mm t)、上'.與邊緣控 15mm 以

上)。 7.15 分鐘後，儕童培饗血於 35Q C 有氧環境下 18 小時。 8. 以游標尺輔量抑制環藍盤大祟。判讓嫖準 如下衷， R 為抗藥性;

1

(中簡單)及

5。一

S

(敏感型)皆紀錄為敏感性。

i午單到一) ，的問型)

S( 敏感型) ;至 15

<13

14-22

>

23

I

PIO

< 28

>

29

~誌

>

15

< 12

13喻 14

~U

IOXl

<10

11-12

三>

1

ISAM20

<11

12-14

>

15

!SXT

<10

11-15

>

16

CC2

< 14

15-20

>

21

[TE30

< 10

l

卜 13

>

14

< 14

15-17

三>

18

:

mm 資料來源:參考文獻 5

)

抗藥性突變株之誇導 1.先以無噩芽接將所有能位分離蟬的金報告

200

J.1

g/ml

Ampicíllin 的

TSB

'測試與生真情形。 2. 挑選在培養基上無法生峙的合實色舊事當球 ，以 5mlTSB 培養被騙夜培養梭，分別 眾 1 ml 的讀被加入最終濃度為 20 J.1g/ml

'

50μglml

'

80μglml ' 120μ.glml

'

150μglml Ampicillín 的 4mlTSB 培饗液中(共 5ml)

,

再隔夜培養一天 a 3. 分別取出 100 ).Ù的草攏，主[J幸u含 200 J.1移Iml 的 TSB 培譽蓋率中， J;)彎曲破棒將菌法詩句塗 間，每種濃度皆作 3 鶴培護區，隔夜培養之 後，三十黨最血的單一盤落數。

屈、研究結果:

由選擇性培養義的議落特徵對定為金黃色莓 荷球麓的準確性 我們選取三種選擇性培贅華:木蜜醇培 黨基 (MS) 、血液培養幕 (BAP) 、 人線及環境中翁責色輯誇球菌對抗生素抗爭藥，性之研究 培養基 (LS 服) ，及一種非選擇性培養蠶

LB

'作為對照之用。鍵時…人的鼻腔中謀取 險體，其中木蜜醇培養基(諧的挑躍菌落及庸 置為黃色的單一萬落(見對農蠻〈甲)) ，血、液 培養摹仿 AP)接選其溶血特徵的單一菌器(見 封路區(乙)) ，木蜜醉蛋黃培養慕 (LSM) 說 區有不透明富的單一 菌器(見封盟關(丙))

,

LB 軒聞機撓選，做 金黃色葡當球齒的盤定潮試，其結果如表. 所示。 三三種選擇盤培養基也菌落特喜要對是搗金 黃能葡萄球麓的準確哇 c LSM 可以只 由萬革特善安便可 100% 色 i葡萄球藹， BAP 財只有 84%

'

MS 只 進表“」可以看出，由革黨氏染色法(顯 繳照相見封臨盟(了)) ，纜聽測試，雖臨窮追? 試作為鑑定依據(最重婆的依捧為報固醇潛

)

，鹽醬只宙間落特撤來興醫是否為是這黃色 葡蓋碧玉求繭的準確性，對自發組 LB~24%

' MS

60% '

BAP 搗 84%

'

LSM 為 100% 0 可知 LSM 為一真高度選擇性的培養基，可以只宙 的空空 據，認且和凝聽聽積1 試一樣準確。 ，我們啦將 MS 萄球菌的 3。但 E窮落， BAP 上確定為我黃色葡

l

m 、 J

科學教育月刊 第 240 期 中發民頭九十年六月 聽球廟的 42 餾聶莓，以無疆牙籤襲至tlLSM 上，結果都是 100% 出現聲色及不透明區的 特徵;將 MS 上確主豈不是金黃色葡囑球麗的 20 儷噩疇. BAP 上確定不是輩輩童話葡窩球裔 的 8{屬醫路，以無聲牙饗讀到 LSM 上，結果 都是 0% 出現黃色及不透明富的特擻。道 t詩 選一步確定，只以 LSM 上的聽落特犧即可準 確地對您是苦為金黃色蘭葛球聲。 合黃色葡藹球首當在正常人體不;可部位及環境 中出現的比制 在確定 LSM 可以有效端分離金質色聽萄 球簡後，我們便利用 LSM 來分離λ體及環繞 中的委主黃色葡鶴球頭。為了譚一步了解金黃 色葡萄球舊在人體不商部位的出現比例及說 藥盤比例，從本校黨二借班投了 40 位體康的 間整整，分 5日從其口腔黏臉、曙 5饒、鼻艷、及 皮膚擦取樓體。至於嚷境中的金責組窩窩球 菌，要自選取本校崇禪大樓廟所及主黨美大樓鸝 房附近的水清樣敢檢體。其結果晃著雙二。 由表之可以讀出，人體的但不閻部位及 水溝中，金寶色駕萄球萬立豈不是嘍艷菌種， 其他藺讀揖倍的瞳鑄數比倒管在 809島以上， 且出現其他舊禮的人數比佛也都在 759島以 上。繞口服黏聽及身體分離出帶有其飽緝茵 的比ØlJ 鞍筒，人數比曹II 分別海 77.59毛及

75%

'其龍主體部位都在 87.5% 以上，但聽 除了明頓以外，其他部位的翻觀蔥落數比儕 皆在 91% !丘上。由此可知，在正常人體及環 壤中，金賞能葡聽球商都不是體勢鑽譚，只 佔整體制隨群撓的一小部份，也正盟如此， 表二人體不問那位及環境中出現金黃色衛舊球菌的比側。從聽積分離出金質色毒害葡球醋的人數比 及莒落數比都是最高。註:皮膚及學校水溝中金黃色葡萬夏季齒的比備為 o .並不代裝在這些 地方沒有金黃古巴葡梅球醬存在。 口聽黏膜 咽喉 鼻控 獨落葡落數主是萬農葛人 直落數頓落難畏體接閹人 聲落醫落數喪鐘長釀

數 比夢u 人數數比夢u 比例 人數數上長曹u 數 比倒入歡歡比

鑫黃色葡

431

₄₃₁

17

I7

1840

1840

24

24

2876

2876

14

14

萄球髓 一

₄₀

₉₅₂₄

₄₀

₃₅₅₇₈

₄₀

9059

車4帶結%

=4

2.5%

=19

.3%

=60%

盟8.08% 帶35% 其他種顯

8628 8628

31

₃₁

76惡毒

7684

35

35

32702 32702

30

30

!的貓葡 一

₉₅₂₄

一

₃₅₅₇₈

₄₀

40

40

=77.5%

=80.7%

=87.5%

軍9 1.92 踹75%

%

皮膚

學校本溝

鸝鸝數!?闖入

蘭落數車窗薄數畏觀主要藹採 數比的 數數比例 上仁模i 樣樣樣ltf91j 數 金黃龍葡

O

O

o

O

O

O

O

_。

萄球鸝 其他種顯

_{11111 11111 37}

₃₇

15839

_{15839 40}

₄₀

的細聽 一 一 _一

11111

40

15839

40

結 100% 帶92.5%

_=100%

需 100% -52 一

人體且是環境中合資色尊為球議對抗生素抗樂性之研究 者按人餵法順利分離恤金黨色葡葛球菌。 另外，金黃色輔萄球葛佔聲鐘聲落數街 上七19IJ 及人數比棚皆以咽曦最高，分對為 19. 39毛及 60% .口腔黏髏則分別為 4.8% 及 42. 59忌，鼻腔為 8.089島及 359島，其中皮膚及水溝 甚至衛者比夢u皆為 09忌。值得一攏的，皮膚及 學校水溝中黨黨能幫著告球闊的能例為 o .並 不代實在這些是地方沒有金質色輔萄球菌存 在，只說明了以我們的探樣方法，無法得到 會賀龍幫幫球館。 由於水溝中無法以摺練方接分離出金黃 龍葡聽球麗，但是環境中的金黃色葡萄球裔 的抗藥性比例對我們的實驗結果十分重要， 我們便另以會 10%NaCl 的 TSB 培饗鞭做增 殖，在 30 餾增攬樣本中共有 14 個辛苦長圈，上拉 倒為 46.79忌，我們說 14 個有長菌的檢體中每 個聽機挑選 3 餾單一聽蓓，成功地分離出 42 個金蠶色瓣醬球麗的單一聲落，作為說主主黨 感覺種試驗之屑。至於皮膚島於不是我們關 心的議點，並沒有另外作增頰。 抗1.素惑受悅試驗 我聽從口控黏擴挑選 24 個單一菌落，蝠 5接及踴躍中各換護單 30 個學一盤落，學校7..1<溝 中則挑選 42 個員長一爾蓓，利用 10 種抗~薰紙 鍵作標準化的說三主黨感覺樣試驗，豆豆於成大 臨床病人的抗藥，控數據員自由醫院緝藺草提 供，其結果如表三三照示(由於成大醫蹺只報告 7 種說生黨的結果，我們世只比較遠?種抗生 絮說讀性的直是真)。 能表三三可以看出，臨床攝入在 7 攏抗生 素中有 5 種提藥，性比儕遣大投其他那泣，只 有 Penicillin 不管在任何增點抗藥性幾乎都是

100%

·而 Vancomycin 對不曾任何地點都可 維持 100% 感覺性，可以說是艷{寸金黃色葡 萄球蘭最有娥的說生漿。學校水講中有 4 種 說生無民黨當比f9tl為 0 ，口控黏臉有 6 種，喝 噸有 4 轍，轉腔也有 4 種抗全黨抗襲，控比例海

o

·冊臨床病人只有 1 彈。在臨床庸人的 1732 (國樟體中，將疑似院內感蜓的 120 傭轍體單 獨競針，結果其抗藥欖比…般臨床病人更 高，由此可妞，院內環境中的會黃色葡萄球 鸝抗購糧十分巖重。在是道些數童車可以 j響聲知 道抗藥體比棚的嚴重性，做序為學校水溝< 正常人體<臨床病人。 -一一 可唔，一一 --一-一 「一……

l

探樣懿位口腔黏瞋嚼喉

鼻聽 l 學校水溝 _{成大臨床病人疑似院內感染的} 抗紫禁纜頡

_{成大臨床痴人}

;單句些ro些主空ìn (草 15

_{) O}

_{16.7% 60%}

7.1%

77.9%

859毛

i

Penicì

l1i

n (PIO)

1 ∞% l ∞% l ∞%

92.9%

97.7%

99.2

Vancomycin (V A30 ) O

O

O

O

10

O

I

Gentamicìn (GMI0) 10

O

O

O

66

.3%

81%

I

Oxacillìn (OX1)

O

,

0

3 .3先

。

66.9%

839島 i

Clindamycin (CC2)

O

13.3 % O

2

.4%

69.99毛

77%

I

Cephalothin (CF30) O

O

O

i

0

66.9%

83%

!競選的單一藺草喜歡

₂₄

₃₀

₁₇₃₂

120

說:成大臨床病人的抗續控數讀出成大留學院病理部組菌室授(共

53

科學教育月刊 第 2 的難 民國九十年六丹 金發色莓葛球菌的抗藥性與其先前接觸不!可 抗生素濃度的闢係 我們先將各個不向部{立分離到 離窮王求菌 tJ 無菌牙籤鑫至1 含 200 時Iml Ampi~ cillin 的 TSB 培養基中作湖試，給槃只有 2 ，我們挑選其中…葫誦號 M-I( 口腔 黏贖 1 號)作為實驗撞撞。

M-I

Ampicillin(20μglml 、 50μg/ml 、 80μg/ml 、 120μg/ml 、 150μgl ml) 中培養一天後，原本無法生長在會"。μ6

ml Ampicillin

Ampic

il1

in

的聽係如盟一所示。若是置一可辛苦出， 生素 i藤度的增錯，鼠藥性醋種的數黨也有增 加的囑勢，不過從 1農度的總Iml 之役，突變 讓數量便不再增加，甚至有減少的現象。 | 晶宮 j (ß} i 章 ìAf'(j 議 ι 一 主?很吟 吟詩敏J “∞ 4研3 2∞ II 晶 。的扮)。峭的“祕船翎 I(XJ 110 1泊 l 刻:你 11m紗cil1i、成M心~ml) 圖一不同濃度抗素處理與產生抗藥性細聽數 量的關係躍。聽著抗位素濃度的增扭， 抗賽每!全囂種的數量也有主臀部的趨對 o 五、討論: 金黃色駕葛球菌為革蘭氏釋說之球闕， 1μm' 在顯教競下可讀到類似 a 串的葡萄(見對錯圓圈(了)).還體無內于包 子及鞭毛，不能運動，具致病力，會混成腫 脹、串成礦汁，甚至致命的敗即症。 有下列幾撞特性(

1 )

能) 0 (2) 能發酵木蜜舊事。(3)具有溶盛作 ~54 用心 (4) 能護生揖圈 。 (5 )在濃度高違 109忘 食鹽的培養華中仍能生卉。 (6

)

毒，素，

(7)

自醋、 脂質舊書 o (詹前朕荐 1995

•

Prescott 等

1993 )

手IJ 馬上璋的幾種特色，我們議取 3

(

J醬韶膜等 1995

'

Prescott 等

1993 ' Merlino

J

1996)

，拉鞍言們從人體鼻 腔中分離 菌的比壤，以及只 由簡浩特換來對黨有是否隔金黃色幣宿球菌的 準體性。這個結果對我們的接觸會驗很 ，因為我們想要誰人體的不肉都位及環境 分離全黨色葡萄球菌，比較其抗 ，如果無法只由菌落特徵判 色葡鳴球麓， 驗會變的很難進?子，我們路豆豆需要以灣留 溺試法去隙額每…聞單----菌;萃，相當耗時也 不的實際，或者如果分離率偏啦， 得到我們所要的金黃色補萄球囂。

LSM

( Merlino J

1996)

，立 的成分和躍擇原理與 MS 時， 蛋葦的成分， 聽，因此在 LS說 落，電|薩l 灑會出現一閥蛋黃分解後的不透明區 (見封!底觀(再)) .十分容勢問斷。能表一章程 ，在 LSM 透明麗的特徽. 1 ÜÚ9毛 聾. j攀高於 BAP 的 849長及 MS 的的%.這個 數據表示 LS班上的菌落特數甚至可以作為金 黨色吾吾萄球闊的最主鼓鼓樓 ρ9 黃色種聲球笛一般存在於呼吸道黏 膜、 j龍化道黏麟、排泄物、傷口、大義、

人體及環境中金黃色籠萄球話對抗生命說灘 'f生之研究 !哥爾所接觸的物品中(靠著前朕持 1995

'

Prescott 導 1993)

,

體不同音15 位出現的比憫，書本上及文獻中均 無記載，我們便選擇口腔駐旗、咽喉、 控、及皮膚道自舖容易探樣的都位，利用 LSM 來分離金黃色葡筍球藹分割求出其分 離率。結果自由曦的分離率最高，其次分別為 口控黏麟、鼻膛，豆豆訣皮!曹則無法分離出金 黃色葡聽球窟。水溝戚本品?一直無法兮離出金 黃色葡輯球囂， {旦出於水溝中金黃色葡聽去掌 聲的抗藥性比咧對本實驗十分道要，因此我 fr~ 完好先以會 10% NaCI 的 TSB 培養被押增 ，也順利的分離出水 i寓中全黨色葡萄球 菌，為了接免得到太多相同的金黃色駕著奇球 菌，每一個增躍的試管分離出來的金黃龍葡 萄瑋藹，我們只敢去 f簡單一直萃， 11故抗生素 感受住試驗。 本實驗 的盾的是要比較韓康人 體、醫院病人、及環境中金實色聽聽球員言對 說生黨的抗議性差異，在頤和提健讓人體及 環嘴中分離恤金黃色毒害窩球菌後，我們{便利 用和成大醫院方法一致的標準抗生素感受住 試驗，分射求出其妻J十種拉主主黨的抗賽'1乘上仁、 酬，於臀院病人身上金黃葡萄球菌的提 議'1生比阱是由成大醫院情理部緝菌室提供。 結巢如表三，昕萃，正如我們所擴期的，設藥 f生的嚴重程度以醫畏精人最明顯計其次路體 慶人體，於水;轉中的金黃 f惡毒諾諾球菌除 了少數第一代的說生素外，弦琴黨性並沒有想 像中的籲重 o 針對違樣的結果，我們有以下幾點的解 釋: (1) 臀院病人可能正在服用抗一張素，而或 設服用過…段詩闊的稅金絮， tt亢藥性金黃色葡詩球齒的比曹IJ 大增;至於 本校高三倍班 40 倍同學，都去設身體體康，近 期內無服用藥物記錄，身上的抗藥嗤金買色 著剪輯安裝菌的記例相對較低; r窮學校水 j聲中的 金黃色葡萄球盤接輝說是黨的機率及灑壇一 定非常攏，因此說藥性全黨色龍萄球聽不具 生長f聲勢，所佔上七 i7U 最{低。也就是說，抗生 絮說藥性的嚴重程度和其接觸我生黨的機率 成正比，抗素 i監揖越驛蓋章，的場力，抗藥性 輯明顯。(2)如果醫院病人的險體操樣一是在 用藥之前，則醫院病;人身上的抗瓏，往金薰色 葡窩球菌可能是由於院內感染所致，要證明 這個可能性"我們必須另外建臀撓的環境中 分離金買色葡嚮球麓，檢浪1 其抗藥性上仁闕， 如果其抗藥性比例和臀院病人身仁和近 1 才 能驗讀這爾(暇接，道由主是我們 F 次想探討的 問題。不過我們也可從表三看出，從 8 秒鐘 1 月至 89 年 6丹，共計探 1732 餾金章藍色蘭莓球 ，所做的來的我藥性數據中，將其中 提似院內感攘的 120 儷齒落嚷獨兢訐的話， 其抗藥在比的除了 Vancomycin 仍是 O 以外，一 其餘 6 欄抗生素皆 i萬按原來的統計， 著醫院環境中的金簣色葡聽球麓的抗藥性比 俱應該是比其短一般的環境中要高也許多， 也闊撥證明醫院環境中的金黃色葡暫球醋抗 欒位高於其地環境。(3)提錯別拉三位素來 '臨床病人在 7 撞抗主主黨中辛苦 5 種抗菩薩性比 棋錦大於其他部位，比樹高達 70% '學校水 溝中辛苦 4 種抗至主黨說樂，提比較IJ為 0 ，正當人體 的口時黏膜有 6 纜，唱詞饒有 6 禮，鼻腔七位有 4 種說生絮說彈性比棚?這 o '布臨尿病人只有 1 55 于

科學教育 JJ

f!

J

第 240 期 中華民甜九+年六月 攏，這些數線樂聽了醫院捕人身上說黨體的 聲通糧庫。 大多數說黨體制蘭是窮於聲鵲故擒，無 績單單勢鱗灑產生，說罐罐形成的麒臨十分 縷麓，大約可分成罵大輯:…‘染色體基路 費嘴:由於館辦曬稍感覺使之染色髏基閻廠 發生自發投費贅，艇得受體結構故蠻時產 生。發覺自然贊蟹的撥單的為 10心的心，無 以此種實攪披難說續性的常見原囂@二、外 輪 a髓慢說黨總:這是紐曬民樂性影成的::E 圈。緝當通常具有富起色體外的遺傳物質多稱 為賀禮。有…耐種會有說攏，性基園的黨體稱為 R 因子 (R

faC10r)

，可籍臨下熱方式在制鸝 之間水平縛禪:1.轉引作用(

Transduction )

:聲鵲嚨菌體的幫忙. 2.轉形作用( Tr蠱的f。“ rmation) 憬囂的 DNA 融入其他總器中。 3. 擂台作用 (Conjugation) 躇菌種圈子 (F

f揖ctor) 幫茫。 4.移位作用 (Transposition

)

譯自踹躇基園的幫忙〈詹前朕蹲 1995

'

Pr

es+

cott 嚀 1993 )。在本實驗中，我們感興蟬的 聽點是在不悶地點之闊的抗黨佳蓋興，不攝 我們有興菌種佛彈，在後績，實驗中可進行金 賞能葡萄球菌說讓健形成原因的研究@ 針對染色體華國貨攤所產生的新抗曬控

義思，我們設計了方法讓讀賣抗生黨的歡用

確實會使得組閣累積身上的樂蟬，造成說難 性問鸝騙來鐘難蔥。在我們的實驗中，一開 始是w.純種作增措增擻，器泣不可能能其權 緝聾獲得貿體而產生懿黨佳，而是搗能體上 的華閣攬生自發燒寶變所織成。認圈五所 主魚，嘴變種數.e每 10-1500 '聽聽試管內細 聲數最為 1011 _{，費蟬罐丟進 10-}8_...10-10 _{I 串i足可} 確定成懿難性突變為染色體上的白發性突 變。金賞能葡萄球盤在不開濃度的說三位置輯 Ampicillin 培養下，若菌種發生多種變產生抗雛 幟，隨著說生難激臘的提高，樂贊纜的競爭 實艷當相對提高，結樂知釀五所示，磁實可 看到抗轍，性樂變種的數黨關著抗生黨議度的 增加隔膜著增加，只是濃度起過 IO Jl./ml 後，突變種數量錢不會握讀繪制，可能是鐘

海泊。""ml 及 150""撼的讀度太醋，獲得一

開始的細躍歡自無法增姆斯致﹒ 抗生黨議攘的提高，使得鼠藥性質縷縷 的數蠢驢著增加，意碌著謊生灘的難用rlJ導 致人體或環境中說讓憧突變釀比模i 龍之增 加，追悔結果當呼應我們的另一鐘結論:抗 攤煌的難盤穗輝以醫院聽人身上最明顱，其 次為健康人體，聽後才是水欄中的金黃色葡 萄球擒。 人類在利用抗生無蜘付鱷齒的問時，籬 爾也在找都對價應付 λ黨的放軍，為了邂免 聽身成為抗囑犧麗蓮的演化過床，謹守說1:. 爺的使用原與「當用則用，誰當對當.J '應該 是最能態實實疇。

六、參帶文獻:

1.聾前朕;楊絮通攜著·

1995

'鐵生物學上 冊，華杏出臨社

2.Prescott LM ; Harley JP ; Klein DA

I

1993

I

Microbiology • 2

nd

edition ' Wm.

C. Brown Publishers

3. 雛.炫;真竹間;李佳續;攤鱗仁; 1車繼

辦;曬智雄;江型電誠 I

1996 • Methicìllin

謊讀性金賀龍當醫球白質:臨床上鈴響訊，

Chang Gung Med J • 19

(4) : 291-'

人體 2是環境 t 食費色植.綠草對抗$.'"說寶島性之研究

4. 囂繁婚;制建漿·

1995

·岱糊地區分離之

委主黃色葡鳴球蠢事是聞

觀及說生物質感受，性

之比較，

Chinese J 話 icrobiol

Immunol •

28 : 47-58

5. 國立成功大學歸撥院附鼓聲說痛理部做生 鵲起工作學冊. 1998 年 10 月髒冒了

6.Merlino J; Gill R; Robertson OJ • 1996 •

Application of lipovitelli和salt-mannitol

agar

for screening. isolation. and presumptive

iden-tificatíon of

Staphylococcus 矗ureus

in a

teach-ing hospital '

J

Clin

Microbi叫·

34(12);

3012-5

七、聽謝:

感謝成大醫學院微生物及免疫學研究所

(司總潛教授，對本篇論文擺棋許多寶寶貴的建 議與研究方冉的錯互;成大醫學蹺擒頭部制 菌室組錢養愛惠小組提供路路費醫種與抗擴盤 數據:港明高中主導學生控真大力支接躍餐， 且提供一儷喂民軒教學及研究環境，在此一 f并歡上萬分謝謝。 歸誰…:

觸，每槍i到 (Catalase Test) 步轉

l.擒一小滴 3

%

H，O，訣戰磁片上。

2. 能關巴 flJ 分續提之堵，塵器上，以無蘭牙懿

沾敢讓當菌童聲豆豆己讀 3至，0 ，之載破片上。 3. 觀察是否有穿軍海鑫生，有氣攏的 ~D 含有觸 牌 轎戰之: 被閣，每被 j到 (Coagulase Test) 少踴 l.每隻試智中，加入 5mlTSB '議上試警鐘立豆 瓣齒。 2. 按自己重i 分繃號之培饗蓋上，各以接種環 接種豆豆試響中，以 350 C 培養…矢。 3. 蟄居，各加入 O.Sml 稀蟬 5 倍之兔血漿， 以 350 C 培賽。 4. 三學將後，取踹觀察是否攬生雖闢琨議。

閑自主主:

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不閱讀纜的 BaS04 沉擻，和賦管內的議灘度

徹比較，即可得出一大約的組審數，研如本，實 驗糟的是 McFarland

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其混濁朦相當於 L5x1伊 CFU/ml ( 每議升的培 體被中會有I.5xl08_{個組舊)。} 對麗割(閉

_)-(T)說明:

自閱(甲)此為木黨轉培養基(MS) 。左半讀為金黨 色葡萄球醋，聽落海灘色;右半續為其 他鑼額的轉醬球菌，自喜權幸這白色，爛圖 畫事紅態。此圖蘭落是利用-磁盤聾法無 搏。 國(乙)此第串鞭瑜，聽基(BAP) 。左半瀰為金糞 色爾蘭球菌，黨落聞觀其權血轉鑽;右 半邊為其他撞的葡萄球囂，蕭落周爛不 真禮品特傲。;此聾聽器是利用王軍塗護 法所f辱。 團(同) 1ft籍木蜜瞬黨黨培養鑫 (LSM) 。左半 過最為金黃色聲聲球富，關釋為黨龍，且 周鑽智不還明尷;右半鐘海其他犧娥的 驚雷球謝，菌憲章各自色，周闢為紅色， 無不透明霉。此圈圈落是輯用之三革韓賣 法無縛。 聽(T)金賞能輔葛球謂的革蘭氏染色聾。般大 樓率的。。稽。

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