中國醫藥大學機構典藏 China Medical University Repository, Taiwan:Item 310903500/50178

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(1)中國醫藥大學藥學院中國藥學暨中藥資源學系碩士論文編號︰ICPS-M391. 指導. 教授︰張永勳教. 授. 共同指導教授︰何玉鈴副教授. 枳實與其混淆藥材之鑑別及品質評估. Identification and Quality Control of Aurantii Immaturus Fructus and Misused Related Species. 研究生︰蔡炎璋 Yen-Chang Tsai. 中華民國 102 年 7 月.

(2) 謝辭提起筆寫謝辭，竟是如此感動。回首二年碩士生涯，最要感謝指導教授張永勳老師與共同指導教授何玉鈴老師，不僅在日常待人處事的提點關懷，繁忙中仍不忘檢視論文進度，使我獲益良多。感謝中藥所的各位老師謝明村、彭文煌、吳啟瑞、鄭寶雲、劉淑鈴、黃冠中、林民昆、張文德、李孟修、陳昱璋、游邦照、柯裕仁、郭悅雄、黃慧琪及系主任郭昭麟老師等之專業領域教學。中醫系江素媖、張賢哲老師的國際視野；藥學系余建志、廖江川老師、明通製藥張光雄董事長、勝昌製藥李威著總經理、藥檢局張憲昌、顧祐瑞老師的實務經驗等，使實驗之各方面得以順利進行。實驗室學長姐：駿彬、尚志、仁傑、世勳、聖剛、兆群、朝駿、繼仁、立嘉、坤璋、勇嘉、州凱、建凱、列慶、秀昀、道威、祐田、昱瑋、家茹、香秀、靜瑩、昆錚、美勳、琳珍、玫伶的耐心指導；同窗：佳欣、于軒、月柔、筱豔、佩蓁、思雯、于傑、奕緯、秉暉、秉宸、銘輝、柏鈞彼此鼓勵；學弟妹：旻峰、雅玲、宜薇、皓澤、晉維、Anna 的及時幫助；助理：俊評、國倫、國元、廣洋、趙掦、學文、玉茹、君品、怡倩、文佳、家瑜、懿文、蕙如、惠薰、怡蓁、虹儀、欣儀的職埸哲學等，讓我的實驗室生活多彩多姿。最後，感謝我的家人，一路走來的支持與包容，始得完成學業。「沒有你們就沒有我」! 僅以此論文獻給所有關心我的師長及朋友們，謝謝你們! 蔡炎璋謹誌 2013.7.

(3) 目目. 錄. 錄................................................................................................. i. 圖目錄............................................................................................... vi 表目錄.................................................................................................x 略字表............................................................................................... xi 摘要.................................................................................................. xii Abstract ........................................................................................... xiii 第一章. 緒論 ....................................................................................1. 第二章. 總論 ....................................................................................2. 第一節枳實本草考察 .....................................................................2 一、歷代本草所錄枳實原文 ....................................................4 二、枳實之本草系統圖 ..........................................................12 三、枳實之本草考察 ..............................................................13 第二節中國產枳實之藥用植物學考察 .......................................18 一、芸香科(Rutaceae) .............................................................20 二、枳屬(Poncirus) .................................................................21 三、柑橘屬(Citrus)..................................................................25 第三節臺灣產芸香科植物考察 ...................................................33 i.

(4) 一、柑橘屬(Citrus)..................................................................36 第四節枳實之生藥學文獻考察 ...................................................41 一、基原 ..................................................................................41 二、一般性狀 ..........................................................................41 三、鑑別 ..................................................................................41 第五節枳實之成分及藥理學文獻考察 .......................................45 一、成分 ..................................................................................45 二、藥理 ..................................................................................47 三、成分之藥理作用 ..............................................................50 第三章. 實驗材料與方法 ..............................................................51. 第一節枳實材料之收集 ...............................................................51 第二節枳實之顯微鑑別 ...............................................................52 一、組織冷凍切片 ..................................................................52 二、粉末鏡檢 ..........................................................................54 第三節薄層層析(TLC)之指標成分鑑定 .....................................55 一、檢液之製備 ......................................................................55 二、標準品之製備 ..................................................................55 三、層析條件 ..........................................................................56 第四節高效液相層析(HPLC)之指標成分測定 ..........................57 ii.

(5) 一、檢液之製備 ......................................................................57 二、標準品配製 ......................................................................57 三、檢量線 ..............................................................................58 四、使用儀器 ..........................................................................59 五、分析條件 ..........................................................................59 六、藥材指標成分定量 ..........................................................60 第五節枳實之黃麴毒素檢驗 .......................................................61 一、化學試劑 ..........................................................................61 二、實驗儀器 ..........................................................................61 三、實驗方法 ..........................................................................62 第六節枳實之抗氧化含量評估 ...................................................64 一、化學試劑 ..........................................................................64 二、實驗儀器 ..........................................................................64 三、實驗方法 ..........................................................................65 第七節枳實之抗氧化活性評估 ...................................................67 一、化學試劑 ..........................................................................67 二、實驗儀器 ..........................................................................67 三、實驗方法 ..........................................................................68 第四章. 結果 ..................................................................................69 iii.

(6) 第一節顯微鑑別 ...........................................................................69 一、酸橙 ..................................................................................69 二、甜橙 ..................................................................................71 三、綠衣枳實 ..........................................................................73 第二節枳實與其混淆藥材薄層層析之指標成分鑑定 .............75 一、萃取方法之比較 ..............................................................75 二、展開溶媒系統之比較 ......................................................79 第三節枳實與其混淆藥材高效液相層析之指標成分測定 .....85 一、標準品 naringin (柚皮苷)、hesperidin (橙皮苷)、 neohesperidin (新橙皮苷)、synephrine (辛弗林)之高效液相色譜層析圖 ....................................................................85 二、檢量線之繪製 ..................................................................87 三、指標成分之定性及定量 ..................................................89 第四節枳實之黃麴毒素檢驗 .......................................................95 一、混合標準品(Aflatoxin B1、B2、G1、G2)對照 ...............95 二、檢量線之繪製 ..................................................................96 三、黃麴毒素定性及定量部分 ............................................101 第五節枳實之抗氧化成分含量測定 .........................................102 第六節枳實之抗氧化成分活性評估 .........................................105 iv.

(7) 第五章討論 ..................................................................................106 第六章結論 ..................................................................................109 第七章參考文獻 .......................................................................... 111. v.

(8) 圖目錄圖一、本草圖經之(A)枳實 (B)枳殼 .....................................................2 圖二、本草綱目(A)枳實(枳殼) (B)枸橘 .............................................3 圖三、枳實之本草系統圖 ....................................................................12 圖四、中國植物誌之枸橘圖 ................................................................24 圖五、臺灣植物誌之酸橙圖 ................................................................38 圖六、甜橙 Citrus sinensis Osbeck .....................................................39 圖七、甜橙 Citrus sinensis Osbeck 之花..............................................40 圖八、甜橙 Citrus sinensis Osbeck 之果實..........................................40 圖九、標準品結構 ................................................................................58 圖十、酸橙(Citrus aurantium L.)組織橫切面 .....................................69 圖十一、酸橙(Citrus aurantium L.)粉末鑑別特徵 .............................70 圖十二、甜橙(Citrus sinensis Osbeck)組織橫切面 .............................71 圖十三、甜橙(Citrus sinensis Osbeck)粉末鑑別特徵 .........................72 圖十四、綠衣枳實(Poncirus trifoliata Raf.)組織橫切面 ....................73 圖十五、綠衣枳實(Poncirus trifoliata Raf.)粉末鑑別特徵 ................74 圖十六、自行開發萃取方法之薄層層析圖 ........................................76 圖十七、綠衣枳實、酸橙及甜橙各三批之薄層層析圖 ....................77 圖十八、臺灣產甜橙與本實驗甜橙三批比較之薄層層析圖 ............78 vi.

(9) 圖十九、萃取樣品在展開溶媒一之薄層層析圖 ..............................79 圖二十、萃取樣品在展開溶媒二之薄層層析圖 ................................80 圖二十一、萃取樣品在展開溶媒三之薄層層析圖 ............................81 圖二十二、酸橙添加標準品之確認試驗層析圖 ................................82 圖二十三、甜橙添加標準品之確認試驗層析圖 ................................83 圖二十四、綠衣枳實添加標準品之確認試驗層析圖 ........................84 圖二十五、枳實之指標成分之層析圖 ................................................85 圖二十六、Neohesperidin (新橙皮苷)之 HPLC 色譜層析圖 ...........86 圖二十七、酸橙②之 HPLC 色譜層析圖 ............................................86 圖二十八、酸橙②添加 neohesperidin(新橙皮苷)之確認試驗層析圖 ............................................................................................86 圖二十九、Naringin(柚皮苷)之檢量線 ..............................................87 圖三十、Hesperidin (橙皮苷)之檢量線 ..............................................87 圖三十一、Neohesperidin (新橙皮苷)之檢量線 ................................88 圖三十二、Synephrine (辛弗林)之檢量線 .........................................88 圖三十三、酸橙(Citrus aurantium L.) ①HPLC 層析圖 ....................90 圖三十四、酸橙(Citrus aurantium L.) ②HPLC 層析圖 ....................90 圖三十五、酸橙(Citrus aurantium L.) ③HPLC 層析圖 ....................90 圖三十六、甜橙(Citrus sinensis Osbeck) ①HPLC 層析圖................91 圖三十七、甜橙(Citrus sinensis Osbeck) ② HPLC 層析圖..............91 vii.

(10) 圖三十八、甜橙(Citrus sinensis Osbeck) ③ HPLC 層析圖..............91 圖三十九、綠衣枳實(Poncirus trifoliata Raf.) ①HPLC 層析圖 .......92 圖四十、綠衣枳實(Poncirus trifoliata Raf.) ②HPLC 層析圖 ...........92 圖四十一、綠衣枳實(Poncirus trifoliata Raf.) ③HPLC 層析圖 .......92 圖四十二、抽驗市售科學中藥之 HPLC 層析圖 ................................94 圖四十三、檢品黃麴毒素標準品 B1、B2、G1、G2 之 HPLC 層析圖 ............................................................................................95 圖四十四、黃麴毒素 G2 之檢量線 ......................................................96 圖四十五、黃麴毒素 G1 之檢量線 ......................................................96 圖四十六、黃麴毒素 B2 之檢量線 .....................................................97 圖四十七、黃麴毒素 B1 之檢量線 .......................................................97 圖四十八、酸橙檢品①黃麴毒素檢驗之 HPLC 層析圖 ....................98 圖四十九、酸橙檢品②黃麴毒素檢驗之 HPLC 層析圖(G1) .............98 圖五十、酸橙檢品③黃麴毒素檢驗之 HPLC 層析圖(G1) .................98 圖五十一、甜橙檢品①黃麴毒素檢驗之 HPLC 層析圖(G2) .............99 圖五十二、甜橙檢品②黃麴毒素檢驗之 HPLC 層析圖 ....................99 圖五十三、甜橙檢品③黃麴毒素檢驗之 HPLC 層析圖 ....................99 圖五十四、綠衣枳實檢品①黃麴毒素檢驗之 HPLC 層析圖(B1) ...100 圖五十五、綠衣枳實檢品②黃麴毒素檢驗之 HPLC 層析圖(B2) ...100 圖五十六、綠衣枳實檢品③黃麴毒素檢驗之 HPLC 層析圖(G2) ...100 viii.

(11) 圖五十七、Gallic acid 檢量線 ............................................................103 圖五十八、Rutin 檢量線 ....................................................................103 圖五十九、DPPH 自由基的清除率 ...................................................105. ix.

(12) 表目錄表一、枳實性味、藥效整理 .................................................... 15 表二、枳實方用整理 ................................................................ 16 表三、枳實禁忌整理 ................................................................ 17 表四、中國產枳屬植物之檢索表 ............................................ 22 表五、中國產柑橘屬植物之檢索表 ........................................ 27 表六、中國產枳實的原植物種類 ............................................ 32 表七、臺灣產芸香科植物之檢索表 ........................................ 34 表八、臺灣產柑橘屬植物之檢索表 ........................................ 36 表九、枳實的直觀鑑定整理 .................................................... 44 表十、展開溶媒配製及呈色方法 ............................................ 56 表十一、標準品之有效線性範圍 ............................................ 89 表十二、各類藥材其指標成分含量 ........................................ 93 表十三、酸橙及甜橙藥材之 synephrine (辛弗林)含量 .......... 93 表十四、黃麴毒素標準品之有效線性範圍 ............................ 98 表十五、各藥材其黃麴毒素檢驗含量 .................................. 101 表十六、各檢品之甲醇萃取率 .............................................. 102 表十七、分類化合物的含量 .................................................. 104. x.

(13) 略字表 BHT. Butylated Hydroxy Toluene. CA. Citrus aurantium L.. cr. crystal. CS. Citrus sinensis Osbeck. DPPH. 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl. ELISA. Enzyme-linked immunosorbent assay. ep. epidermis. h. hair. HPLC. High-Performance Liquid Chromatography. LD50. Lethal Dose 50. mec. mesocarp. MI. Microscopic Identification. OCT. Optimal Cutting temperature solution. or. oil resevoir. PT. Poncirus trifoliata Raf.. SDS. Sodium Dodecyl Sulfonate. TLC. Thin layer Chromatography. UV-Vis. Ultraviolet-Visible. vb. vascular bundle. xi.

(14) 摘要枳實為芸香科(Rutaceae)植物酸橙 Citrus aurantium L.及其栽培變種或甜橙 Citrus sinensis Osbeck 之乾燥幼果。夏季五~六月收集自落的幼果，除去雜質，自中部橫切為兩半，曬乾或低溫乾燥。較小者直接曬乾或低溫乾燥。枳實為中醫臨床常用藥物之一，功效有破氣消積，化痰散痞。目前市場上枳實藥材之使用，有嚴重混用與誤用之情形。由於枳實在中藥及臨床應用歷史悠久，具有廣泛的藥用價值，為確保臨床用藥的安全有效，對枳實正品 (酸橙及甜橙)及常見之誤用品(綠衣枳實 Poncirus trifoliata Raf.)做進一步之評估比較。檢測方法包括: 品質評估、安全性評估、活性評估。品質評估包括:外部形態特徵(酸橙、甜橙瓢囊數均大於 8，綠衣枳實有毛茸)、顯微鑑別 (甜橙粉末扇形橙皮苷結晶遍佈，綠衣枳實果皮存在非腺毛)、薄層層析法 (正丁醇：水：冰醋酸（7：2：1）展開溶液確認基原)、高效液相層析法(綠衣枳實未檢出藥典規範之辛弗林成分)。活性評估測定包括: DPPH 自由基清除能力 (依序為酸橙 > 甜橙 > 綠衣枳實)、總黃酮含量(酸橙為三者中最高)、總多酚類含量(綠衣枳實為三者中最高)。黃麴毒素之檢測對枳實藥材 (9 批中檢出 6 批) 進行安全性評估。藉由本研究的方法與結果，可做為國人對枳實的區分以及市售枳實的基原和品質優劣比較之參考。 xii.

(15) Abstract Aurantii Immaturus Fructus, of the Rutacae family, is the immature fruit of the cultivars of Citrus aurantium L. or Citrus sinensis Osbeck. It is harvested in the summer from May to June. Following the collection of the fallen young fruit, impurities are removed and the fruit is centrally crosscut into two halves to either be dried by the sun or via low-temperature.. Smaller. fruits. are. directly. dried. without. halving. Aurantii Immaturus Fructus is frequently used clinically in traditional Chinese medicine to break qi and accumulation, promote digestion, and resolve phlegm. However, Aurantii Immaturus Fructus in today's herbal market often consists of a mixture of different herbs, or is altogether another herb. Aurantii Immaturus Fructus is a commonly used Chinese crude drug, utilized since ancient times for its therapeutic effect by the general public as well as in clinical settings. To guarantee that Aurantii Immaturus Fructus is both safe and effective, evaluative comparisons were made between Aurantii Immaturus Fructus (of both Citrus aurantium L. and Citrus sinensis Osbeck) and Poncirus trifolata Raf., a fruit commonly mistaken for the crude drug. Quality control, safety, and medicinal evaluations. were. carried. out.. Quality. control. assays. included. characterizing external morphological traits (only Citrus aurantium L. and Citrus sinensis Osbeck had more than 8 segments, and having hairs was unique to Poncirus trifoliata Raf.), microscopic identification (unique traits identified were fan shaped hesperidin crystal throughout C. sinesis powder, nonglandular hairs on Poncirus trifoliata Raf. peel, and a xiii.

(16) large mesocarp in C. aurantium), thin layer chromatography (developing solution of butanol：water：glacial acetic acid [7：2：1] was used to confirmed. each. drug's. identity),. and. high. performance. liquid. chromatography (synephrine, found in Aurantii Immaturus Fructus in accordance to Pharmacopoeia specifications, was not detected in P. trifoliata Raf.). Safety inspections tested the type(s) and level(s) of aflatoxins in each drug (of the 9 batches, aflatoxins were detected in 6). Activity assessments included tests of DPPH free radical scavenging activity (the order of highest activity to lowest was C. aurantium, C. sinesis, P. trifoliata), total flavonoid contents (ordered from highest to lowest: C. aurantium, C. sinesis, P. trifoliata.), and total polyphenol contents (ordered from highest to lowest: P. trifoliata, C. sinesis, C. aurantium). Through this study, an understanding of Aurantii Immaturus Fructus sold in the Taiwanese herbal market, in terms of origin, safety, and medicinal effects, was obtained. The results of this study can be used to provide references to the authentication and quality evaluation of Aurantii Immaturus Fructus sold in Taiwan.. xiv.

(17) 第一章. 緒論. 枳實為臨床常用中藥，臺灣中藥典 2013 年版[1]與中華人民共和國藥典 2010 年版[2]共同收載：枳實功能破氣消積，化痰散痞。枳殼理氣寬中，行滯消脹。其相同來源為芸香科植物酸橙 Citrus aurantium L. 的乾燥幼果(枳實)或未成熟果實(枳殼)。宋代本草衍義：枳實、枳殼一物也，小則其性酷而速，大則其性詳而緩。說明了來自同一植物的果實，其療效因採收期不同而異，藥名也有所區別[3]。柑橘屬植物的天然分布在中國大致以秦嶺-淮河為界，古云：江南為橘，江北為枳。農人嫁接橘至枳(砧木)後，在長江以南尚可存活，移至江北則難以抵禦寒冷，隔年春天枳重新發芽為枳(枸橘)。魏晉南北朝以前枳實來源為枸橘，宋代以後枳實則以酸橙為主流正品。今臺灣市場品多混淆使用[4]，近年來國人對中藥品質管制以及用藥安全越來越重視。梁．陶弘景云：眾醫都不識藥，唯聽市人，市人又不辨究，皆委采送之家。采送之家，傳習造作，真偽好惡莫測[5]。因此，為了確保用藥品質，本論文分別對臺灣中藥典收載枳實與常見混淆藥材研究基原、形態學、顯微鑑別外，並進行成分分析、抗氧化活性及安全性評估。希望藉由本研究，可做為國人對市售枳實的基原辨別和評價藥材品質參考。. 1.

(18) 第二章. 總論. 第一節枳實本草考察本品入藥始載於神農本草經，列木部中品。最早對枳實有圖和形態說明的是宋．本草圖經[6]，其所附圖 ”成州枳實” 和 ”汝州枳殼”，成州指今甘肅成縣，汝州指今河南臨汝；並描述枳實：如橘而小，高亦五、七尺，葉如橙，多刺，春生白花，至秋成實。九月、十月採，陰乾。觀察二圖，葉皆為三出複葉，多刺，且“成州枳實” 花果並存，這些特點均與芸香科植物枸橘 Poncirus trifoliata (L.) Raf.的形態符合。. 圖一、本草圖經[6]之(A)枳實 (B)枳殼. 2.

(19) 魏晉南北朝以前枳實、枳殼來源為枸橘 Poncirus trifoliata (L.) Raf.，明代李時珍．本草綱目[7]將枸橘另列專條，釋名臭橘，演變至今則以酸橙 Citrus aurantium L. 及其變種為主流正品。甜橙 Citrus sinensis Osbeck 作為枳實來源首收載於中華人民共和國藥典 1985 年版[8]。. 圖二、本草綱目[9] (A)枳實(枳殼) (B)枸橘唐．蘇敬．新修本草：枳實，日乾乃得，陰便濕爛，用當去核及中穰乃佳，今云用枳殼乃耳，若稱枳實需合穰用，殊不然誤也。可知在唐代已有枳實、枳殼兩個不同名字[[10]。宋．沈括．補筆談云：六朝以前醫方唯有枳實，無枳殼，後人用枳之小嫩者為枳實，大者為枳殼。說明了枳實、枳殼係來自同一植物的果實。宋．開寶本草以枳殼與枳實’’主療稍別’’，將枳殼另列專條。 3.

(20) 一、歷代本草所錄枳實原文神農本草經[11-13] 枳實。味苦、寒。無毒。治大風在皮膚中，如麻豆苦癢。除寒熱結，止利，長肌肉，利五臟。益氣，輕身。除胸脅痰癖。逐停水，破結實，消脹滿。心下急痞痛，逆氣，脅風痛。安胃氣，止溏泄。明目。生川澤。九月、十月採，陰乾。名醫別錄：九月、十月採，陰乾。案說文云：枳，木似橘。周禮云：橘踰淮而化為枳。沈括．補筆談云：六朝以前醫方唯有枳實無枳殼，後人用枳之小嫩者為枳實，大者為枳殼。吳普本草：枳實苦。雷公酸，無毒。李氏大寒，九月十月采陰乾。雷公炮炙論[14] 雷斅曰：枳實、枳殼性效不同，若使枳實，取辛、苦、酸，并有隟油(果皮細孔裡有油漬)者，要陳久年深者為佳，不去穰核，以麥麩炒至麩焦去麩用。陶弘景曰：枳實采破令乾，除核微炙令乾，用以陳者為良，俗方多用，道家不須。(由於藥材混收，可能較難以買到道地的藥材) 本草經集注[15] 枳實味苦，酸，寒，微寒無毒，主大風在皮膚中，如麻豆苦癢，除寒熱熱結，止痢長肌肉，利五藏，益氣輕身，除胸脇淡癖，逐停水， 4.

(21) 破結實，消脹滿，心下急痞痛，逆氣脇風痛，安胃氣，止溏洩，明目，生河內澤，九月十月採，陰乾。重輯新修本草[16] 枳實味苦，酸，寒，無毒，主大風在皮膚中，如麻豆苦癢，除寒熱結，止痢長肌肉，利五藏，益氣輕身，除胸脇淡癖，逐停水，破結實，消脹滿，心下急痞痛，逆氣脇風痛，安胃氣止溏洩，明目，生河內澤，九月十月採，陰乾。今處處有之，採破令乾用之，除中核，微炙，令香亦如橘皮，以陳者為良。枳樹枝莖及皮，療水脹暴，風骨節疼急。枳實俗方多，道家不須也。謹按(慎查考。引用論據、史實開端的常用語)枳實日乾乃得，陰便濕爛，用當去核及中穰乃佳，今云用枳殼乃稱。若稱枳實須合核穰用者殊不然也。本草圖經[6] 枳實，生河內澤。枳殼，生商州川谷，今京西、湖州郡皆有之，以商州者為佳。如橘而小，高亦五、七尺，葉如橙，多刺，春生白花，至秋成實。九月、十月採，陰乾。七月、八月採者為實；九月、十月採者為殼。今醫家多以皮厚而小者為枳實；完大者為殼，皆以翻肚如盆口唇狀，須陳久者為勝。近道所出者，俗呼臭橘，不堪用。經史證類備急本草[17] 唐本注：枳實日乾乃得，陰便濕爛，用當去核及中穰乃佳，今或 5.

(22) 用枳殼乃爾。若稱枳實須合核穰用者殊不然也。陳藏器本草：枳實根皮主痔末服，方寸匕，本經採實用，九月十月不如七月八月，既厚且辛。舊云江南為橘，江北為枳。今江南俱有枳橘，江北有枳無橘，此自是種別，非關變也。經史證類大觀本草[18] 臣禹錫等謹按藥性論：枳實臣味苦辛，解傷寒結胃，入陷胃陽用主上氣喘，欬腎內傷令陰痿而有氣加而用之。千金方：治胃痺氣壅滿，心膈不利。枳實二兩，麩炒微黃，為末非時以清粥飲調下。經驗方：治腸風下血，枳實半斤麩炒，去瓤綿，黃耆半斤洗剉為末米飲，非時下二錢匕，若難服，以糊為丸，湯下三五十丸效。集驗方：治五痔不以年月日久，新枳實為末使蜜丸，如梧子大空心飲下二十丸。濟眾方：治傷寒後卒胃膈閉痛，枳實一味剉麩炒黃為末，服二錢米飲調下，一日二服。廣利方：治小兒久痢淋瀝，水穀不調，枳實六八分擣末以飲汁，調二錢匕二歲服一錢。子母秘錄：治婦人陰腫堅痛，用半斤碎炒令熟，故帛裹熨冷即易之。 6.

(23) 重修政和經史證類備用本草[19] 陶隱居云：今處處有，採破令乾用之，除中核微炙令香亦如橘皮，以陳者為良，枳樹莖及皮療水脹暴，風骨節疼急，枳實俗方多用，道家不須。圖經曰：枳實生河內川澤，枳殼生商州川谷，今京西江湖州郡皆有之，以商州者為佳。如橘而小，高亦五七尺，葉如棖多刺，春生白花，至秋成實，至九月十月採乾。舊說七月八月採者為實，九月十月採者為殼。今醫家多以皮厚而小者為實，完大者為殼，皆以翻肚如盆口唇狀，須陳久者為勝，近道所出者俗呼臭橘不堪用。張仲景治心下堅大如盤，水飲所作，枳實术湯主之，枳實七枚，术三兩，以水一斗，煎取三升，分三服，腹中軟即稍減之。又胃痺心中痞堅，留氣結胸，胸滿，脅下逆氣搶心，枳實薤白桂湯主之。陳枳實四枚，厚朴四兩，薤白半斤，切栝樓一枚，桂一兩，以水五升，先煎枳實、厚朴，取二升去滓，內餘藥於湯中，煎三兩沸，分溫三服，當癒。又有橘皮枳實湯，桂生薑枳實湯，皆主胃痺心痛。葛洪治卒胃痺痛，單用枳實一物，擣末服方寸匕，日三夜一。其根皮，治大便下血，末服之，亦可煮汁常飲。又治卒中急風，身直不得屈伸反覆者，刮取枳木皮屑，謂之枳筎一升，酒一升，漬一宿，服五合，至盡，再作，良。. 7.

(24) 外臺秘要：塗風疹(蕁麻疹)，取枳實以以醋漬令濕，火炙，令熱適寒溫用熨上即消。又方：治積痢脧肛，枳實石上磨，令滑鑽著柄蜜塗，火炙令煖更易熨肛取縮即止。本草衍義[20] 枳實枳殼一物也，小則其性酷而速，大則其性詳而緩，故張仲景治傷寒倉卒之病，承氣湯中用枳實，此其意也，皆取其疏通決泄破結實之義，他方但導敗風壅之氣可常服者，故用枳殼其意如此。御製本草品彙精要[21] ［苗］圖經曰：如橘而小，高亦五七尺，葉如橙多刺，春生白花，至秋成實，至九月十月採乾。舊說七月八月採者為實，九月十月採者為殼。今醫家多以皮厚而小者為實，完大者為殼，皆以翻肚如盆口唇狀，須陳久者為勝，近道所出者俗呼臭橘不堪入藥。［地］圖經曰：生河內川澤，今京西江湖州郡皆有之，道地成州商州川谷。［時］生春生新葉，採七八月取實。［收］日乾。［用］實莖皮根皮 8.

(25) ［質］類青皮而堅厚［色］青黑［味］苦酸［性］寒洩［氣］氣薄味厚陰也［臭］香［主］消痰飲除堅積［製］剉碎麩炒用［治］療藥性論曰：治傷寒結胸上氣，喘欬腎傷冷陰痿。陶隱居云：莖皮消水脹并暴風骨節疼急。陳藏器云：根皮主痔及大便下血。湯液本草云：除寒熱破結實，消痰癖并心下痞，逆氣脇痛，去脾經積血，消宿食，破水積以洩裏除氣。［合治］合白术水煎療水飲所作心下堅大如盤。合酒漬木皮治卒中風，身直不得屈伸。合米飲調末治胸痺氣壅滿，心膈不利。本草綱目[22] 枳實下列枳殼：枳殼氣味苦酸微寒無毒。權曰：苦辛。元素曰：氣味升降與枳實同。泉曰：沉也陰也。［主治］風痺麻痺，通利關節，勞氣欬嗽，背膞悶倦，散留結胸 9.

(26) 膈痰滯，逐水消脹滿，大脇風安胃止痛。開寶：遍身風疹肌中如麻豆惡瘡，腸風痔疾，心腹結氣兩脇脹虛關膈壅塞。權甄：健脾開胃調五臟，下氣止嘔逆，消痰治反胃霍亂、瀉痢，消食破癥結痃癖五膈氣及肺氣水腫，大小腸除風明目炙熱熨痔腫。大明：泄肺氣除胸痞。元素治裏急後重。［發明］元素曰：枳殼破氣勝濕化痰，泄肺走大腸，多用損胸中至高之氣止，可二三服而已。稟受素壯而氣剌痛者看在何經分，以別經藥導之。杲曰：氣血弱者不可服，以其損氣也。好古曰：枳殼主高，枳實主下。高者主氣，下者主血，故殼主胸膈皮毛之病，實主脾胃之病，大同小異。朱肱活人書言，治痞宜先用桔梗枳殼湯，非用此治心下痞也，果知誤下氣將陷而成痞，故先用此使不致於痞也。若已成痞而用此，則失之晚矣。不惟不能消痞反損胃中之氣，先之一字有謂也。時珍曰：枳實、枳殼氣味功用俱同，上世亦無分別，魏晉以來始分實殼之用。潔古張氏東垣李氏又分治高治下之說，大抵其功皆能利氣，氣下則痰喘止，氣行則痞脹消，氣通則痛剌止，氣利則後重又以枳殼為通用，則枳實不獨治下而殼不獨治瘍也。蓋飛門至魄門皆肺主之三焦相通一氣而已。則二物分之可也，不分亦無傷。枸橘：［釋名］臭橘 10.

(27) ［集解］時珍曰：枸橘處處有之，樹葉並與橘同，但幹多剌，三月開白花，青蕋不香，結實大如彈丸，形如枳實而殼薄不香。人家多收種為藩蘺，亦或收小實偽無枳實及青橘皮售之，不可不辨。葉［氣味］辛溫無毒［主治］下痢濃血，後重同萆薢等分，炒存性研每茶調二錢服，又治喉瘻消腫導毒。［附方］一新咽喉怪證：咽喉生瘡層層如疉，不痛日久有竅出臭氣，飲食用臭橘葉，煎湯連服必愈。［剌主治］風蟲牙痛，每以一合煎汁含之。橘核［主治］腸風下血不止，同樗根白皮等分炒研，每服一錢皂莢子煎湯調服。植物名實圖考[23] 枳實本經中品，橘踰淮而北為枳或云：江南亦別有枳，蓋即橘之酸酢者，以別枸橘耳，補筆談辨枳實、枳殼極晰。. 11.

(28) 二、枳實之本草系統圖. 圖三、枳實之本草系統圖 12.

(29) 三、枳實之本草考察  枳實原植物考訂據本草圖經[6]記載，宋代有兩種枳實並存，一種是翻肚如盆口狀，須陳久者為勝的柑橘屬植物，另一種是近道所出者俗呼臭橘。在韓彥直的橘錄：枸橘又未易多得，取朱欒之小者半破之，曝以為枳，異鄉醫生不能辨也。根據中國植物誌[24]，朱欒為酸橙的一變種，說明在宋代之作枳實藥用的應該是柑橘屬植物中的酸橙。明代本草綱目[22]木部列有枸橘：今之臭橘，山野甚多，實小殼薄，枝多刺而實臭，人多棄之。橘錄：枸橘色青氣烈，小者似枳實；大者似枳殼。近時難得枳實，人多植枸橘於籬落間，收其實，剖乾之以和藥，味與商州之枳，幾逼真矣。可用作綠籬者，在柑橘類植物中應是枸橘 Poncirus trifoliata (L.) Raf.，其乾燥幼嫩果實，俗稱綠籬即綠衣枳實、綠衣枳殼。故宋代以前的藥用枳實，應該是現代研究[25]中認為藥用價值較高的綠衣枳實、綠衣枳殼。因此可以推斷出宋代有兩種枳實並存的事實，且當時醫家逐漸認為酸橙枳實作為枳實的正品。本草綱目將枸橘另獨立專條，以區別於酸橙枳實(殼) ，並附有圖，枸橘圖葉為三出複葉，而從枳實(殼)圖中可看出葉為單身複葉，即可肯定為柑橘屬植物。 13.

(30)  性味、藥能之考訂歷代本草中枳實性味的記載為苦、寒、酸、辛；其功效以破氣除痞，化痰消積為主。不同時期對枳實的記載也有不同的看法，神農本草經[11-13]將枳實列為木部中品，記載：主治大風在皮膚中如麻豆苦癢，除寒熱結，止痢。意思是指枳實可以治療皮膚上較強的風邪。而關於枳實“主治大風”功效在現代用法中極少提及，歷代醫學著作上少見，只在外臺秘要中有類似的用法記載“取枳實以醋漬令濕，火炙令熱，可治蕁麻疹。在梁·陶弘景本草經集注[15]中記載枳實性味除苦、寒之外，還有酸。酸味具有收斂、固澀的作用，因此陶弘景認為枳實有“安胃氣，止溏泄”的作用。明·李時珍的本草綱目[7]記載枳實理氣作用 “枳實，枳殼大抵其功皆能利氣”。綜上所述，歷代本草著作上記載枳實具有破氣消結、化痰散痞的功效與現代藥理研究的結果是相同的。. 14.

(31) 表一、枳實性味、藥效整理[26] 【. 代表著作. 性味. 24】. 神農本草經. 效能主治大風在皮膚中如麻豆苦癢，除. 味苦，寒. 寒熱結，止痢，長肌肉，利五臟，益氣輕身。除胸脇痰癖，逐停水，破結實，消. 別錄. 酸，微寒，無毒. 脹滿、心下急痞痛、逆氣、脇風痛，安胃氣，止溏洩，明目。解傷寒結胸，入陷胸湯用。主上氣. 藥性論. 味苦、辛. 喘咳，腎內傷冷，陰痿而有氣，加而用之。. 珍珠囊. 純陰. 去胃中濕熱，消心下疼痞。. 本草正. 微酸. 逐瘀血。.  炮製考訂不同時期對枳實炮製方法不同，歷代本草著作記載關於枳實的炮製方法呈多樣化，如有去瓢、去核或去白為主的淨製方法，有將枳實進行切製作成飲片的，有的則添加輔料或不添加輔料的方法進行炮炙。淨製中的去瓢、切製、清炒法、加輔料炒法、炙法等方法自從出現以來到清代，歷代一直在沿用。如陶弘景本草經集注[15]：除中核，微炙 15.

(32) 令香。唐代新修本草[16]中認為使用枳實入藥應該“去核及中瓢”這樣效果更明顯。到明代時對枳實的炮製方法已有所發展，不單有淨製，還有飲片切製及加輔料炮炙等方法的使用，沿用的炮製方法，除了淨製、炒製以外，還能通過蜜炙的方法來提高其主下的功效，如李時珍本草綱目[7]中提到“以蜜炙用，則破水積以洩氣。”歷代本草著作中對枳實炮炙記載，多以加輔料炒制，而加輔料製主要記載的方法是麩炒。臺灣常用中藥材炮製實務彙編[27]認為枳實生品破氣化痰強烈，麩炒可緩和枳實烈性，降低揮發油含量，以消結散痞、芳香健胃力勝。然而關於對枳實的淨製，現代多認為淨製的目的是祛除雜質，至於是否去瓢囊沒有特別的要求[28]。 . 方用及禁忌之考訂. 表二、枳實方用整理[26] 配伍. 代表著作. 方用記載益氣，則佐之以人參、乾薑、白术；. 行氣配伍. 湯液本草破氣，則佐之以大黃、牽牛、芒硝。同白芍，治產後大滿痛；同川芎、甘. 止痛配伍. 本草經解草，治左脇痛脹。配芍藥，治腹痛；配黃耆，治腸下風；. 消痞配伍. 得配本草佐大黃，推邪穢；佐萎仁，消痞結。 16.

(33) 枳實苦瀉辛散，行氣之力較猛，故能行氣消脹、通腑導滯；枳實配伍厚朴、大黃可消實證脹滿，屬行氣配伍，代表方如傷寒論之大、小承氣湯，用大黃配伍二藥，既能行氣消脹滿，又能增強大黃之瀉下之功。枳實配伍芍藥、川芎，可養血活血止痛，如金匱要略主治“產後腹痛，煩滿不得臥”的枳實芍藥散，丹溪心法治左脅刺痛不可忍方。枳實配半夏，二藥同用，可治療痰痞證，如本草衍義補遺云：枳實瀉痰，能沖牆倒壁; 半夏能夠燥濕化痰，消痞散結。脾胃虛弱及孕婦慎服[28]。. 表三、枳實禁忌整理[26] 代表著作本草蒙筌. 禁忌能損至高之氣，不宜接迹服多。虛怯勞傷，尤當全禁。. 雷公炮製論氣弱者忌之本草正. 能損真氣，虛羸勿用. 得配本草. 大損元氣，非邪實者不可誤用。孕婦及血虛者禁用。. 17.

(34) 第二節中國產枳實之藥用植物學考察枳實藥材之來源植物，古本草主要為枸橘(Poncirus trifoliata Raf.) 供藥用，為芸香科(Rutaceae)枳屬(Poncirus)的植物。而中華人民共和國藥典 2010 年版 [2] 所載枳實：芸香科(Rutaceae)植物酸橙(Citrus aurantium L.)及其栽培變種或甜橙(Citrus sinensis Osbeck)的乾燥幼果。古本草與現代藥典中兩種為同科不同屬之植物。茲引述形態、分佈之植物分類學特性如下[24]：  枸橘 (Poncirus trifoliata ) 被子植物門 (Angiospermae) 雙子葉植物綱 (Dicotyledoneae) 原始花被亞綱 (Archichlamydeae) 芸香目 (Rutales) 芸香亞目 (Rutineae) 芸香科 (Rutaceae) 柑橘亞科 (Subfam. Aurantioidae) 枳屬 (Poncirus).  酸橙(Citrus aurantium) 被子植物門 (Angiospermae) 雙子葉植物綱 (Dicotyledoneae) 18.

(35) 原始花被亞綱 (Archichlamydeae) 芸香目 (Rutales) 芸香亞目 (Rutineae) 芸香科 (Rutaceae) 柑橘亞科 (Subfam. Aurantioidae) 柑橘屬 (Citrus) 柑橘亞屬 (Subgen. Citrus)  甜橙(Citrus sinensis) 被子植物門 (Angiospermae) 雙子葉植物綱 (Dicotyledoneae) 原始花被亞綱 (Archichlamydeae) 芸香目 (Rutales) 芸香亞目 (Rutineae) 芸香科 (Rutaceae) 柑橘亞科 (Subfam. Aurantioidae) 柑橘屬 (Citrus) 柑橘亞屬 (Subgen. Citrus). 19.

(36) 一、芸香科(Rutaceae)  共同特徵：常綠或落葉喬木，灌木或草本，稀攀緣性灌木。通常有油點，有或無刺，無托葉。葉互生或對生。單葉或複葉。花兩性或單性，稀雜性同株，輻射對稱，很少兩側對稱；聚繖花序，稀總狀或穗狀花序，更少單花，甚或葉上生花；萼片 4 或 5 片，離生或部分合生；花瓣 4 或 5 片，很少 2-3 片，離生，極少下部合生，覆瓦狀排列，稀鑷合狀排列，極少無花瓣與萼片之分，則花被片 5-8 片，且排列成一輪；雄蕊 4 或 5 枚，或為花瓣數的倍數，花絲分離或部分連生成多束或呈環狀，花葯縱裂，葯隔頂端常有油點；雌蕊通常由 4 或 5 個、稀較少或更多心皮組成，心皮離生或合生，蜜盆明顯，環狀，有時變態成子房柄，子房上位，稀半下位，花柱分離或合生，柱頭常增大，很少約與花柱同粗，中軸胎座，稀側膜胎座，每心皮有上下疊置、稀兩側並列的胚珠 2 顆，稀 1 顆或較多，胚珠向上轉，倒生或半倒生。果為蓇葖、蒴果、翅果、核果，或具革質果皮、或具翼、或果皮稍近肉質的漿果；種子有或無胚乳，子葉平凸或皺褶，常富含油點，胚直立或彎生，很少多胚。  分佈：本科全球约 150 屬，1600 種。分佈於全球熱帶和溫帶地區，中國原生有 29 屬，約 150 種，以南方為多。 20.

(37) 二、枳屬(Poncirus)  共同特徵：落葉或常綠小喬木或通常灌木狀。分枝多，刺多且長，枝常曲折，有二型：一為正常枝，或稱長梢，其節間與葉柄近於等長或較長；另一為短枝，或稱短梢，是由去年生枝的休眠芽發育成長，有正常葉 1-5 片。指狀 3 出葉，偶有單葉或 2 小葉，幼苗期的葉常為單葉及單小葉。花單生或 2-3 朵簇生於節上，花芽於去年生的枝條形成，花兩性；萼裂片及花瓣均 5 片；萼片下部合生；花瓣覆瓦狀排列，很少 4 或 6 片；雄蕊為花瓣數的 4 倍或與花瓣同數，花絲分離；子房被毛，6-8 室，每室有排成二列的胚珠 4-8 顆，花柱短而粗，柱頭頭狀。漿果具瓢囊和有柄的汁胞，又稱柑果，柑果通常圓球形，淡黃色，密被短柔毛，很少幾無毛，油點多；種子多飽滿，大，種皮平滑，子葉及胚均乳白色，單及多胚，種子發芽時子葉不出土。  分佈：2 種，自然分佈於長江中游兩岸各省及淮河流域一帶，東北至山東省南部約北緯 35°，西南至雲南富寧縣，南部止於五嶺山麓，是柑橘亞科自然分佈最北限的屬，長江沿岸各省高山山區有野生及半野生，通常栽種南部及各省區較低地區，越五嶺以南雖有栽培但生長不良。. 21.

(38) 表四、中國產枳屬植物之檢索表[24] 1. 常綠；花瓣被毛，雄蕊 35 枚以上。……... 富民枳 P. polyandra 1. 冬季落葉；花瓣無毛，雄蕊約 20 枚。 ........枳 Poncirus trifoliata. . 枳屬植物供藥用於枳實僅此一種，其形態與分佈如下：. I. 枳 Poncirus trifoliata (L.) Raf.  形態：小喬木，高 1-5 m，樹冠傘形或圓頭形。枝綠色，嫩枝扁，有縱棱，刺長 4 cm，刺尖乾枯狀，紅褐色，基部扁平。葉柄有狹長的葉翼，通常指狀 3 出葉，很少 4-5 小葉，或雜交種的則除 3 小葉外尚有 2 小葉或單小葉同時存在，小葉等長或中間的一片較大，長 2-5 cm，寬 1-3 cm，對稱或兩側不對稱，葉緣有細鈍裂齒或全緣，嫩葉中脈上有細毛，花單朵或成對腋生，先葉開放，也有先葉後花的，有完全花及不完全花，後者雄蕊發育，雌蕊萎縮，花有大、小二型，花徑 3.5-8 cm；萼片長 5-7 mm；花瓣白色，匙形，長 1.5-3 cm；雄蕊通常 20 枚，花絲不等長。果近圓球形或梨形，大小差異較大，通常縱徑 3-4.5 cm，橫徑 3.5-6 cm，果頂微凹，有環圈，果皮暗黃色，粗糙，也有無環圈，果皮平滑的，油細胞小而密，果心充實，瓢囊 6-8 瓣，汁胞有短柄，果肉含黏液，微有香櫞氣味，甚酸且苦，帶澀味，有種子 20-50 粒；種子闊卵形，. 22.

(39) 乳白或乳黃色，有黏液，平滑或間有不明顯的細脈紋，長 9-12 mm。花期 5-6 月，果期 10-11 月。  分佈：自然分佈於長江中游兩岸各省及淮河流域一帶，東北至山東省南部約北緯 35°，西南至雲南富寧縣，南部止於五嶺山麓，是柑橘亞科自然分佈最北限的屬，長江沿岸各省高山山區有野生及半野生，南部及各省區較低地區通常栽種。產山東（日照、青島等）、河南（伏牛山南坡及河南南部山區）、山西（晉城、陽城等縣）、陝西（西鄉、南鄭、商縣、藍田等縣）、甘肅（文縣至成縣一帶）、安徽（蒙城等縣）、江蘇（泗陽、東海等縣）、浙江、湖北（西北部山區及西南部）、湖南（西部山區）、江西、廣東（北部栽培）、廣西（北部）、貴州、雲南等省區。. 23.

(40) 圖四、中國植物誌[24]之枸橘圖 24.

(41) 三、柑橘屬(Citrus) . 共同特徵：小喬木。枝有刺，新枝扁而具棱。單身複葉，葉翼通常明顯，很少甚窄至僅具痕跡，單葉的僅 1 種（香櫞。但香櫞的雜交種常具葉翼），葉緣有細鈍裂齒，很少全緣，密生有芳香氣味的透明油點。花兩性，或因發育不全而趨於單性，單花腋生或數花簇生，或為少花的總狀花序；花萼杯狀，5-3 淺裂，很少被毛；花瓣 5 片，覆瓦狀排列，盛花時常向背卷，白色或背面紫紅色，芳香；雄蕊 20-25 枚，很少達 60 枚，子房 7-15 室或更多，每室有胚珠 4-8 或更多，柱頭大，花盤明顯，有密腺。柑果，果蒂的一端稱為果底或果基或基部，相對一端稱為果頂，或頂部，外果皮由外表皮和下表皮細胞組織構成，密生油點，油點又稱為油胞，外果皮和中果皮的外層構成果皮的有色部分，內含多種色素體，中果皮的最內層為白色線網狀組成，稱為橘白或橘絡，內果皮由多個心皮發育而成，發育成熟的心皮稱為瓢囊，瓢囊內壁上的細胞發育成菱形或紡錘形半透明晶體狀的肉條稱為汁胞，汁胞常有纖細的柄；種子甚多或經人工選育成為無籽，種皮平滑或有肋狀棱，子葉及胚乳白或綠色，很少乳黃色，單胚或多胚，多胚的其中有一個可能是有性胚，其餘為無性胚，種子萌發時子葉不出土。 25.

(42) . 分佈：約 20 種，原產亞洲東南部及南部。現熱帶及亞熱帶地區常有栽培。我國包含引進栽培的約有 15 種，其中多數為栽培種。主產在秦嶺南坡以南、包括甘肅省南端沿白龍江河谷、陝西省南部沿漢水河谷、河南省沿伏牛山至大別山南坡、安徽省南部沿長江局部地區，向東至江蘇省太湖地區等地、約北緯 33°以南至海南氣候較炎熱地方。但北緣地帶以寬皮橘類如朱紅橘、皺皮柑、黃皮橘以及自 70 年代以後逐步推廣的溫州蜜柑等為主。. 26.

(43) 表五、中國產柑橘屬植物之檢索表[24] 1 葉翼長至少為其葉身長的一半以上。野生植物。……….…….(2) 大翼橙亞屬 Subgen. papeda 1 葉無葉翼，或有狹小至明顯的葉翼，但其長度不到葉身長的一半，但萌發枝的葉其葉翼有時較其葉身稍長。………………….……..……….(5)柑橘亞屬 Subgen. Citrus 2 葉翼長比其葉身長 2-3 倍；總狀花序，稀同時兼有單花；果皮厚 12-20 mm。 ……………..………..紅河橙 Citrus hongheensis 2 葉翼比葉身稍長以至略短；花單生或兼有少花的總狀花序；果皮厚稀達 10 mm。………….………………………….(3) 3 葉頂部短尖至漸尖，葉緣無裂齒或很少在近頂部邊緣有疏而淺的少數鈍齒。 ………….…………..宜昌橙 Citrus ichangensis 3 葉頂端鈍或近於圓，有時甚短尖，葉緣有明顯的鈍裂齒.(4) 4 種子的種皮有蜂窩狀網紋。 …….箭葉橙 Citrus hystrix 4 種子的種皮無蜂窩狀網狀。 ..馬蜂橙 Citrus macroptera 5 葉為單葉（雜交種偶有具關節），無葉翼；果皮比果肉厚，或橫切面果皮的厚度約為果厚度的一半。若果皮甚薄，則果頂部有封閉型的附生心皮群。…….………..(6). 27.

(44) 5 單身複葉，葉翼甚狹窄或寬闊；果肉比果皮厚。…..……(8). 6 果肉遠比果皮厚，果頂部有封閉型的附生心皮群。………... 雲南香櫞 Citrus medica L. var. yunnanensis 6 果皮比果肉厚或為果肉厚度的一半。………………….(7). 7 果不分裂。 ……………………….….……香櫞 Citrus medica 7 果頂部分裂成手指狀肉條。………………………...……. 佛手 Citrus medica L. var. sarcodactylis 8 子葉乳白色。………….……………………………………….(9) 8 子葉綠色，通常多胚，果皮稍易剝離或甚易剝離；腋生單花或少花簇生。…………………..…………………………………….(15). 9 腋生單花，果皮頗易剝離。………...… 香橙 Citrus junos 9 總狀花序，有時兼有腋生單花；果皮不易剝離。……..….(10) 10 果徑 10 cm 以上，可育種子常呈不定形的多面體，頂部扁平而寬闊且截平。…………………………..……….(11) 10 果徑 10 cm 以內，可育種子的種皮圓滑，或有細肋紋，頂端尖或兼有稍寬闊而截平的種子。……….….….(12) 11 嫩枝、葉背至少沿中脈被毛，花梗，萼片及子房均被毛種子具 28.

(45) 單胚。 ……………………………..…..…….柚 Citrus maxima 11 各部無毛，或僅嫩葉背面中脈有疏短毛；種子多胚。………..….. 葡萄柚 Citrus paradisi. 12 果皮臘黃色或淡綠黃色，果頂端有長或短的乳頭狀突尖，果肉甚酸。…………………………………..………..(13) 12 果皮橙紅，果頂通常無乳頭狀突，果肉味酸或甜。……...(14). 13 葉寬稀超過 4 cm，花瓣長稀超過 1.2 cm，果徑通常不超過 4 cm……………...……………來檬 Citrus aurantifolia 13 葉寬通常超過 4 cm，花瓣長 1.5 cm 或更長，果徑通常 5 cm 以上。 ….……………………..………檸檬 Citrus limon 14 果肉味酸，有時帶苦味或特異氣味。酸橙 C. aurantium 14 果肉味甜或酸甜適度，稀帶苦味。 ..甜橙 Citrus sinensis 15 果肉甚酸且有檸檬氣味，花瓣背面淡紫紅色。………………….…. 黎檬 Citrus limonia 15 果肉甜或酸，無檸檬氣味，花瓣白色（極少半野生狀態時為淡紫紅色）；單花腋生或數花簇生。…..…………………….(16). 29.

(46) 16 葉柄頗長。 ……………………......…..柑橘 Citrus reticulata 16 葉柄較短。 ………………….……..…立花橘 Citrus tachibana.  柑橘屬植物供藥用於枳實粗分二種，其形態與分佈如下： I. 酸橙 Citrus aurantium L.  形態：小喬木，枝葉密茂，刺多，徒長枝的刺長達 8 cm，葉色濃綠，質地頗厚，葉翼倒卵形，基部狹長，長 1-3 cm，寬 0.6-1.5 cm，或個別品種幾無葉翼。總狀花序有花少數，有時兼有腋生單花，有單性花傾向，即雄蕊發育，雌蕊退化；花蕾橢圓形或近圓球形；花萼 5 或 4 淺裂，有時花後增厚，無毛或個別品種被毛；花大小不等，花徑 2-3.5 cm；雄蕊 20-25 枚，通常基部合生成多束。果圓形或扁圓形，果皮稍厚至甚厚，難剝離，橙黃至朱紅色，油胞大小不均勻，凹凸不平，果心實或半充實，瓢囊 10-13 瓣，果肉味酸，有時有苦味或兼有特異氣味；種子多且大，常有肋狀棱，子葉乳白色，單或多胚。花期 4-5 月，果期 9-12 月。  分佈：秦嶺以南各地，通常栽種，有時為半野生。. II. 甜橙 Citrus sinensis Osbeck  形態：喬木，枝少刺或近於無刺。葉通常比柚葉略小，葉翼狹長，明顯或僅具痕跡，葉片卵形或卵狀橢圓形，很少披針形，長 6-10 30.

(47) cm，寬 3-5 cm，或有較大的。花白色，很少背面帶淡紫紅色，總狀花序有花少數，或兼有腋生單花；花萼 5-3 淺裂，花瓣長 1.2-1.5 cm；雄蕊 20-25 枚；花柱粗壯，柱頭增大。果圓球形，扁圓形或橢圓形，橙黃至橙紅色，果皮難或稍易剝離，瓢囊 9-12 瓣，果心實或半充實，果肉淡黃、橙紅或紫紅色，味甜或稍偏酸；種子少或無，種皮略有肋紋，子葉乳白色，多胚。花期 3-5 月，果期 10-12 月，遲熟品種至次年 2-4 月。 . 分佈：秦嶺以南各地廣泛栽種，西北限約在陝西西南部、甘肅東南部城固、陝西洋縣一帶，西南至西藏東南部墨脫一帶，約海拔 1500 公尺以下地方也有。. 31.

(48) 表六、中國產枳實的原植物種類[29] 中文名. 學名. 主產地區. 枳實幼果. Poncirus trifoliata (L.) Raf.. 福建、陝西. 酸橙幼果. Citrus aurantium L.. 四川、浙江、江西. 香圓幼果. Citrus wilsonii Tanaka. 等地. 代代花幼果. Citrus aurantium L. var.. 江蘇. amara Emgl. 枸櫞幼果. 雲南. Citrus medica L.. 陝西、四川、廣西、柚幼果. Citrus grandis (L.) Osbeck 江西. 宜昌橙幼果. Citrus ichangensis Swingle. 四川. 紅河橙幼果. Citrus hongheensis Yldl. 雲南. 甜橙幼果. Citrus sinensis (L.) Osbeck. 福建、雲南、貴州. 香橙幼果. Citrus junos Tanaka. 江蘇等地. 橙柚桔等雜交種. 江蘇、浙江等地. 32.

(49) 第三節臺灣產芸香科植物考察形態：灌木或喬木，極稀為草木(臭節草屬)。花為單葉或複葉，大多具油腺；無托葉。花兩性，稀單性，多放射對稱，萼片 4~5 覆瓦狀排列，分離或連生；花瓣覆瓦狀，罕鑷合狀排列，多分離；雄蕊與花瓣同數或倍數，稀更多，離生或稀合生；花葯 2 室，內向，縱裂；花盤多存於雄蕊叢中；子房上位，合生，心皮常分為 4~5 室，有時心皮向基部分離或稀全分離，花柱離生或合生，胚珠常為 2 枚疊生。果皮有油腺，為漿果(橙果)、核果、蒴果等。種子有或無胚乳，胚直立或彎曲。分佈：臺灣的芸香科植物分布範圍相當廣，自海濱至全島山地均有生長，但部分種類之族群數量不多，且僅生長於特定地點，部分種類為經濟樹種，有龐雜的栽培種類。臺灣有 13 屬。.. 33.

(50) 表七、臺灣產芸香科植物之檢索表[30] A1.心皮離生或在約 1/2 以下處合生，果實開裂。 B1.木本植物；每心皮具 1-2 枚胚珠。 C1.葉互生..........................................13.花椒屬(Zanthoxylum) C2.葉對生。 D1.花序頂生或頂生和上部腋生混生；奇數羽狀複葉……11. 臭辣樹屬(Tetradium) D2.花序腋生或在小枝葉下；掌狀葉具 1-3 小葉..................7. 山刈葉屬(Melicope) B2.草本植物；每心皮具 6-8 枚胚珠………………………......3. 臭節草屬(Boenninghausenia) A2.心皮合生，果實不開裂。 B1.雄蕊與花瓣同數或 2 倍數。 C1.單葉或單小葉。 D1.葉互生。 E1.莖有刺.............................................2.烏柑屬(Atalantia) E2.莖無刺............................................10.茵芋屬(Skimmia) D2.葉對生.........................................1.降真香屬(Acronychia) C2.複葉；具 3 枚小葉或更多。 34.

(51) D1.莖有刺........................................12.飛龍掌血屬(Toddalia) D2.莖無刺。 E1.葉互生。 F1.花柱宿存；各子房室內僅懸垂 1 枚……………6. 山橘屬(Glycosmis) F2.花柱脫落；各子房室內具 2 枚胚珠。 G1.花芽球形或寬卵圓形，花柱粗短，柱頭平坦，幾乎與花柱........................5.黃皮果屬(Clausena) G2.花芽圓柱形或窄卵形，花柱細長，常較子房長，柱頭較花柱寬........................8.月橘屬(Murraya) E2.葉對生...................................9.黃蘗屬(Phellodendron) B2.雄蕊較花瓣之 2 倍數更多......................................4.柑橘屬(Citrus). 35.

(52) 一、柑橘屬(Citrus) 本屬植物大部分為經濟樹種，故有野生種龐雜的栽培種類，既有不少原始類型，又有較進化類型的複雜種群。臺灣產 4 種。形態：灌木或喬木，常刺。單身複葉，革質，柄常有翼，互生。花腋生成密繖花序或小聚繖花序，味香；花萼杯或壺狀，3-5 裂；花瓣 4-8；線狀長橢圓形；覆瓦狀排列。雄蕊 20~60；花葯長橢圓形；子房多室，花柱短，柱頭頭狀，胚珠每室 4~8。柑果大。長橢圓形或圓形。肉質，具多室，以膜質膈片分開，子房室內具少數種子及充滿水平紡綞狀形細胞；種子水平或下垂，外種皮膜質或革質。分佈：本屬分布於亞洲及馬來西亞之熱帶、亞熱帶地區。臺灣本屬栽培種頗多。表八、臺灣產柑橘屬植物之檢索表[30] A1.葉柄具狹翼；果直徑 2-3.5 cm。 B1.葉長橢圓形；果球形..........................3.橘柑 Citrus tachibana B2.葉卵橢圓形；果扁圓形................2.臺灣香檬 Citrus depressa A2.葉柄具寬翼；果直徑約 5-9 cm。 B1.葉翼線形........................................4.南庄橙 Citrus taiwanica B2.葉翼三角狀卵圓形............................1.酸橙 Citrus aurantium. 36.

(53) . Citrus aurantium L. 酸橙、來母. 形態：小喬木；小枝光滑，具細長或短刺。葉革質，寬卵形至寬橢圓形；長 8~12 cm，寬 4~7 cm，頂端鈍或尖形，基部楔形，葉緣為全緣或稍有淺鋸齒緣，側脈約 7 對；葉柄長 2-3 cm，具三角狀卵圓形寬翼，翼寬約 2 cm，經常頂端成平面。花白色，單生或 2~3 朵叢生；花萼殼斗狀，裂片為寬卵狀三角形，光滑或有時具短柔毛；花瓣 4~5，長橢圓形，長約 1.5 cm，寬約 4 mm，頂端鈍尖或尖形；雄蕊具 4~5 雄蕊束，花絲光滑，長 6~10 mm，花葯長橢圓形；子房光滑，果實扁球形，直徑 5~8 cm，黃橙色，厚內壁，8~12 瓣，果肉極酸並稍有苦味。分布：亞洲東南部，臺灣僅產蘭嶼。. 37.

(54) 圖五、臺灣植物誌[31]之酸橙圖 38.

(55) . Citrus sinensis Osbeck 甜橙(雪柑) 俗名柳丁，因柳橙果頂部有一圓圈柱頭痕跡，故名印子柑，英名. 亦有 Golden seal orange 之稱，屬甜橙類，為華南原產，引入臺灣已有相當久的歷史，一直到民國 50 年代才受重視，廣為栽培[32]。形態：柳橙是常綠性灌木或小喬木，莖葉有濃烈的氣味；三至五月間開白花。秋末冬初果實成熟。分佈：主要種植在中、南部靠山的平地和海拔五百公尺以下的山坡地間，以台南縣種得最多，其次為嘉義縣、南投縣、台中縣、雲林縣及高雄縣等。. 圖六、甜橙 Citrus sinensis Osbeck (攝於古坑) 39.

(56) 圖七、甜橙 Citrus sinensis Osbeck 之花. 圖八、甜橙 Citrus sinensis Osbeck 之果實 40.

(57) 第四節枳實之生藥學文獻考察一、基原本品為芸香科(Rutaceae)植物酸橙 Citrus aurantium L.及其栽培變種或甜橙 Citrus sinensis Osbeck 之乾燥幼果[1]。五~六月收集自落的果實，除去雜質，自中部橫切為兩半，曬乾或低溫乾燥。較小者直接曬乾或低溫乾燥。二、一般性狀本品呈半球形，少數為球形，直徑為 0.5~2.5 cm。外果皮黑綠色或暗棕綠色，具顆粒狀突起和皺紋，有明顯的花柱殘基或果梗痕。切面中果皮略隆起，厚 0.3~1.2 cm，黃白色或黃褐色，邊緣有 1~2 列油室，瓢囊棕褐色。質堅硬。氣清香，味苦、微酸。三、鑑別 A. 酸橙 Citrus aurantium L. [33]  組織：表皮由 1 列類方形或切向延長的類長方形細胞組成，外被 2~4 μm 厚的角質層，並有氣孔。中果皮發達，有大型油室不規則排列成 1~2 列，油室卵形至長卵形，徑向直徑 330~1400 μm，切向直徑 41.

(58) 255~540 μm。外側中果皮細胞較小，排列較緊密；內側中果皮細胞大，排列較疏鬆，並有維管束縱橫散布。中果皮細胞中含有草酸鈣方晶或棱晶。  粉末：粉末淡棕色，氣清香濃烈，味苦、辛，微酸。果皮表面細胞多角形、類方形或狹長多角形；氣孔類圓形，副衛細胞 6~9 個。中果皮薄壁細胞類圓形或橢圓形，由外向內逐漸增大；細胞壁不均勻增厚。導管多為螺紋，亦有網紋導管，直徑 9~18 μm。瓢囊表皮細胞狹長，微波狀或皺縮成線形，其下層薄壁細胞含方晶。草酸鈣方晶呈多面形、雙錐形或菱形，有時排列為 1~2 列。多油室碎片、揮發油滴散布。 B. 甜橙 Citrus sinensis Osbeck[34]  組織：角質層厚 1~3 μm；氣孔極多，且明顯向外突起；油室卵圓形，徑向直徑 210~615 μm，切向直徑 165~375 μm；中果皮通氣組織發達；中果皮薄壁細胞中遍布扇形橙皮苷結晶。  粉末：氣孔明顯突起，副衛細胞多為 8 個；中果皮通氣組織薄壁細胞分枝狀；導管直徑 9~15 μm，黃色橙皮苷結晶多見。 42.

(59) C. 綠衣枳實 Poncirus trifoliata Raf.  組織：表皮具由 1~14 個細胞組成的非腺毛，長 78~286 μm，壁疣明顯；表皮細胞呈長三角形，頂部乳突狀，角質層厚達 12 μm；油室類圓形，徑向直徑 105~615 μm，切向直徑 85~575 μm；中果皮通氣組織較發達。  粉末：中果皮通氣組織細胞壁呈分支狀，非腺毛多見，由 1~14 細胞組成，壁明顯增厚，並具疣狀突起。. 43.

(60) 表九、枳實的直觀鑑定整理[35] 正品酸橙表面特徵. 偽品甜橙. 綠衣枳實. 外果皮黑綠色或暗黑褐色，突綠褐色，具較多棕綠色，具顆粒狀. 起顆粒微小茸毛，果柄痕四. 突起，果頂花柱殘. 周常具放射狀. 基微突起，果梗痕. 紋路. 圓盤狀橫剖面. 中果皮黃白色至黃瓢囊 8~13. 瓢囊 5~7 瓣，果. 褐色，瓢囊 7~12. 瓣，果皮約皮約佔 1/2. 瓣，果皮約佔 2/3. 佔 1/3. 毛茸. -. 草酸鈣結晶. 方晶呈斜方形，多. 方晶，有的方晶. 面形或雙錐形. 似簇晶. 黃色或無色，圓形. 黃色扇形狀無. 或無定形團塊，有. 結晶，較多. 橙皮苷結晶. -. 的顯放射狀紋理. 44. +.

(61) 第五節枳實之成分及藥理學文獻考察一、成分[36] A.. 酸橙 Citrus aurantium L.. • 果實含橙皮苷(hesperidine)、新橙皮苷(neohesperidine)、柚皮苷 (naringin) 、辛弗林 (synephrine) 、 N-methyltyramine[26] 、 quinoline 、那可汀(narcotine)、去甲腎上腺素(noradrenaline)、色胺(tryptamine)、酪胺(tyramine) • 果實未成熟時含 naringin 、野漆樹苷 (rhoifolin) 、忍冬苷 (lonicerin)、neohesperidine(成熟時消失)、川陳皮素(nobiletin)、福橘素(tangeritin)、甜橙素(senensitin) • 種子含檸檬苦素類(limonoids)、宜昌橙苦素(ichangin)、nomilin、 limonin、黃柏酮(obacunone)、deacetyl-nomilinic acid、isolimonic acid、nomilinic acid[37]. B.. 甜橙 Citrus sinensis Osbeck. • 果實含柚皮芸香苷 (narirutin) 、異櫻花素 -7- 芸香糖苷 (isosakuranetin-7-rutinoseide)、莖草枸櫞苷(eriocitrin)、辛弗林 (synephrine)、N-methyltyramine[26] 、柚皮芸香苷(narirutin)、那可汀 (narcotine) 、枸櫞酸 (citric acid) 、蘋果酸 (malic acid) 、 45.

(62) xylosylvitexin、friedelin[36] • 果皮含 hesperidine 、 naringin 、柑屬苷 (citrusin) 、松柏苷 (coniferin)、丁香苷(syringin)、福橘素(tangeritin)、川陳皮素 (nobiletin) [26] C.. 綠衣枳實(枸橘) Poncirus trifoliata Raf.. • 果實含橙皮苷 (hesperidine) 、柚皮苷 (naringin) 、新橙皮苷 (neohesperidine)、枸橘苷(poncirin)、枸橘素(citrifoliol)、枳屬苷 (citrifolioside)、棕櫚酸(palmitic acid)、硬脂酸(stearic acid)、油酸(oleic acid) 、linoleic acid 、linolenic acid、辛弗林(synephrine)、 N-methyltyramine[26] • 未成熟果實含枸橘香豆精(poncimarin)、isoponcimarin、葡萄內酯(aurapten)、6-methoxyaurapten、香柑內酯(bergapten)、歐前胡內酯(imperatorin) • 種子含異茴芹香豆精(isopimpinellin)、獨活內酯(heraclenin) 、栓翅芹內酯水化合物(prangeninhydrate)、limonin、ichangin • 果皮含揮發油 (0.469%): α-pinene 、 β-pinene 、 myrcene 、 limonene、camphene、γ-terpinene、ρ-cymene、caryophyllene[36]. 46.

(63) 二、藥理枳實[36] 1.. 胃腸道：以家兔創傷性體表胃電圖為指標，枳實煎劑灌胃，可使胃腸平滑肌興奮，胃電頻率加快，幅度增加。枳實可顯著減小結腸肌條的平均收縮幅度及頻率，抑制大鼠離體結腸肌的收縮活動，該抑制作用部分與 α 受體有關[38]。. 2.. 陰道平滑肌：枳實有興奮離體家兔環行陰道平滑肌的作用，能誘發肌條的節律收縮活動或加強原有自發性收縮肌條的收縮頻率。因此，枳實對離體家兔陰道有收縮作用。. 3.. 心血管系統：枳實注射液及辛弗林和 N-甲基酪胺靜脈注射麻醉犬能顯著增強多種心肌收縮性和泵血功能的指標，具有強心、增加心輸出量和收縮血管提高總周邊阻力，導致左室壓力和動脈血壓上升。枳實注射劑 0.1~0.2 g 對離體豚鼠心臟可增加冠狀動脈流量，增強心收縮力，對豚鼠心肺製備能使心收縮力加強，心率減慢，心輸出量增加。N-甲基酪胺能加強離體豚鼠心臟和在家兔心收縮力，β 受體阻滯劑能拮抗此作用。枳實有濃度依賴性的提高兔主動脈條張力，使兔主動脈平滑肌收縮。低濃度枳實提取液可濃度依賴性的增大豚鼠心室肌細胞 L 型鈣電流，有促進鈣通道開放的作用；高濃度枳實提取液有抑制心室肌細胞 L 型鈣電流， 47.

(64) 有抑制鈣通道開放的作用[38]。 4.. 抗炎：柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷有抗炎作用，小鼠腹腔注射 100 mg/kg，對甲醛性足趾腫脹有明顯抑制作用，但對 5-HT 引起的炎症無效。大鼠口服柚皮苷和新橙皮苷對角叉菜膠引起的足趾腫脹有明顯抑制作用。多種類黃酮對角叉菜膠產生的腫脹和福氏完全佐劑產生的關節炎均有明顯的抗炎作用，對創傷的癒合也有抑制作用，此兩作用相關。其強弱順序如下：芹菜素 > 槲皮素 > 芸香苷 > 橙皮苷 > 柚皮苷[39]。. 5.. 抗菌、抗病毒：柚皮苷元和橙皮素在試管內對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、痢疾桿菌有抑制作用，苷的作用較苷元弱。有報告認為柚皮聒對酵母和真菌有抑制作用，而柚皮苷元對真菌無效。柚皮苷、柚皮苷元或(和)其酯或鹽有抗病毒作用，有助於愛滋病治療[40]。. 6.. 抗過敏：大鼠口服枳實水提取液對 I 型被動皮膚過敏反應(PCA) 有明顯抑制作用。多種類黃酮如橙皮素、柚皮苷、新橙皮苷等均可抑制反應素抗體(reaginic antibody)產生的被動皮膚過敏反應。橙皮苷 0.5~1.0 mmol/L 可抑制化合物 48/80 誘發的大鼠肥大細胞組胺的釋放，川陳皮素有較弱的作用。大鼠口服橙皮苷對被動皮膚過敏反應有明顯抑制作用，但對摘除腎上腺素大鼠則無效，提 48.

(65) 示橙皮苷為 I 型過敏反應抑制劑[41]。 7.. 抗氧化：柚皮苷元、橙皮素對由抗壞血酸或硫酸亞鐵誘導的非酶性脂質過氧化有一定程度的抑制作用，苷元作用比相應的苷作用強。柚皮苷對氫過氧化枯烯(cumene hydroperoxide)在體外使紅細胞膜過氧化產生丙二醛和發螢光的脂溶性產物有一定的抑制作用。柚皮苷還有較強的清除超氧陰離子的作用[40]。. 8.. 抗腫瘤：柚皮苷在體外對人癌組織(乳腺癌、結腸癌、肝癌)DNA 合成有較強抑制作用，但對人正常組織(骨髓、脾)則無影響。柚皮苷和柚皮苷元能選擇性抑制癌細胞生長，可用於對化療、放療耐受的患者治療。川陳皮素在體外對人鱗狀細胞癌 HTB43 的生長有明顯抑制作用。小鼠靜注柚皮苷 10 μg，3 小時後百日咳病原體，2 小時後其血中腫瘤壞死因子活性提高。柚皮苷及其苷元和川陳皮素對某些化學物質致突變的作用有明顯的抑制。. 9.. 抗血小板聚集：枳實對健康大鼠及血瘀模型大鼠均具有明顯的抗血小板聚集及抑制紅細胞聚集的作用，其作用優於 Aspirin，並呈明顯的量效關係。. 10. 毒性：小鼠靜脈注射枳實注射劑的 LD50 為 71.8 ± 6.5 g/kg，腹腔注射的 LD50 為 267 ± 37 g/kg。. 49.

(66) 三、成分之藥理作用[42] 胃腸道雙重作用： • Hesperidine：先興奮離體小腸平滑肌，後抑制。 • Naringin：解痙。心血管系統： • Synephrine：強心、增加心輸出量、收縮血管提高周邊阻力，左室及動脈血壓上升。 • N-methyltyramine、 hesperidine ：加快心率。 • 抗炎作用：hesperidine、naringin、neohesperidine。 • 抗菌、抗病毒： naringin。抗過敏： hesperidine、naringin、neohesperidine。抗氧化： hesperidine、naringin。. 50.

(67) 第三章. 實驗材料與方法. 第一節枳實材料之收集(三種品項各三批) . Citrus aurantium L. 酸橙(CA)：①②③  取樣自台灣部分中藥廠. . Citrus sinensis Osbeck 甜橙(CS)：①②③  取樣自台灣部分中藥廠、中藥局. . Poncirus trifoliata (L.) Raf. 綠衣枳實(PT)：①②③  取樣市場品三批. 51.

(68) 第二節枳實之顯微鑑別一、組織冷凍切片 A、化學試劑甘油(glycerin)、OCT 膠、95%乙醇(ethanol)、無水酒精(anhydrous alcohol)、safranin O、fast-green、xylene B、試劑配製甘油水(甘油:水=1:1)、safranin 試劑(將 safranin O 1 g 溶於 50%乙醇 100 mL)、fast-green 試劑(將 fast-green 0.5 g 溶於 95%乙醇 100 mL)、50%乙醇、60%乙醇、80%乙醇、95%乙醇、無水酒精：xylene (2:1)、無水酒精：xylene (1:1)、無水酒精：xylene (1:2) C、實驗儀器冷凍切片機、載玻片、蓋玻片、顯微鏡(Nikon YS 100、Nikon Eclipse E600)、刀片、鋁箔紙 D、實驗方法 1. 藥材處理將乾燥藥材濕潤軟化或浸入水中，並切成適當的大小。 ↓將擦手紙撕成適當大小，用水潤濕並擰乾。 ↓修成適當大小的藥材用濕擦手紙包住濕潤。 ↓放入夾鏈袋中密封，待藥材軟化。 52.

(69) ↓軟化至徒手切藥材不費力即可。 2. 冷凍切片 ↓在鋁箔做成的容器中放入適當的 OCT 膠，待膠稍微凝固再放入一定方向的藥材以便固定，最後再加入適當的膠蓋過藥材。 ↓切成適當厚度(約 10~20 μm) 。 ↓在載玻片上滴加少許稀甘油，再將切片吸至載玻片上。 3. 永久切片製備 ↓將切好的玻片至於 15 cm 培養皿上，稍微擦乾稀甘油。 ↓滴 safranin 染 5~30 min，等待期間蓋上蓋子避免乙醇蒸發 (染植物組織木化的部位，以 60％的乙醇清洗，在顯微鏡下觀察組織為紅色即可，粉紅色代表染色時間還不夠長) 。 ↓60％乙醇清洗 2~3 次 1~2 min/次。 ↓80％乙醇清洗 2~3 次 1~2 min/次。 ↓95％乙醇清洗 1~2 次 1~2 min/次。 (以下步驟不可含水) ↓滴加 fast-green (0.5~2 min)，反應非常快，要趕快洗掉。 ↓無水酒精清洗，並將片子泡在其中。 ↓無水酒精：xylene (2:1) 1 次，每次約 3~5 min 。 53.

(70) ↓無水酒精：xylene (1:1) 1 次，每次約 3~5 min 。 ↓無水酒精：xylene (1:2) 1 次，每次約 3~5 min 。 ↓xylene. 2 次，每次約 3~5 min。. ↓封片，待膠乾後置於顯微鏡下觀察。. 二、粉末鏡檢 A、化學試劑水合氯醛 B、實驗儀器顯微鏡(Nikon YS 100、Nikon Eclipse E600)、載玻片、蓋玻片 C、實驗方法 ↓粉末鏡檢將藥材打粉。 ↓過 60 目篩。 ↓取些微粉末在載玻片上。 ↓滴上兩滴水合氯醛，在酒精燈上加熱數秒。 ↓滴上一滴水合氯醛。 ↓蓋上蓋玻片，置於顯微鏡下觀察。. 54.